• 1 四川大學華西醫(yī)院 生物治療國家重點實驗室? 干細胞與組織工程研究室(成都,610041);;
  • 2 洛陽正骨研究院骨關(guān)節(jié)病研究室;;
  • 3 上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院四肢顯微外科研究所;

目的 研究利用海藻酸鈉水凝膠和SIS 復(fù)合作為支架材料,接種軟骨細胞構(gòu)建組織工程軟骨修復(fù)兔全層關(guān)節(jié)軟骨缺損的效果。 方法 采用機械法和去垢劑- 酶消化法制備SIS。取8 只2 ~ 3 周齡新西蘭白兔,肱骨頭和股骨髁負重面全層關(guān)節(jié)軟骨,體外培養(yǎng)軟骨細胞。將常規(guī)擴增培養(yǎng)的第4 代軟骨細胞用海藻酸鈉稀釋,軟骨細胞濃度為(5 ~ 7)× 107 個/mL,均勻涂刷于SIS 表面,制備軟骨細胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體。取6 月齡清潔級新西蘭白兔40 只,體重3.0 ~ 3.5 kg,根據(jù)處理方法不同隨機分為實驗組和對照組(n=20),建立單側(cè)膝關(guān)節(jié)4 mm × 4 mm 全層軟骨缺損模型(左右不限)。實驗組將復(fù)合體通過逐層疊加法置于缺損處,構(gòu)建組織工程軟骨,表面縫合覆蓋一層SIS 薄膜將缺損完全填充;對照組以單純海藻酸鈉水凝膠填充軟骨缺損、覆蓋SIS 薄膜縫合。術(shù)后觀察動物一般情況,于術(shù)后1、3、5、7、9 個月,各組分別處死動物,行大體和組織學觀察。 結(jié)果 由于麻醉死亡、切口感染和腹瀉死亡,8 只動物被排除實驗,兩組分別余16 只動物進行取材觀察。術(shù)后1、3、5、7、9 個月,每組分別隨機處死3、3、3、3、4 只動物。大體觀察和組織學Masson染色結(jié)果顯示:實驗組術(shù)后1 個月,植入體表面的SIS 與宿主軟骨組織融合,邊界消失;3 個月,植入體部分軟骨化,界面融合;5 個月,植入體演變?yōu)槔w維軟骨;7 個月植入體內(nèi)軟骨組織中纖維排列接近宿主軟骨;9 個月植入體內(nèi)軟骨纖維排列紊亂,細胞代謝增生活躍。對照組觀察9 個月內(nèi)缺損無明顯修復(fù)。組織學染色結(jié)果經(jīng)圖像量化分析顯示,實驗組各時間點缺損內(nèi)修復(fù)組織單位面積染色強度均較對照組顯著升高(P  lt; 0.05);術(shù)后3、5、7 個月,實驗組軟骨化程度逐漸增大(P  lt; 0.05),9 個月較7 個月有所降低(P  lt; 0.05)。 結(jié)論 利用軟骨細胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體表層縫合SIS 薄膜術(shù)構(gòu)建的組織工程軟骨原位修復(fù)兔軟骨缺損,能促進軟骨組織再生,符合關(guān)節(jié)軟骨的生理性修復(fù)過程。

引用本文: 莫湘濤,鄧力,李秀群,解慧琪,羅靜聰,郭尚春,楊志明. 軟骨細胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體修復(fù)全層關(guān)節(jié)軟骨缺損的實驗研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(8): 974-979. doi: 復(fù)制