目的探討蠶蛹漿（silkworm larvae plasma，SLP）比色法在關節(jié)假體周圍感染（periprosthetic joint infection，PJI）精準診斷中的應用價值。方法 取90只健康雄性新西蘭大白兔，采用Swanson假體行膝關節(jié)置換手術；然后根據(jù)致病菌不同隨機分為3組：A組（金黃色葡萄球菌組）、B組（表皮葡萄球菌組）及C組（大腸埃希菌組），每組30只。術后第3天膝關節(jié)腔內注射1 mL不同濃度致病菌制備PJI模型。分別于接種菌液前及接種后7、14、21 d取樣進行檢測，參照2018年PJI費城國際共識診斷標準首先判定并計算3組實驗動物的造模成功率，并采用SLP比色法計算其在PJI精準診斷中的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值和診斷效率。 結果接種菌液21 d時，A、B、C組分別有26、18、23只實驗動物診斷為感染，造模成功率分別為86.7%、60.0%、76.7%，3組間比較差異無統(tǒng)計學意義（χ2=5.724，P=0.073）。PJI比色法結果顯示，A組在7 d時出現(xiàn)1只假陽性動物（特異性75.0%），隨時間推移（14、21 d）SLP的特異性升至100.0%；14、21 d，另出現(xiàn)了1只假陰性動物（敏感性由100.0%降至96.2%）。B組在7 d時出現(xiàn)1只假陽性動物（特異性91.7%），隨著時間推移特異性回升至100.0%；在14、21 d時分別出現(xiàn)1只和4只假陰性動物（敏感性分別為94.4%及83.3%）。C組在7 d時有2只假陽性動物（特異性71.4%），隨后回升至100.0%。A、C組在21 d時診斷效率極高（96.7%和100.0%）；即使面對B組低毒力的表皮葡萄球菌，21 d時SLP的診斷效率也可保持在90.0%；總體診斷效率很好（95.6%）。結論SLP比色法診斷PJI具有較高的敏感性、特異性以及診斷效率，是一種極具潛能的PJI診斷方法。
目的 針對老年髖部骨折主要骨折類型（股骨頸骨折及粗隆骨折），總結手術方法及內固定物選擇標準以及臨床應用現(xiàn)狀。 方法 廣泛查閱國內外有關老年股骨頸骨折以及粗隆骨折治療的文獻，并進行總結分析。 結果 對于老年股骨頸骨折患者，若無特殊手術禁忌證，65 歲以下患者建議行閉合復位內固定術或動力髖螺釘（dynamic hip screw，DHS），65～80 歲患者選擇全髖關節(jié)置換術；身體情況相對較差的高齡患者可選擇半髖關節(jié)置換術。對于老年股骨粗隆骨折患者，穩(wěn)定型骨折可選用 DHS 或第 3 代 Gamma 釘；不穩(wěn)定型股骨粗隆骨折，可根據(jù)骨折類型、骨質情況等選用股骨近端防旋髓內釘、股骨粗隆順行髓內釘?shù)人鑳裙潭ㄏ到y(tǒng)以及股骨近端鎖定加壓鋼板、微創(chuàng)內固定系統(tǒng)等髓外固定系統(tǒng)；高齡粉碎性股骨粗隆骨折建議行髖關節(jié)置換。 結論 老年髖部骨折治療應結合骨折類型及患者自身情況選擇恰當?shù)氖中g方案及內固定物，以提高手術療效，減少并發(fā)癥的發(fā)生。
目的 分析反復凍融處理對同種異體人肌腱生物力學的影響，為同種異體移植物的處理與保存提供理論依據(jù)。 方法 從3 具自愿捐贈新鮮尸體上取30 根肌腱（指淺屈肌腱24 根、拇長屈肌腱6 根），隨機分為6 組，即新鮮組、凍融1 次組、凍融2 次組、凍融3 次組、凍融5 次組和凍融10 次組，每組指淺屈肌腱4 根，拇長屈肌腱1 根。檢測各組肌腱結構特性、力學性質及黏彈性變化等生物力學性質并進行比較。 結果 與新鮮組相比，拉斷試驗中凍融5 次組及凍融10 次組最大負荷、最大應力均明顯減小，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05），但最大拉伸及最大應變差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。應力松弛試驗中，凍融5 次組及凍融10 次組應力松弛下降速度較快，與新鮮組相比差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。蠕變試驗出現(xiàn)相似結果，凍融5 次組及凍融10 次組在100 N 拉力作用下更早松弛，產(chǎn)生的蠕變較大，與新鮮組相比差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。凍融1 次、2 次、3 次組各指標與新鮮組比較差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。 結論 對同種異體移植物經(jīng)深低溫凍存后，凍存- 復蘇周期不宜超過3 個，多周期反復凍融將削弱同種異體肌腱的生物力學性質，使其更容易疲勞、斷裂。
目的 通過體外培養(yǎng)兔肌腱的腱鞘、腱外膜和腱內膜細胞，觀察6- 磷酸果糖對3 種細胞TGF-β 及其受體、TGF-β1 及TGF-β1 mRNA表達的影響，探討6- 磷酸果糖在肌腱愈合粘連防治中的作用機制提供實驗依據(jù)。 方 法 成年新西蘭大白兔8 只，雌雄不限，體重4.0 ～ 4.5 kg。取兔前肢趾深屈肌腱分離培養(yǎng)腱鞘、腱外膜和腱內膜細胞。將每種細胞隨機分為2 組，實驗組加入6- 磷酸果糖培養(yǎng)，對照組不加入6- 磷酸果糖。分別于培養(yǎng)3 d 及24 h 后采用酶聯(lián)免疫吸附實驗定量檢測TGF-β 及其受體的表達，原位雜交檢測TGF-β1 mRNA 的表達；免疫組織化學染色觀測TGF-β1 的表達。 結 果 酶聯(lián)免疫吸附實驗顯示實驗組各細胞TGF-β 及其受體的表達均較對照組下降，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。TGF-β1 表達平均降低程度從大到小依次為腱鞘細胞（36.1%）、腱內膜細胞（31.2%）、腱外膜細胞（31.0%），TGF-β2依次為腱鞘細胞（37.9%）、腱外膜細胞（32.1%）、腱內膜細胞（27.0%），TGF-β3 依次為腱內膜細胞（42.5%）、腱鞘細胞（41.2%）及腱外膜細胞（33.3%）。TGF-β 受體1、2 表達平均降低程度從大到小依次為腱外膜細胞（29.9%、26.2%），腱內膜細胞（27.8%、23.5%），腱鞘細胞（23.1%、20.0%）；TGF-β 受體3 依次為腱內膜細胞（26.1%）、腱外膜細胞（19.2%）、腱鞘細胞（15.8%）。實驗組各細胞TGF-β1 mRNA 陽性表達率及細胞內TGF-β1 mRNA 表達強度均較對照組明顯降低，比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。免疫組織化學染色觀察顯示實驗組各細胞TGF-β1 表達均較對照組明顯降低。 結論 6- 磷酸果糖能顯著降低肌腱細胞的TGF-β 及其受體、TGF-β1 及TGF-β1 mRNA 的表達，為肌腱愈合過程中調節(jié)TGF-β 水平提供了一種新途徑。
目的 前瞻性對比研究自體髕腱與經(jīng)γ 射線照射的同種異體髕腱重建前交叉韌帶（anterior cruciate ligament，ACL）的穩(wěn)定性及臨床療效。 方法 2004 年1 月－ 2007 年10 月，收治69 例ACL 腱部斷裂患者。根據(jù)采用 移植物不同將患者隨機分為兩組：自體髕腱組（A 組）36 例，γ 射線照射的同種異體髕腱組（B 組）33 例。A 組：男30 例，女6 例；平均年齡30.1 歲。運動傷28 例，交通傷5 例，其他傷3 例。受傷至手術時間平均1.4 個月。單純ACL 腱部斷裂30 例，合并內側副韌帶損傷6 例。B 組：男26 例，女7 例；平均年齡32.5 歲。運動傷27 例，交通傷4 例，其他傷2 例。受傷至手術時間平均1.5 個月。單純ACL 腱部斷裂27 例，合并內側副韌帶損傷6 例。兩組一般資料比較差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05），具有可比性。兩組均由同一組醫(yī)師采用標準關節(jié)鏡技術完成ACL 重建。通過術后一般情況、軸移試驗、Lachman 試驗、Daniel 單腿水平跳躍試驗、國際膝關節(jié)文獻委員會（IKDC）評分、Lysholm 與Tegner 運動水平評分及KT-2000 關節(jié)測量儀檢測比較臨床療效。 結果 術后患者均獲隨訪，A 組平均隨訪時間39.5 個月，B 組37.6 個月。A組發(fā)生術中髕骨骨折1 例、術后髕前痛2 例；B 組無并發(fā)癥發(fā)生。A、B 組住院時間分別為（15.6 ± 2.4）d 及（15.5 ± 1.5） d，差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）；A 組手術時間為（89.5 ± 10.5）min，較B 組（59.5 ± 8.5）min 延長，但術后發(fā)熱時間（4.7 ± 1.6） d 較B 組（9.5 ± 2.5）d 縮短，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。末次隨訪時A、B 組間Lachman 試驗及軸移試驗比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；組內手術前后比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。A、B 組間Daniel 單腿水平跳躍試驗、IKDC 評分、Lysholm 評分及Tegner 評分的差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05），但B 組功能與運動水平評分有下降趨勢；組內手術前后比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。末次隨訪時KT-2000 關節(jié)測量儀檢測A、B 組健患側差異分別為（2.4 ± 0.6）mm 及（5.5 ± 3.6） mm，比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；兩組手術前后脛骨前移比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結 論 經(jīng)γ 射線照射制備的同種異體髕腱重建ACL 與自體髕腱相比，膝關節(jié)功能及運動水平無明顯差異，但膝關節(jié)前后及旋轉穩(wěn)定性顯著降 低。
目的 研究PRP 對兔BMSCs 在體外向SC 分化中的作用，并對分化細胞的分泌功能進行檢測。 方法 取2 月齡新西蘭大白兔骨髓5 mL，應用密度梯度離心和貼壁篩選方法分離培養(yǎng)BMSCs。取兔股靜脈血5 mL，采用改良Appel 法制備PRP。取第3 代BMSCs 分為3 組，聯(lián)合誘導組：采用β- 巰基乙醇和維甲酸序貫誘導后用含PRP 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)；單純誘導組：行β- 巰基乙醇和維甲酸序貫誘導后，采用不含PRP 的L-DMEM 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)；對照組：不行誘導，僅采用L-DMEM 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。倒置顯微鏡下觀察各組細胞生長情況，于培養(yǎng)4、7、9、11 d 采用免疫熒光染色法對細胞進行鑒定，ELISA 法檢測NGF 含量，并于培養(yǎng)11 d 行RT-PCR 檢測NGF mRNA 表達。 結果 聯(lián)合誘導組和單純誘導組培養(yǎng)4 d，大部分細胞不具備BMSCs 典型細胞形態(tài)結構；9 d 聯(lián)合誘導組細胞均不具備BMSCs 典型細胞形態(tài)，呈類似SC 形態(tài)和外觀；對照組細胞形態(tài)一直無明顯改變。聯(lián)合誘導組和單純誘導組誘導培養(yǎng)后，各時間點均有S-100 蛋白表達；隨時間延長，兩組陽性表達率逐漸提高；培養(yǎng)7、9、11 d，聯(lián)合誘導組與單純誘導組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；對照組表達呈陰性。培養(yǎng)后4、7、9、11 d，NGF 含量聯(lián)合誘導組和單純誘導組與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）；培養(yǎng)4 d 聯(lián)合誘導組與單純誘導組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）；培養(yǎng)7、9 和11 d，聯(lián)合誘導組與單純誘導組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。培養(yǎng)11 d，NGF mRNA 表達相對強度聯(lián)合誘導組較單純誘導組高，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結論 兔BMSCs 在體外一定條件下能誘導分化為可分泌NGF 的SC；誘導培養(yǎng)時聯(lián)合PRP 能明顯提高BMSCs 向SC 誘導的效率。
目的 探討血小板裂解液（platelet lysate，PL）在體外定向誘導人臍帶間充質干細胞（human umbilical cord derived mesenchymal stem cells，hUCMSCs）分化成軟骨細胞中的作用。 方法 取健康產(chǎn)婦自愿捐贈臍帶，采用膠原酶消化法分離hUCMSCs，體外培養(yǎng)擴增，流式細胞儀進行細胞表型鑒定。根據(jù)加入誘導培養(yǎng)基成分不同將實驗分為以下3 組：A 組為H-DMEM 培養(yǎng)基、10%FBS 及10%PL，B 組為H-DMEM 培養(yǎng)基、10%FBS、10 ng/mL TGF-β1、1 ×10-7 mol/L 地塞米松、50 μg/mL 維生素C 及1% 胰島素鐵硒傳遞蛋白（insulin-transferrin-selenium，ITS），C 組為 H-DMEM培養(yǎng)基、10%FBS、10 ng/mL TGF-β1、1 × 10-7 mol/L 地塞米松、50 μg/mL 維生素C、1%ITS 及10%PL。誘導培養(yǎng)2 周，甲苯胺藍染色檢測各組軟骨細胞基質的分泌，免疫熒光檢測軟骨特異性Ⅱ型膠原表達，半定量RT-PCR 檢測蛋白聚糖（Aggrecan）和Ⅱ型膠原表達。 結果 分離得到的hUCMSCs 不表達造血細胞的表面標記CD45、CD34 和HLA-DR，而表達黏附分子和MSCs 表面標記CD44、CD105 和CD146。甲苯胺藍染色和Ⅱ型膠原免疫熒光染色示C 組呈陽性，B 組呈弱陽性，而A 組均呈陰性。半定量RT-PCR 檢測示Aggrecan 和Ⅱ型膠原在B、C 組中均有表達，A 組中未見表達；C 組Aggrecan mRNA 和Ⅱ型膠原mRNA 表達明顯高于B 組，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結論 單純10%PL 不能誘導hUCMSCs 成軟骨分化，但它可當作成軟骨誘導培養(yǎng)基的輔助添加劑，對hUCMSCs 成軟骨分化有明顯促進作用，為構建組織工程軟骨提供了新的可利用條件。
目的 構建可誘導表達hBMP-2 的慢病毒載體，并研究hBMP-2 在人臍血間充質干細胞（human umbilical cord blood mesenchymal stem cells，HUMSCs）中的可誘導性表達。 方法 以pcDNA-hBMP-2 為模板，通過PCR 反應獲取hBMP-2，運用GATEWAY 技術構建pLV/EXPN2-Neo-TRE-hBMP-2、pLV/EXPN2-Puro-EF1A- 反向反式激活因子（reverse transactivator，rtTA），通過PCR 鑒定重組慢病毒載體構建。將重組慢病毒與輔助質粒共同轉染293FT 細胞，包裝成能表達hBMP-2 的可控性慢病毒，并測定病毒滴度。用病毒轉染HUMSCs，使用強力霉素進行誘導，分別在相同誘導時間（48 h）不同誘導濃度（0、10、100 ng/mL，1、10、100 μg/mL）及不同誘導時間（12、24、48、72 h）相同誘導濃度（10 μg/mL）兩種情況下用ELISA 法測定hBMP-2 的表達情況。對轉染前后的HUMSCs 進行成骨誘導，用茜素紅染色法觀察礦化物結節(jié)形成情況。 結果 成功構建了攜帶hBMP-2 的可控性慢病毒載體pLV/EXPN2-Neo-TRE-hBMP-2、pLV/EXPN2-Puro-EF1A-rtTA，并獲得相應的病毒，病毒滴度分別為3.5 × 108 TU/mL 和9.5 × 107 TU/mL；病毒轉染HUMSCs 后，HUMSCs 可通過強力霉素的誘導可控性表達hBMP-2。在相同誘導時間情況下，強力霉素10 μg/mL 時誘導表達最強；而在相同誘導濃度下，hBMP-2 的表達在誘導48 h 達峰值。HUMSCs 成骨誘導培養(yǎng)2 周后，茜素紅染色示胞漿中有大量紅色的鈣化基質沉積。 結論 通過GATEWAY 技術可以建立攜帶hBMP-2 目的基因的可控性慢病毒載體，為進一步研究hBMP-2 誘導HUMSCs 成骨分化治療骨壞死模型奠定實驗基礎，并提供了一種新的實驗思路。
目的探討一期膝關節(jié)單髁置換術（unicompartmental knee arthroplasty，UKA）聯(lián)合前交叉韌帶（anterior cruciate ligament，ACL）重建治療膝關節(jié)骨關節(jié)炎（osteoarthritis，OA）合并ACL損傷的早中期療效。 方法2006年1月－2014年1月，收治32例膝關節(jié)OA伴ACL損傷患者，均一期行UKA聯(lián)合ACL重建術。其中男12例，女20例；年齡41～63歲，平均50歲。左膝17例，右膝15例。ACL損傷原因為運動傷（25例）及交通事故傷（7例）；其中陳舊性損傷27例，急性損傷5例。患者主要臨床癥狀均為膝關節(jié)內側室疼痛，伴膝關節(jié)運動不穩(wěn)。術前X線片測量示膝關節(jié)內翻角為（3.1±0.6）°。 結果術后患者切口均Ⅰ期愈合，無手術相關并發(fā)癥發(fā)生?；颊呔@隨訪，隨訪時間16～112個月，平均55個月。2例發(fā)生活動半月板脫位，均更換較厚半月板墊片后獲較好療效。X線片復查示，經(jīng)手術矯正患肢膝關節(jié)外翻角為（4.0±0.7）°。隨訪期間均未出現(xiàn)假體松動跡象，但10例存在脛骨側假體生理性透亮線（＜1 mm）。末次隨訪時，患者牛津膝關節(jié)評分（OKS）、膝關節(jié)學會評分系統(tǒng)（KSS）臨床及功能評分以及Tegner運動評分與術前比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。末次隨訪時患肢脛骨假體后傾角為（3.9±1.2）°，與末次隨訪時膝關節(jié)活動度（123.5±2.8）°成正相關（r=0.392，P=0.031）。 結論對于原發(fā)性ACL損傷伴繼發(fā)性膝關節(jié)內側室OA或膝關節(jié)內側室OA伴急性ACL損傷，選擇一期UKA聯(lián)合ACL重建術可獲得較好早中期療效。
目的 比較 SuperPATH 入路與傳統(tǒng) Hardinge 入路行人工全髖關節(jié)置換術（total hip arthroplasty，THA）的早期臨床療效。 方法 將 2015 年 5 月—2016 年 3 月收治的 154 例（173 髖）符合選擇標準的擬行初次 THA 患者納入研究，隨機分為兩組：其中 64 例（70 髖）采用 SuperPATH 入路行 THA（A 組），90 例（103 髖）采用 Hardinge 入路行 THA（B 組）。兩組患者性別、年齡、體質量指數(shù)、疾病類型、術前 Harris 髖關節(jié)評分（Harris hip score，HHS）等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。觀察并記錄兩組患者切口長度、手術時間、住院時間、術中失血量、術后引流量、術后下地時間、輸血率及并發(fā)癥等，比較兩組術前及術后 1、3 d，1、3、6、12、24 周的 HHS 評分、疼痛視覺模擬評分（VAS）；通過X線片測量相關參數(shù)對兩組患者術后假體位置進行影像學評價。另外，對應用 SuperPATH 技術以來的 92 例（100 髖）THA 進行群組分層分析。 結果 A 組手術切口長度、術后下地時間及住院時間均低于 B 組，手術時間、術中失血量、輸血率均高于 B 組（P<0.05）；兩組術后引流量比較差異無統(tǒng)計學意義（t=1.901，P=0.071）。兩組患者均獲隨訪，隨訪時間 6～15 個月，平均 9 個月。A 組術后 1 d、3 d 及 1 周 VAS 評分顯著低于 B 組（P<0.05）；A 組術后 1 d、3 d、1 周及 3 周 HHS 評分顯著高于 B 組（P<0.05）。術后 24 周兩組外展角及外展角位于“安全區(qū)”的比例比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；A 組前傾角及雙下肢長度差異大于 B 組，前傾角位于“安全區(qū)”的比例、偏心距及恢復率小于 B 組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。在 SuperPATH 群組的分層分析中，前 30 髖手術時間、切口長度、術中出血量、輸血率及術后 1 d VAS 評分均高于后 70 髖（P<0.05）。前 30 髖發(fā)生術中大粗隆骨折 1 例，術后發(fā)生髖關節(jié)脫位 2 例；后 70 髖均未發(fā)生術中及術后相關并發(fā)癥。兩組均無神經(jīng)血管損傷，假體松動、感染，深靜脈血栓形成等并發(fā)癥發(fā)生。 結論 SuperPATH 入路相對于 Hardinge 入路創(chuàng)傷小、術后早期疼痛輕、功能恢復較快、早期臨床療效滿意，符合現(xiàn)代快速康復外科的要求；但其手術時間長，術中失血量大，前傾角偏大，偏心距偏小，且存在一定學習曲線，其中遠期療效尚需進一步隨訪研究。