【摘 要】 目的 探討體外快速培養(yǎng)犬食管黏膜上皮細胞（esophageal mucosa epithelial cells，EMECs）及其與
SIS 體外復(fù)合培養(yǎng)的方法，為組織工程食管研究提供實驗依據(jù)。 方法 取2 ～ 5 周齡幼犬5 只，無菌獲取其食管組織，采
用混合酶消化法，分離培養(yǎng)EMECs，于倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長情況，取第2 代細胞培養(yǎng)1 ～ 5 d 繪制生長曲線并
進行細胞表面標志物細胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK-19）檢測。取第2 代EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4、8 d，行形態(tài)學(xué)、
組織學(xué)及掃描電鏡觀察。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡下EMSCs 呈典型鋪路石樣。CK-19 免疫組織化學(xué)染色可見細胞胞漿
呈陽性染色。MTT 法測定第2 代細胞在傳代培養(yǎng)2 d 生長達高峰。EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4 d，細胞呈多角形，細胞間
連接緊密，呈鋪路石樣排列；SIS 表面形成1 ～ 2 層細胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu)。8 d 時，細胞密度增大，SIS 表面形成2 ～ 3層細胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu)；掃描電鏡見細胞在材料上已大量增長，呈層狀排列。 結(jié)論 采用混合酶消化法，用含6%
FBS 的DKSFM 培養(yǎng)犬EMECs，方法簡便，適合推廣應(yīng)用。SIS 與EMECs 有良好的相容性，可作為構(gòu)建組織工程食管的
理想支架材料。
引用本文： 譚波,魏人前,楊志明,李秀群,韓平,智偉,解慧琪. 食管黏膜上皮細胞與SIS 復(fù)合培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(6): 742-746. doi: 復(fù)制
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