目的 研究利用海藻酸鈉水凝膠和SIS 復(fù)合作為支架材料,接種軟骨細(xì)胞構(gòu)建組織工程軟骨修復(fù)兔全層關(guān)節(jié)軟骨缺損的效果。 方法 采用機(jī)械法和去垢劑- 酶消化法制備SIS。取8 只2 ~ 3 周齡新西蘭白兔,肱骨頭和股骨髁負(fù)重面全層關(guān)節(jié)軟骨,體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞。將常規(guī)擴(kuò)增培養(yǎng)的第4 代軟骨細(xì)胞用海藻酸鈉稀釋,軟骨細(xì)胞濃度為(5 ~ 7)× 107 個/mL,均勻涂刷于SIS 表面,制備軟骨細(xì)胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體。取6 月齡清潔級新西蘭白兔40 只,體重3.0 ~ 3.5 kg,根據(jù)處理方法不同隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組(n=20),建立單側(cè)膝關(guān)節(jié)4 mm × 4 mm 全層軟骨缺損模型(左右不限)。實(shí)驗(yàn)組將復(fù)合體通過逐層疊加法置于缺損處,構(gòu)建組織工程軟骨,表面縫合覆蓋一層SIS 薄膜將缺損完全填充;對照組以單純海藻酸鈉水凝膠填充軟骨缺損、覆蓋SIS 薄膜縫合。術(shù)后觀察動物一般情況,于術(shù)后1、3、5、7、9 個月,各組分別處死動物,行大體和組織學(xué)觀察。 結(jié)果 由于麻醉死亡、切口感染和腹瀉死亡,8 只動物被排除實(shí)驗(yàn),兩組分別余16 只動物進(jìn)行取材觀察。術(shù)后1、3、5、7、9 個月,每組分別隨機(jī)處死3、3、3、3、4 只動物。大體觀察和組織學(xué)Masson染色結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組術(shù)后1 個月,植入體表面的SIS 與宿主軟骨組織融合,邊界消失;3 個月,植入體部分軟骨化,界面融合;5 個月,植入體演變?yōu)槔w維軟骨;7 個月植入體內(nèi)軟骨組織中纖維排列接近宿主軟骨;9 個月植入體內(nèi)軟骨纖維排列紊亂,細(xì)胞代謝增生活躍。對照組觀察9 個月內(nèi)缺損無明顯修復(fù)。組織學(xué)染色結(jié)果經(jīng)圖像量化分析顯示,實(shí)驗(yàn)組各時間點(diǎn)缺損內(nèi)修復(fù)組織單位面積染色強(qiáng)度均較對照組顯著升高(P lt; 0.05);術(shù)后3、5、7 個月,實(shí)驗(yàn)組軟骨化程度逐漸增大(P lt; 0.05),9 個月較7 個月有所降低(P lt; 0.05)。 結(jié)論 利用軟骨細(xì)胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體表層縫合SIS 薄膜術(shù)構(gòu)建的組織工程軟骨原位修復(fù)兔軟骨缺損,能促進(jìn)軟骨組織再生,符合關(guān)節(jié)軟骨的生理性修復(fù)過程。
【摘 要】 目的 探討以兔BMSCs 和豬SIS 復(fù)合構(gòu)建的組織工程骨膜,在異體兔體內(nèi)成骨的可行性。 方法 取新西蘭大白兔BMSCs 與SIS 復(fù)合構(gòu)建組織工程骨膜。選2 月齡新西蘭大白兔12 只,制備雙側(cè)橈骨1.5 ~ 2.0 cm 缺損模型。隨機(jī)選一側(cè)植入組織工程骨膜, 作為實(shí)驗(yàn)組;另一側(cè)僅植入單純SIS,作為對照組。術(shù)后觀察動物一般情況,4 周后攝X 線片觀察,取骨缺損中段標(biāo)本行HE 及Masson 染色觀察。 結(jié)果 兩組動物術(shù)后飲食及日?;顒踊菊#粋跓o紅腫、溢膿等;傷肢基本能負(fù)重行走。X 線片觀察:實(shí)驗(yàn)組骨缺損處有長條狀新生骨形成,密度與正常骨相同,新生骨橋接骨缺損;對照組骨缺損無骨形成征象,骨缺損處密度與周圍軟組織影相近。組織學(xué)觀察:實(shí)驗(yàn)組骨缺損處有新骨形成,骨組織中可見血管腔及不規(guī)則髓腔樣結(jié)構(gòu);未見明顯異物巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤征象;對照組骨缺損處僅為膠原瘢痕組織,無骨組織形成。 結(jié)論 以SIS 和BMSCs 構(gòu)建的組織工程骨膜在同種異體體內(nèi)可以成骨,有修復(fù)骨缺損的可行性。
【摘 要】 目的 探討體外快速培養(yǎng)犬食管黏膜上皮細(xì)胞(esophageal mucosa epithelial cells,EMECs)及其與SIS 體外復(fù)合培養(yǎng)的方法,為組織工程食管研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 取2 ~ 5 周齡幼犬5 只,無菌獲取其食管組織,采用混合酶消化法,分離培養(yǎng)EMECs,于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,取第2 代細(xì)胞培養(yǎng)1 ~ 5 d 繪制生長曲線并進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK-19)檢測。取第2 代EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4、8 d,行形態(tài)學(xué)、組織學(xué)及掃描電鏡觀察。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡下EMSCs 呈典型鋪路石樣。CK-19 免疫組織化學(xué)染色可見細(xì)胞胞漿呈陽性染色。MTT 法測定第2 代細(xì)胞在傳代培養(yǎng)2 d 生長達(dá)高峰。EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4 d,細(xì)胞呈多角形,細(xì)胞間連接緊密,呈鋪路石樣排列;SIS 表面形成1 ~ 2 層細(xì)胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu)。8 d 時,細(xì)胞密度增大,SIS 表面形成2 ~ 3層細(xì)胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu);掃描電鏡見細(xì)胞在材料上已大量增長,呈層狀排列。 結(jié)論 采用混合酶消化法,用含6%FBS 的DKSFM 培養(yǎng)犬EMECs,方法簡便,適合推廣應(yīng)用。SIS 與EMECs 有良好的相容性,可作為構(gòu)建組織工程食管的理想支架材料。
目的了解四川省市級城市基層公共衛(wèi)生服務(wù)中心社區(qū)居民感受度,為進(jìn)一步加強(qiáng)薄弱地區(qū)措施提供參考。方法采用分層系統(tǒng)抽樣法,借助四川省基本公共衛(wèi)生服務(wù)監(jiān)管平臺,在 21 個市級的五類重點(diǎn)人群檔案中分別等距抽取 40 份,即每個市級抽取 200 人作為調(diào)查對象。采用電話調(diào)查方法,調(diào)查居民知曉率、滿意度、依從性,應(yīng)用 TOPSIS 法綜合評價四川省市級城市基層公共衛(wèi)生服務(wù)中社區(qū)居民感受度,并通過聚類分檔進(jìn)行評價。結(jié)果共調(diào)查接受過基層醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)健康管理的社區(qū)居民 4 200 人。四川省基層公共衛(wèi)生服務(wù)社區(qū)居民服務(wù)知曉率為 76.31%,健康知識知曉率為 69.45%,服務(wù)便利性的滿意率為 69.42%,技術(shù)水平的滿意率為 67.96%,服務(wù)態(tài)度的滿意率為 69.74%,服務(wù)對改善健康的滿意率為 69.13%,繼續(xù)接受服務(wù)的意愿率為 68.17%,健康生活方式建議依從率為 68.31%,服藥依從率為 85.14%。21 個市級的 Cj 值平均為 0.523 6,序號 4 的市級 Cj 值最高為 0.751 9,序號 10 的市級 Cj 值最低為 0.276 3。對評價結(jié)果進(jìn)行聚類分檔結(jié)果顯示,不同檔次間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論四川省 21 個市級基層公共衛(wèi)生服務(wù)中心社區(qū)居民感受度各不相同。應(yīng)加強(qiáng)對薄弱地區(qū)的措施,縮小各市級城市間的差距,切實(shí)提高社區(qū)居民的感受度。
藥品臨床綜合評價是促進(jìn)藥品回歸臨床價值的基礎(chǔ)性工作,已成為近年來臨床藥學(xué)研究工作重點(diǎn)之一?,F(xiàn)有研究重點(diǎn)關(guān)注臨床綜合評價指標(biāo)體系構(gòu)建及量化指標(biāo)價值,對指標(biāo)評分后的價值整合方法研究較少,決策方法過于單一,可能出現(xiàn)將次優(yōu)方案評選為最優(yōu)方案的情形。因此,本研究從背景、原理、適用情形等方面對多種綜合價值整合方法進(jìn)行歸納、總結(jié),以期為我國臨床綜合評價提供方法學(xué)參考。