目的 探討bFGF和副甲狀腺激素相關(guān)肽（parathyroid hormone-related protein，PTHrP）對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)兔BMSCs向軟骨細(xì)胞分化的影響。 方法2月齡健康日本大耳白兔3只，雌雄不限，體重1.6～2.1 kg；取兔脛骨骨髓分離培養(yǎng)BMSCs。取第3代細(xì)胞行團(tuán)塊狀立體培養(yǎng)，并按照不同誘導(dǎo)條件分為TGF-β1組（A組）、TGF-β1/bFGF組（B組）、TGF-β1/21 d bFGF組（C組）、TGF-β1/PTHrP組（D組）、TGF-β1/21d PTHrP組（E組）。于團(tuán)塊狀立體培養(yǎng)開始時(shí)，各組均加入10 ng/mL TGF-β1；B、D組同時(shí)加入10 ng/mL bFGF或10 ng/mL PTHrP；C、E組于培養(yǎng)21 d時(shí)對(duì)應(yīng)加入10 ng/ mL bFGF或10 ng/mL PTHrP。培養(yǎng)后1、2、3、4、5、6周檢測(cè)各組BMSCs向軟骨細(xì)胞分化的標(biāo)志性基因Ⅰ型膠原（collagen type Ⅰ，ColⅠ）、ColⅡ、ColⅩ和基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMP）13的表達(dá)，1、2、3、4、6周檢測(cè)ALP活性，6周時(shí)行1，9二甲基亞甲藍(lán)（1，9-dimethylmethylene blue，DMMB）染色觀察細(xì)胞外基質(zhì)分泌情況。 結(jié)果RT-PCR檢測(cè)示，3周后C、E組ColⅠ基因表達(dá)呈顯著下降趨勢(shì)，4、5周時(shí)A組顯著高于C、E組（P lt; 0.05），3～6周A組顯著高于B、D組（P lt; 0.05）；B、C組3、4周時(shí)及D、E組3周時(shí)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。C、E組3周后ColⅡ、ColⅩ基因表達(dá)均逐漸下降，4～6周時(shí)顯著低于A組（P lt; 0.05）；B、D組各時(shí)間點(diǎn)兩基因表達(dá)均未見顯著升高，與A組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。A組各時(shí)間點(diǎn)MMP-13均未見明顯表達(dá)，3周時(shí)B組與A、C組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），D組顯著高于A、E組（P lt; 0.05）。隨著時(shí)間延長(zhǎng)A組ALP活性逐漸升高，4周后C、E組顯著下降，均低于A組（P lt; 0.05）；B、C組間及D、E組間比較，僅在2、3周時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。DMMB染色顯示6周時(shí)A組軟骨陷窩明顯，其余各組軟骨陷窩明顯較少。 結(jié)論bFGF和PHTrP能通過改變軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的合成和分解，抑制TGF-β1誘導(dǎo)的兔BMSCs向軟骨細(xì)胞分化。這種抑制作用不僅通過抑制ColⅩ基因表達(dá)而實(shí)現(xiàn)，可能還通過抑制其他軟骨分化相關(guān)蛋白實(shí)現(xiàn)。
目的 探討并比較兩種移植物重建前交叉韌帶（anterior cruciate ligament，ACL）后早期移植物隧道界面愈合的生物學(xué)機(jī)制。 方法 55 只成年新西蘭大白兔，體重2.0 ～ 2.8 kg。左膝關(guān)節(jié)切取帶脛骨- 骨塊的髕韌帶作為供區(qū)，右膝關(guān)節(jié)作為自體移植重建ACL 受區(qū)。移植物骨塊端為骨- 骨界面愈合模型，韌帶端為腱- 骨界面愈合模型。術(shù)后觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況，術(shù)后第2、4 和8 周取材（n=5）行大體及組織學(xué)觀察，并于第4、8 周取材（n=20）進(jìn)行生物力學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果 術(shù)后動(dòng)物肢體活動(dòng)情況良好，實(shí)驗(yàn)過程中ACL 連續(xù)性完整，張力適中。組織學(xué)觀察：術(shù)后2 周骨- 骨界面大部分區(qū)域?yàn)槔w維組織連接，腱- 骨界面主要為肉芽組織填充；術(shù)后4 周骨- 骨界面大部分區(qū)域骨性愈合，腱- 骨界面可見成骨反應(yīng)及大量成纖維細(xì)胞；術(shù)后8 周骨- 骨界面已完全骨性愈合，腱- 骨界面部分區(qū)域可見Sharpey 纖維，形成間接止點(diǎn)。生物力學(xué)觀察：術(shù)后4 周腱- 骨界面拔出率為85%，骨- 骨界面為15%；術(shù)后8 周腱- 骨界面拔出率為95%，骨-骨界面為5%；各時(shí)間點(diǎn)骨- 骨界面拔出率與腱- 骨界面拔出率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.001）。 結(jié)論 ACL 重建術(shù)后早期骨- 骨界面較腱- 骨界面在愈合強(qiáng)度和速度上具有優(yōu)勢(shì)。
表觀遺傳學(xué)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的調(diào)控作用已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。本文主要綜述了DNA甲基化、組蛋白乙?；⑿「蓴_RNA(siRNA)誘導(dǎo)基因沉默以及微小RNA(miRNA)四個(gè)方面對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞調(diào)控作用的進(jìn)展。結(jié)果表明, 表觀遺傳學(xué)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的調(diào)控作用在骨修復(fù)、神經(jīng)修復(fù)和心肌修復(fù)等方面的應(yīng)用具有重要的意義。
目的綜述破骨細(xì)胞除骨吸收之外的功能研究進(jìn)展。 方法查閱近年來與破骨細(xì)胞功能研究相關(guān)的文獻(xiàn)，排除與骨吸收有關(guān)的文獻(xiàn)，并進(jìn)行分析總結(jié)。 結(jié)果破骨細(xì)胞從骨基質(zhì)調(diào)節(jié)因子、雙向信號(hào)和細(xì)胞因子3個(gè)方面調(diào)節(jié)骨形成，參與造血微環(huán)境的形成，造血干細(xì)胞動(dòng)員及其數(shù)量、功能的維持，以及血管生成過程。 結(jié)論目前對(duì)破骨細(xì)胞調(diào)節(jié)造血作用的確切機(jī)制仍缺乏深入了解；此外，破骨細(xì)胞耦聯(lián)因子作用于成骨細(xì)胞分化的哪一過程、誘導(dǎo)的血管生成參與哪些生理或病理過程等關(guān)鍵問題也有待解決；揭示其內(nèi)在機(jī)制有助于為治療多種破骨細(xì)胞相關(guān)性疾病提供科學(xué)的策略。
目的對(duì)軟骨組織工程三要素——細(xì)胞、支架、生長(zhǎng)信息三者的結(jié)合領(lǐng)域：細(xì)胞-支架修復(fù)技術(shù)、無細(xì)胞-基于支架的修復(fù)技術(shù)及無支架-基于細(xì)胞的修復(fù)技術(shù)進(jìn)行綜述。 方法查閱近年國內(nèi)外與軟骨組織工程三要素結(jié)合領(lǐng)域相關(guān)的文獻(xiàn)，并進(jìn)行分析總結(jié)。 結(jié)果細(xì)胞-支架修復(fù)技術(shù)如基質(zhì)誘導(dǎo)自體軟骨細(xì)胞移植，預(yù)先將軟骨細(xì)胞固定，可提高其移植生存率；無細(xì)胞-基于支架的修復(fù)技術(shù)通過誘導(dǎo)劑促進(jìn)自身細(xì)胞聚集修復(fù)，效果良好；無支架-基于細(xì)胞的修復(fù)技術(shù)最接近軟骨胚胎發(fā)育過程，可避免支架降解產(chǎn)物毒性作用。 結(jié)論細(xì)胞-支架、無細(xì)胞-基于支架、無支架-基于細(xì)胞的軟骨組織工程技術(shù)提供了更接近自然軟骨組織的修復(fù)方式，發(fā)展前景廣闊。