目的 探討Livin 在非小細(xì)胞肺癌( NSCLC) 中的表達(dá), 及與NSCLC 病理、生物學(xué)行為指標(biāo)和預(yù)后的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)法檢測87 例NSCLC 腫瘤組織和40 例肺良性組織中 Livin、Caspase-3 和Bcl-2 蛋白的表達(dá)情況, 將其表達(dá)與NSCLC 病理、生物學(xué)行為等指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)分析。多因素COX 回歸生存分析探討Livin、Caspase-3 和Bcl-2 蛋白表達(dá)水平與預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果 Livin 和Bcl-2 蛋白在肺癌組織中的表達(dá)明顯高于在肺良性病變組織中的表達(dá)( 72. 41% 比0. 0% ,74. 71% 比0. 0%, P = 0. 000) , Caspase-3 蛋白表達(dá)則明顯降低( 67. 82% 比87. 5% , P lt; 0. 05) 。Livin、Caspase-3 和Bcl-2 表達(dá)主要位于胞漿, 未見核內(nèi)表達(dá)。其表達(dá)與肺癌的組織細(xì)胞類型、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、腫瘤大小以及部位無明顯相關(guān)性。在NSCLC 中, Livin 蛋白表達(dá)與Caspase-3 和Bcl-2 蛋白表達(dá)有相關(guān)性( r1 = - 0. 260, P = 0. 015; r2 =0. 351, P =0. 001) 。Livin、Caspase-3 和Bcl-2 不是影響肺癌手術(shù)患者預(yù)后的獨立預(yù)后因素。結(jié)論 Livin 蛋白、Bcl-2 蛋白在肺癌組織中表達(dá)上調(diào),Livin 的表達(dá)與Caspase-3、Bcl-2 蛋白的表達(dá)呈相關(guān)性, 三者在肺癌的發(fā)生發(fā)展中可能起協(xié)同作用。Livin、Bcl-2 和Caspase-3 蛋白表達(dá)與患者的預(yù)后無明顯關(guān)系。
目的 探討凋亡抑制基因Livin在食管癌組織中的表達(dá)及其與P53和Bcl-2表達(dá)的關(guān)系。 方法 采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)結(jié)合銀染技術(shù)檢測36例食管癌組織和18例癌旁正常組織中Livin mRNA的表達(dá)，采用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶（S-P）法檢測食管癌組織中Livin、P53和Bcl-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果 RT-PCR檢測結(jié)果顯示:Livin mRNA在食管癌組織中的陽性表達(dá)較癌旁正常組織明顯增強(qiáng),兩種異構(gòu)體基本同時表達(dá)。免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果顯示:Livin 蛋白在食管癌組織中的陽性表達(dá)率明顯高于癌旁正常組織(Plt;0.01)。癌組織侵及食管外膜的Livin陽性表達(dá)率高于癌組織侵及食管肌層者(Plt;0.05);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的Livin陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(Plt;0.05) 。Livin蛋白表達(dá)與P53蛋白表達(dá)無關(guān)（χ2=1.00,P=0.505）,與Bcl-2蛋白表達(dá)有關(guān)（χ2=10.60，P=0.003）。 結(jié)論 Livin在食管癌組織中異常表達(dá)，有望成為食管癌診斷和基因治療的新靶點。凋亡相關(guān)基因Bcl-2與Livin基因的異常表達(dá)可能在食管癌癌變中起協(xié)調(diào)作用。
目的探討大鼠脊髓缺血再灌注損傷（spinal cord ischemia/reperfusion injury，SCII）后脊髓細(xì)胞熱休克蛋白27（heat shock protein 27，HSP27）與凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2蛋白的表達(dá)及其相互關(guān)系。 方法成年雄性SD大鼠70只，體重200～220 g，隨機(jī)分為假手術(shù)組和SCII組，每組35只。假手術(shù)組僅顯露左腎動脈，不夾閉腹主動脈；SCII組夾閉大鼠腹主動脈20 min，于缺血后4、8、12 h及1、2、3、5 d分別取5只大鼠進(jìn)行再灌注處理。各時間點再灌注后處死大鼠取脊髓組織，采用免疫組織化學(xué)染色檢測HSP27、Bax、Bcl-2蛋白的相對表達(dá)量。 結(jié)果SCII組HSP27于4 h時開始表達(dá)，3 d達(dá)高峰，5 d表達(dá)減少；在3 d及5 d時相對表達(dá)量與其他各時間點比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。Bcl-2于4 h開始表達(dá)，1 d達(dá)高峰，2 d時仍維持高表達(dá)狀態(tài)，之后逐漸減少；1、2 d時相對表達(dá)量與其他各時間點比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。Bax的表達(dá)分別在12 h和3 d達(dá)高峰，5 d表達(dá)減少；12 h、3 d時相對表達(dá)量與其他各時間點比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。假手術(shù)組各時間點各蛋白僅少量表達(dá)，SCII組HSP27、Bax、Bcl-2蛋白的相對表達(dá)量均明顯高于假手術(shù)組（P lt; 0.05）。 結(jié)論SCII后脊髓神經(jīng)可能存在自行修復(fù)時間窗，HSP27對SCII組織產(chǎn)生保護(hù)效應(yīng)的可能機(jī)制是促進(jìn)脊髓組織抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)，減少促凋亡蛋白Bax表達(dá)，以抑制脊髓組織細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮其保護(hù)作用。
【摘 要】 目的 通過營養(yǎng)剝奪模擬體內(nèi)髓核細(xì)胞退變微環(huán)境，檢測Bcl-2/ 腺病毒干擾蛋白3（Bcl-2/adenovirusE1B 19-kDa-interacting protein 3，BNIP3）表達(dá)及線粒體轉(zhuǎn)位情況，為進(jìn)一步探索髓核細(xì)胞退變死亡機(jī)制提供實驗依據(jù)。 方法 成年清潔級SD 大鼠2 只，雌雄不限，體重150 ～ 200 g。體外分離獲取鼠尾椎間盤髓核細(xì)胞，將傳代后細(xì)胞分別置入正常環(huán)境（對照組：L-DMEM 培養(yǎng)基、10%FBS、21%O2）和營養(yǎng)剝奪環(huán)境（實驗組：DMEM 無糖無血清培養(yǎng)基、 1% O2）培養(yǎng)24、48、72 h 后，實時熒光定量PCR、細(xì)胞免疫熒光染色及Western blot 檢測BNIP3 基因及蛋白表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測凋亡率及線粒體膜電位。 結(jié)果 實時熒光定量PCR、細(xì)胞免疫熒光染色及Western blot 檢測顯示對照組細(xì)胞低表達(dá)BNIP3；實驗組隨培養(yǎng)時間延長，BNIP3 表達(dá)呈上升趨勢，且BNIP3 與線粒體相結(jié)合；除培養(yǎng)后24 h 實驗組BNIP3 基因表達(dá)與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）外，其余各時間點實驗組BNIP3 基因及蛋白表達(dá)與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。流式細(xì)胞儀檢測顯示，對照組細(xì)胞凋亡率較低，且細(xì)胞保持較高的線粒體膜電位；而實驗組隨培養(yǎng)時間延長細(xì)胞凋亡率增加、線粒體膜電位降低，與對照組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 營養(yǎng)剝奪可能通過誘導(dǎo)BNIP3 表達(dá)增加并結(jié)合線粒體導(dǎo)致線粒體功能障礙，最終導(dǎo)致髓核細(xì)胞死亡。
目的 系統(tǒng)評價國內(nèi)有關(guān)Bcl-2在急性白血病不同病理狀態(tài)中的表達(dá)及其與化療效果的關(guān)系。方法 計算機(jī)檢索CBMdisc、中文科技期刊全文數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)庫、中國期刊網(wǎng)專題全文數(shù)據(jù)庫、中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫、中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫，并輔以文獻(xiàn)追溯的方法，收集國內(nèi)公開發(fā)表的所有相關(guān)病例對照、隊列研究。檢索年限均為從建庫至2010年5月23日。按納入排除標(biāo)準(zhǔn)篩選文獻(xiàn)并評價納入研究的質(zhì)量后，采用RevMan 5.0軟件進(jìn)行Meta分析。結(jié)果 共納入10個研究，合計545例患者。Meta分析結(jié)果顯示：Bcl-2陽性的急性白血病患者化療后完全緩解率低于Bcl-2 陰性患者，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義［OR=0.26，95%CI（0.14，0.46），Plt;0.0001］； 急性淋巴細(xì)胞白血病與急性非淋巴細(xì)胞白血病患者Bcl-2陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義［OR=0.87，95%CI（0.46，1.65），P=0.68］；急性白血病患者化療后完全緩解（CR）患者Bcl-2陽性率明顯低于部分緩解者/完全不緩解者，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義［SMD= –0.87，95%CI（–1.53，–0.20），P=0.01］。結(jié)論 現(xiàn)有國內(nèi)證據(jù)表明，Bcl-2表達(dá)與急性白血病患者緩解率呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，Bcl-2基因的表達(dá)水平可用于急性白血病患者化療效果考核和預(yù)后評價研究。但該結(jié)論需要更多高質(zhì)量的研究進(jìn)一步證實。
【摘要】目的探討三七總皂苷（PNS）預(yù)處理對大鼠供肝缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用及其對供肝細(xì)胞凋亡和Bcl-2及Caspase-3 mRNA表達(dá)的影響。方法雄性SD大鼠分別用作供、受體，采用Kamada’s袖套法建立原位肝移植模型，根據(jù)供肝切取前1 h是否靜脈注射PNS（50 mg/kg）將大鼠隨機(jī)分為PNS預(yù)處理組（PNS組）和生理鹽水對照組（NS組）； 另設(shè)假手術(shù)作對照組（SO組）。分別于供肝再灌注后 2 h、6 h及24 h處死各組動物，檢測血清ALT及AST，HE切片作病理組織學(xué)檢查，TUNEL法檢測肝細(xì)胞凋亡，RT-PCR法檢測Bcl-2及Caspase-3 mRNA的表達(dá)。結(jié)果供肝再灌注后2 h、6 h及24 h各時點，PNS組大鼠血清ALT和AST水平及肝細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）均明顯低于NS組（P＜0.05，P＜0.01）； 6 h及24 h，PNS組大鼠肝組織Bcl-2 mRNA的表達(dá)水平明顯高于NS組（P＜0.05）； 2 h及6 h，PNS組大鼠肝組織Caspase-3 mRNA的表達(dá)水平明顯低于NS組（P＜0.05）。結(jié)論PNS預(yù)處理大鼠供肝，可以有效地減輕移植肝的缺血/再灌注損傷和細(xì)胞凋亡，影響細(xì)胞凋亡調(diào)控基因Bcl-2和 Caspase-3的表達(dá)。這可能為PNS抗細(xì)胞凋亡的機(jī)理之一。
目的研究乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中活化白細(xì)胞黏附分子（ALCAM/CD166）的表達(dá)及其與凋亡抑制蛋白Bcl-2及增殖細(xì)胞核抗原Ki-67的關(guān)系，探討ALCAM/CD166在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。 方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)ElivisionTM Plus二步法檢測96例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織和30例癌旁非瘤乳腺上皮組織中ALCAM/CD166及Bcl-2、Ki-67蛋白表達(dá)的情況，分析ALCAM/CD166蛋白表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的年齡、腫瘤直徑、組織病理學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期的關(guān)系以及其與Bcl-2、Ki-67的相關(guān)性。 結(jié)果①在96例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中ALCAM/CD166蛋白表達(dá)陽性率為79.2%（76/96），明顯高于其在癌旁非瘤乳腺上皮組織中的10.0%（3/30），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。②ALCAM/CD166蛋白陽性表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者的年齡、腫瘤直徑、組織病理學(xué)分級及TNM分期均無關(guān)（P＞0.05），與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）。③乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中ALCAM/CD166蛋白表達(dá)與Bcl-2蛋白表達(dá)呈正相關(guān)（rs=0.307，P=0.001），而與Ki-67蛋白表達(dá)無關(guān)（rs=0.064，P=0.475）。 結(jié)論ALCAM/CD166蛋白表達(dá)與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌細(xì)胞凋亡及轉(zhuǎn)移有關(guān)，可能成為判斷腫瘤生物學(xué)行為和患者預(yù)后的重要參考指標(biāo)之一。
目的探討胃轉(zhuǎn)流術(shù)對2型糖尿病大鼠腎臟早期損害的保護(hù)作用及其可能的作用機(jī)理。 方法采用高脂飲食加腹腔注射小劑量（35 mg/kg）鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ）方法建立2型糖尿病大鼠模型。將造模成功的糖尿病大鼠按數(shù)字表法隨機(jī)分為3組：糖尿病對照組（n=8）、假手術(shù)組（n=8）和Roux-en-Y胃旁路手術(shù)組（n=14）；另取正常SD大鼠作為正常對照組（n=8）。分別于術(shù)前和術(shù)后8周檢測各組大鼠的空腹血糖、血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）和游離脂肪酸（FFA）水平；于術(shù)前和術(shù)后4及8周測定各組大鼠血清尿素氮（BUN）和肌酐（Cr）；于術(shù)前和術(shù)后8周測定各組大鼠24 h尿微量白蛋白和尿8-羥基脫氧鳥酐；于術(shù)后8周取腎組織進(jìn)行病理組織學(xué)觀察，計算腎重指數(shù)、腎小球平均截面積(MGA)及腎小球平均體積(MGV)，并采用免疫組化方法檢測腎組織纖連蛋白（FN）、Ⅳ型膠原（CoⅣ）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4（NOX4）和Bcl-2蛋白的表達(dá)。 結(jié)果Roux-en-Y胃旁路術(shù)能顯著降低糖尿病大鼠血糖、血脂、腎重指數(shù)、MGA和MGV（P＜0.05），改善腎臟病理形態(tài)和腎臟功能（P＜0.05），減少FN及CoⅣ蛋白的表達(dá)，降低TGF-β1、NOX4和ICAM-1在腎臟皮質(zhì)的表達(dá)，同時增加Bcl-2蛋白的表達(dá)（P＜0.05）。 結(jié)論胃旁路術(shù)可改善糖尿病大鼠的腎臟功能，改善其病理損害，其機(jī)理可能與抑制TGF-β1、NOX4和ICAM-1蛋白的表達(dá)和上調(diào)Bcl-2蛋白的水平有關(guān)。
目的 觀察大鼠脊髓圓錐損傷后大腦排尿功能區(qū)結(jié)構(gòu)變化和 Bcl-2 的表達(dá)情況，探討大腦排尿功能區(qū)退變的可能因素。 方法 成年雌性 SD 大鼠 36 只，隨機(jī)分為實驗組（n=30）和對照組（n=6）。實驗組將大鼠 L4 以下脊神經(jīng)切斷制作脊髓圓錐損傷模型，對照組不作任何處理。實驗組大鼠手術(shù)全部成功，術(shù)后 3、5 個月分別死亡 1 只大鼠，原因可能是腎功能衰竭及尿路感染。實驗組于術(shù)后 1 d、1 周以及 1、3、6 個月分別處死 6、6、6、5、5 只大鼠，對照組相同時間點各處死 1 只大鼠，取腦橋被蓋背外側(cè)部組織，行 HE 染色和 Bcl-2 免疫組織化學(xué) SP 染色觀察。 結(jié)果 HE 染色示，術(shù)后 1 d，實驗組和對照組無明顯區(qū)別，神經(jīng)元細(xì)胞密集，排列整齊，核仁清楚；1 周，實驗組可見神經(jīng)元細(xì)胞周圍間隙稍增寬；1 個月，實驗組部分神經(jīng)元出現(xiàn)細(xì)胞核固縮；3、6 個月，實驗組細(xì)胞核固縮的細(xì)胞越來越多，甚至部分細(xì)胞出現(xiàn)核消失。Bcl-2 免疫組織化學(xué) SP 染色示，對照組 Bcl-2 表達(dá)呈弱陽性。實驗組術(shù)后 1 d 即出現(xiàn) Bcl-2 陽性表達(dá)，術(shù)后 7 d Bcl-2 陽性表達(dá)較對照組明顯升高，并達(dá)高峰，術(shù)后 1、3、6 個月 Bcl-2 陽性表達(dá)逐漸下降，但仍高于對照組。 結(jié)論 大鼠脊髓圓錐損傷后大腦排尿中樞出現(xiàn)組織退變、細(xì)胞壞死，Bcl-2 表達(dá)升高可能與組織修復(fù)、大腦功能重塑有關(guān)。
目的檢測 Notch 信號通路在激活和失活狀態(tài)下，鼠膝骨關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中 Notch1、Bax 和 Bcl-2 基因的表達(dá)情況，探討 Notch 信號通路在大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）軟骨細(xì)胞凋亡中的作用機(jī)制。方法選取 34 只無特定病原體級 Sprague Dawley 大鼠，其中 32 只使用 Hulth 方法制造右膝 OA 模型，余下 2 只正常飼養(yǎng)。4 周后，造模大鼠隨機(jī)選擇 2 只以及正常飼養(yǎng)的 2 只大鼠全部處死，觀察右膝軟骨的形態(tài)變化，并進(jìn)行病理檢查證實造模成功，余下的 30 只大鼠隨機(jī)分成激活組、抑制組、空白對照組，每組 10 只。于每周星期二、五行大鼠膝關(guān)節(jié)腔注射，其中激活組注射 Nocth 信號通路特異性激活劑 Jagged1 蛋白 25 ng/kg，抑制組注射 γ 分泌酶抑制劑 DAPT（GSI-IX）100 ng/kg，空白對照組注射同體積磷酸鹽緩沖液。關(guān)節(jié)腔注射 8 周后全部處死大鼠，取右膝股骨髁關(guān)節(jié)骨軟骨標(biāo)本，大體觀察 3 組大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨的退變程度，行光學(xué)顯微鏡下組織形態(tài)學(xué)觀察及 Mankin 評分，并采用免疫組織化學(xué)檢測各組軟骨細(xì)胞中 Notch1、Bax 和 Bcl-2 蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果關(guān)節(jié)腔注射 8 周后，抑制組、空白對照組、激活組 Mankin 評分分別為（3.40±0.84）、（6.70±0.95）、（11.10±1.37）分，組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。抑制組大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨的 Notch1、Bax 陽性率均低于空白對照組及激活組（P<0.05），Bcl-2 陽性率高于空白對照組及激活組（P<0.05）。結(jié)論Notch 信號通路激活后可能通過凋亡途徑上調(diào) Bax 蛋白，下調(diào) Bcl-2 蛋白，從而促進(jìn)軟骨細(xì)胞凋亡，加重 OA；Notch 信號通路抑制后可能通過凋亡途徑下調(diào) Bax 蛋白，上調(diào) Bcl-2 蛋白，從而抑制軟骨細(xì)胞凋亡，減輕 OA 發(fā)展。