目的 探討預存糖原對肝部分切除術中熱缺血再灌注損傷的保護作用。方法 將38 例Child A-B 級擬行肝部分切除的原發(fā)性肝癌患者按入院順序分為試驗組及對照組，每組19 例。試驗組于術前24 h 內(nèi)靜脈滴注高濃度葡萄糖，對照組不做特殊處理。兩組患者均采用阻斷第一肝門方法行病變肝臟切除術。抽血檢驗所有患者術前及術后第1、5 天的肝功能情況。分別于缺血前、缺血后及再灌注2 h 獲取正常肝組織，檢測所有患者肝組織糖原含量、缺血前、缺血后及再灌注2 h 肝組織超氧化物歧化酶（SOD）活性。采用實時定量PCR 方法檢測肝門阻斷前及再灌注2 h 后肝組織Bcl- 2 mRNA 轉錄水平。結果 試驗組肝組織糖原含量明顯高于對照組（Plt;0.01），術后第1、5 天肝臟功能優(yōu)于對照組（Plt;0.05），在缺血后、再灌注2 h 其SOD 活性高于對照組（Plt;0.05），再灌注2 h 后試驗組Bcl-2 mRNA 表達上調高于對照組。結論 術前預存糖原可顯著減輕患者肝切除術中因實施肝門阻斷所導致的缺血再灌注損傷，其機制可能與預存糖原上調肝臟Bcl-2 mRNA 轉錄有關。
目的 研究內(nèi)皮素-3(endothelin-3,ET-3)mRNA的表達水平與急性胰腺炎時胰腺炎癥程度的關系。方法 將54只SD大鼠編號后隨機分為4組，其中假手術組9只，胰腺炎組、動脈給藥組和靜脈給藥組〔多巴胺： 5 μg/（kg·min）〕各15只，按Aho法用4.5%?；悄懰徕c膽胰管逆行注射制作急性胰腺炎模型，分別在1、6及24 h取胰腺組織,采用半定量逆轉錄聚合酶鏈式反應檢測ET-3基因的轉錄水平，并觀察各組胰腺組織病理變化，確定ET-3 mRNA的表達水平與胰腺炎炎癥程度的關系。結果 模型制作后1、6及24 h均可見到ET-3 mRNA表達，各組（除假手術組外）均以6 h時ET-3 mRNA表達最強。除1 h外，動脈給藥組ET-3 mRNA表達量明顯低于靜脈給藥組及胰腺炎組（P＜0.05，P＜0.01）； 而假手術組在任何時相均明顯低于另外3組（P＜0.05，P＜0.01）。各組胰腺組織病理學評分按假手術組→動脈給藥組→靜脈給藥組→胰腺炎組的順序逐漸升高。結論 ET-3 mRNA的表達與胰腺炎炎癥程度有一定關系，ET-3 mRNA表達量隨胰腺炎嚴重程度的加重而增加； 急性胰腺炎中，多巴胺動脈給藥比靜脈給藥有效。
目的 探討大腸癌患者外周血CK20 mRNA的表達及其意義。 方法 用逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）方法檢測42例大腸癌患者術前、術后外周血及20例大腸癌患者新鮮癌組織標本中CK20 mRNA的表達，另以20例健康成年自愿者作對照。 結果 42例大腸癌患者外周血CK20 mRNA呈陽性表達者術前為19例（45.24%），術后為14例（33.33%）； 20例大腸癌患者新鮮癌組織中CK20 mRNA表達均為陽性。而正常對照組20例外周血CK20 mRNA表達均為陰性。且大腸癌外周血CK20 mRNA陽性表達與組織學類型無關（Pgt;0.05），但與有無淋巴結轉移、肝轉移及Dukes分期有關（P＜0.05）。 結論 檢測外周血中CK20 mRNA表達將有助于大腸癌的早期診斷、預后的判斷及治療方案的制定。
目的 探討希羅達（Xeloda）對人肝癌組織AFP mRNA表達的影響。方法 抽提所收集的希羅達治療組及對照組肝癌組織標本總RNA（共41例），采用逆轉錄巢式聚合酶鏈反應（RTnested PCR）技術檢測希羅達治療組及對照組AFP mRNA的表達情況。結果 以RT-nested PCR擴增的AFP基因片段為101 bp，與原設計一致。在希羅達治療組中，21例肝癌組織標本中有12例AFP mRNA呈陽性表達，陽性率為57.14%； 在對照組中，20例肝癌組織標本中有18例AFP mRNA呈陽性表達，陽性率為90.00%，兩者間差異有顯著性意義（P＜0.05）。術后4周,希羅達治療組血清AFP濃度為（23.2±12.8） μg/L，明顯低于對照組的（39.6±24.3） μg/L（P＜0.05），而兩者術前血清AFP濃度差異無顯著性意義。結論 希羅達能有效抑制人肝癌組織AFP mRNA的表達，并降低其表達產(chǎn)物血清AFP濃度。其在治療原發(fā)性肝癌的臨床應用價值值得進一步研究。
目的探討高強度聚焦超聲治療對肝癌細胞血道播散的影響。方法應用NestedRTPCR技術檢測19例患者高強度聚焦超聲治療前、后外周血AFP mRNA的表達，觀察其對肝癌細胞血道播散的影響。結果①高強度聚焦超聲治療前，19例肝癌患者外周血檢出AFP mRNA表達者11例（57.9%），良性疾病對照組均未檢出。治療前AFP mRNA表達陽性率與血清AFP水平、腫瘤直徑、門靜脈癌栓、遠處轉移等臨床參數(shù)明顯相關(P＜0.05)。②余8例治療前AFP mRNA表達陰性者，有2例于術后即刻轉為陽性，其中1例于72 h后又復轉為陰性； 19例患者于治療后1周時其AFP mRNA表達陽性率（31.6%）低于治療前，但差異無統(tǒng)計學意義（Pgt;0.05）。③治療后1周時，腫瘤直徑≤8 cm者AFP mRNA表達陽性率低于直徑gt;8 cm者(P＜0.05)。結論高強度聚焦超聲治療可能會降低肝癌的血道播散，特別是對于腫瘤直徑≤8 cm的肝癌患者，療效較好。
目的 研究CD15 mRNA表達與肝細胞癌（HCC）侵襲轉移和預后關系，以及與nm23H1 mRNA表達的相關性。方法 應用原位雜交和免疫組織化學方法，檢測分析HCC組織中CD15 mRNA及其蛋白和nm23H1 mRNA表達。結果 99例HCC中，CD15 mRNA及其蛋白和nm23H1 mRNA表達陽性率分別為38.4%、36.4%和76.8%。CD15 mRNA表達與蛋白表達一致，與nm23H1 mRNA表達呈負相關。CD15 mRNA及其蛋白和nm23H1 mRNA表達均與HCC侵襲轉移傾向和患者預后相關。結論 檢測CD15表達有可能成為HCC侵襲轉移和預后判斷的一項新的病理生物學指標。
目的 探討手術操作是否會導致肝癌細胞的血行播散。方法 選擇14例無遠處轉移并行肝癌切除術的肝癌患者，提取患者術前和術后外周血標本，于術中腫瘤切除后提取門靜脈和肝靜脈血標本。采用巢式RT-PCR方法檢測血中AFP-mRNA的表達，觀察手術前后血液中AFP-mRNA表達陽性率及表達水平的變化。 結果 術前外周血、手術切除腫瘤后門靜脈血和術后外周血中AFPmRNA表達陽性率分別為42.9%，42.9%和35.7%，術中切除腫瘤后肝靜脈血中的表達陽性率為57.1%，雖高于前三者，但無統(tǒng)計學差異，但AFP-mRNA表達水平明顯高于術前及術后外周血和術中門靜脈血（P＜0.05）。結論 手術中有包括肝癌細胞在內(nèi)的肝臟來源的細胞經(jīng)肝靜脈進入血循環(huán)。
目的 觀察支氣管哮喘患者外周血CD4 + CD25 + 調節(jié)性T 細胞( CD4 + CD25 + Treg) 、Foxp3 mRNA 的水平及吸入糖皮質激素對其的影響。方法 流式細胞儀檢測非急性發(fā)作期哮喘患者吸入激素前、后和健康志愿者( 正常對照組) 外周血單個核細胞( PBMCs) 中CD4 + CD25 + Treg 的比例, RT-PCR 檢測Foxp3 mRNA 表達變化, 肺功能儀檢測第1 秒用力呼氣容積占預計值百分比( FEV1%pred) 和呼氣峰流量( PEF) 。結果 哮喘組治療前CD4 + CD25 + Treg 水平及Foxp3 mRNA 的表達顯著低于正常對照組( P lt;0. 05) , 治療后CD4 +CD25 + Treg 水平及Foxp3 mRNA 的表達較治療前顯著升高( P lt; 0. 05) ; 哮喘組治療前FEV1% pred、PEF 顯著低于正常對照組( P lt; 0. 05) , 治療后FEV1% pred、PEF 較治療前顯著增加( P lt; 0. 05) 。結論 哮喘患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4 + CD25 + Treg 數(shù)量減少, 功能下降, 參與了哮喘的發(fā)病過程; 吸入激素可以上調哮喘患者外周血CD4 + CD25 + Treg 及Foxp3 mRNA 的水平, 改善哮喘患者的肺功能。
目的 評價肺癌患者外周血中Lunx mRNA表達用于診斷肺癌微轉移的特異性和敏感性，探討肺癌轉移的早期診斷方法。 方法 2004年3月～2005年2月，以Lunx mRNA為腫瘤標記物，采用逆轉錄-聚合酶鏈反應(reverse transcriptionpolymerase chain reaction，RT-PCR)技術，檢測60例Ⅰ～Ⅲ期行手術治療的肺癌患者（肺癌組）外周血Lunx mRNA的表達,并以行手術治療的20例肺良性病變患者（肺良性病變組）及10例健康人外周血（健康對照組）作為對照。結合病理類型、臨床分期、隨訪，評價Lunx mRNA作為肺癌微轉移腫瘤標記物的臨床意義。 結果 （1）肺癌組患者外周血中Lunx mRNA的陽性表達率為46.7％（28/60），Lunx mRNA在肺良性病變組（0/20）和健康對照組外周血中無表達（0/10）；（2） Lunx mRNA在肺癌I期患者中陽性表達率為8.3％（1/12），Ⅱ期患者中為333％(5/15)，Ⅲ期患者中為66.7％（22/33），Ⅰ期和Ⅱ期患者的Lunx mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義，Ⅲ期與Ⅰ期、Ⅱ期患者的Lunx mRNA表達差異有統(tǒng)計學意義(χ2=15.88， P=0.000)；（3） 在38例腺癌患者中17例Lunx mRNA表達為陽性，在14例鱗癌患者中7例表達為陽性，3例腺鱗癌患者中3例表達為陽性，3例小細胞肺癌患者中1例表達為陽性，1例大細胞肺癌和1例肉瘤樣癌患者表達為陰性。不同病理類型的肺癌患者的Lunx mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義；（4） 截至2005年3月的隨訪發(fā)現(xiàn)，Lunx mRNA 表達陽性的28例患者中有9例發(fā)生轉移，Lunx mRNA表達陰性的32例患者中僅1例發(fā)生轉移。 結論 在肺癌患者外周血微轉移的檢測中，Lunx mRNA表現(xiàn)出較高的敏感性和特異性，有可能成為診斷肺癌外周血微轉移較合適的分子標記物。
目的研究苯丙酸諾龍對燒傷大鼠肝細胞白蛋白影響的分子機制. 方法將健康成年Wistar大鼠32只(雌雄各半)隨機分成實驗組和對照組各16只,制成燙傷大鼠模型.采用隨機對照設計,應用苯丙酸諾龍治療大鼠20%體表面積深Ⅱ度燙傷,分別于傷后第4、7、14和21天處死大鼠,留取肝組織,RNA一步法提取肝細胞總RNA,逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)一步法擴增檢測白蛋白mRNA表達水平,免疫組織化學Envision法顯示檢測肝細胞雄激素受體表達水平. 結果實驗組肝細胞白蛋白mRNA和雄激素受體表達水平明顯增高,在各時間點均明顯高于同期對照組(P＜0.05),傷后第7和14天為快速增長時期(P＜0.05),白蛋白mRNA表達上調與雄激素受體表達上調有相關關系(r=0.936,P＜0.05). 結論苯丙酸諾龍能有效上調肝細胞白蛋白mRNA和雄激素受體的表達水平,促進蛋白質合成,有利于逆轉負氮平衡及創(chuàng)面愈合.