目的探討培養(yǎng)液中不同濃度FBS對成骨生長肽(osteogenic growth peptide,OGP)促進(jìn)BMSCs增殖和分化的影響。 方法取8只5周齡SD大鼠四肢骨，貼壁法分離純化BMSCs并傳代，倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。取第3代BMSCs分組培養(yǎng)：分別采用濃度為1×10-10、1×10-9和1×10-8 mol/L的OGP進(jìn)行培養(yǎng)，以正常培養(yǎng)細(xì)胞作為對照組；同時每組設(shè)FBS濃度為0、2%、5%、8%和10% 5個梯度。培養(yǎng)后1、3、5、7、9、12 d采用MTT法檢測細(xì)胞增殖，9 d時采用對硝基苯磷酸二鈉法測定早期分化指標(biāo)細(xì)胞內(nèi)ALP活性。 結(jié)果倒置相差顯微鏡下觀察BMSCs貼壁生長，增殖迅速，呈纖維狀渦旋生長，形態(tài)典型。MTT檢測示，F(xiàn)BS低于5%時各組細(xì)胞不能持續(xù)增殖，當(dāng)FBS濃度為8%以上時細(xì)胞可持續(xù)增殖；OGP 1×10-8 mol/L和1×10-9 mol/L組在FBS各濃度中促增殖效果均大于對照組（P＜0.05）；FBS濃度低于10%時，OGP 1×10-8 mol/L組促增殖效果顯著優(yōu)于其余OGP濃度組（P＜0.05），但FBS濃度為10%時OGP 1×10-8 mol/L組無促增殖優(yōu)勢。ALP檢測示，各組組內(nèi)隨FBS濃度增加，ALP活性增加（P＜0.05）；當(dāng)FBS濃度為5%、8%時，各OGP濃度組ALP活性均大于對照組（P＜0.05），且OGP 1×10-8mol/L組最高（P＜0.05）；當(dāng)FBS濃度為10%時，各OGP組ALP活性仍大于對照組（P＜0.05），但OGP 1×10-8 mol/L組與OGP 1×10-9 mol/L組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 結(jié)論8%FBS濃度為OGP促進(jìn)BMSCs增殖分化的最佳血清濃度，且OGP促進(jìn)BMSCs增殖分化的最適濃度為1×10-8 mol/L。
目的 對非增殖型糖尿病視網(wǎng)膜病變（nonproliferative diabetic retinopathy，NPDR）治療的臨床相關(guān)研究證據(jù)進(jìn)行評價。方法 檢索Cochrane 圖書館（2007年第3期）、PubMed（1966~2007.6）、CBM（1979~2007.6）等數(shù)據(jù)庫中與NPDR有關(guān)的臨床研究證據(jù)，并對所獲證據(jù)質(zhì)量進(jìn)行評價。結(jié)果 共納入1篇系統(tǒng)評價，20個隨機對照試驗。臨床證據(jù)顯示，嚴(yán)格控制血糖和血壓是治療NPDR的基本方法，可延緩患者視網(wǎng)膜病變進(jìn)展。其它治療措施的價值尚需進(jìn)一步研究。結(jié)論 NPDR是糖尿病視網(wǎng)膜病變的早期階段，相關(guān)的系統(tǒng)評價和高質(zhì)量的隨機對照研究證實控制血糖和血壓在治療NPDR中的作用。其它治療措施的價值有待相關(guān)的系統(tǒng)評價和更多大樣本、多中心的高質(zhì)量臨床研究證實。
【摘要】 近年來大量的研究對骨髓增殖性疾病發(fā)病機制有了更進(jìn)一步的認(rèn)識。其中最重要的發(fā)現(xiàn)是出現(xiàn)在絕大多數(shù)陣型紅細(xì)胞增多癥和一半左右原發(fā)性血小板增多癥及骨髓纖維化的JAK2 V617F突變，能使細(xì)胞增殖活性明顯增強，并引起細(xì)胞的增殖和凋亡抑制。其他的突變包括JAK2外顯子12突變、MPL突變等。對慢性粒細(xì)胞白血病的急變機制及對伊馬替尼的耐藥機制也有了更多的認(rèn)識。這些新的發(fā)現(xiàn)影響了慢性骨髓增殖性腫瘤的診斷標(biāo)準(zhǔn)與流程，并對其治療提供了新的靶點。
【摘要】 目的 探討葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白Ⅰ型（glucose transporter 1，GLUT1）和腫瘤增殖細(xì)胞核抗原Ki-67在卵巢上皮性腫瘤組織中的表達(dá)及其臨床意義。 方法 收集2000年1月-2008年6月不同卵巢上皮性腫瘤病變患者119例的組織標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)SP二步法檢測腫瘤組織中GLUT1和Ki-67的表達(dá)情況?！〗Y(jié)果 卵巢交界性、惡性上皮性腫瘤灶性或廣泛高表達(dá)GLUT1和Ki-67，其表達(dá)強度有差異。卵巢良性上皮性腫瘤不表達(dá)GLUT1和Ki-67。在卵巢癌中GLUT1及Ki-67的表達(dá)強度與病理分級、臨床分期、預(yù)后有關(guān)。GLUT1表達(dá)強度與病理分型無關(guān)，Ki-67表達(dá)強度與病理分型有關(guān)?！〗Y(jié)論 卵巢上皮性腫瘤組織中GLUT1和Ki-67的表達(dá)具有相關(guān)性，其表達(dá)強度與腫瘤的良惡性質(zhì)和增殖狀態(tài)有關(guān)，二者同時檢測可以全面了解卵巢上皮性腫瘤的性質(zhì)、卵巢癌惡性程度和生物學(xué)行為，對于判斷腫瘤的性質(zhì)和預(yù)后有一定價值。【Abstract】 Objective To investigate the expression and clinical significance of glucose transporter-1 (GLUT1) and tumor proliferating karyon antigen Ki-67 in epithelial ovarian tumor tissue. Methods Immunohistochemistry SP method was used to detect the expression of GLUT1 and Ki-67 protein in epithelial ovarian tumor tissues from 119 patients diagnosed in our hospital from January 2000 to June 2008. Results The expressions of GLUT1 and Ki-67 had local or abroad higher expressions in the borderline and malignant epithelial ovarian tumor, and the expressive intensity was different. In benign tumors, the expression was negative. The expressive intensity of GLUT1 and Ki-67 had correlation with the grade, stage, and prognosis in malignant tumors. The expressive intensity of GLUT1 had no correlation with the type of malignant tumors, while Ki-67 related to the pathological types. Conclusion The expressions of GLUT1 and Ki-67 have relativity. The expressive intensity of GLUT1 and Ki-67 relates to the character and proliferation of epithelial ovarian tumors. The combined detection GLUT1 and Ki-67 is helpful to know the character of epithelial ovarian tumors, the malignant degree and biologic behavior of ovarian carcinoma, which is useful in estimating the character and prognosis of epithelial ovarian tumors.
目的 研究原發(fā)性肝細(xì)胞癌發(fā)生、發(fā)展過程中肝組織增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）的動態(tài)演變規(guī)律。方法 將60只SD大鼠按隨機數(shù)字表法隨機分為對照組（20只）和實驗組（40只）。用化學(xué)致癌劑3,3′-二氨基聯(lián)苯胺（3，3′-diaminobenzidine,DAB）誘發(fā)SD大鼠肝癌，采用免疫組織化學(xué)方法連續(xù)監(jiān)測各時相肝組織中PCNA的表達(dá)，光鏡下觀察肝組織的病理變化。結(jié)果 本實驗的誘癌過程可分為炎性變期、增生纖維化期和癌變期3個階段； PCNA的表達(dá)最早出現(xiàn)于炎性變早期匯管區(qū)的卵圓細(xì)胞中，并在匯管區(qū)呈區(qū)域性過表達(dá)分布； 炎性變中期，PCNA表達(dá)陽性率達(dá)高峰，隨后下降，在癌變期又升高，在整個病理演變過程中其表達(dá)具波動性。結(jié)論 在致癌因素的存在下，PCNA首先表達(dá)于卵圓細(xì)胞； PCNA表達(dá)的動態(tài)演變對肝癌的發(fā)生有一定的預(yù)警作用。
目的 應(yīng)用細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)1/2抑制劑U0126研究ERK1/2在肝癌細(xì)胞增殖、凋亡中的作用。方法 以肝癌SMMC-7721細(xì)胞株為材料，分為空白對照組及不同濃度的U0126處理組。以MTT檢測細(xì)胞增殖情況，流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 不同濃度的U0126處理后均可明顯抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖（P＜0.05，P＜0.01）,使處于G0/G1期的細(xì)胞明顯增多（P＜0.05）且呈劑量依賴性，并誘發(fā)細(xì)胞凋亡發(fā)生（P＜0.05）。 結(jié)論 阻斷ERK1/2通路有可能成為肝癌治療的重要手段。
目的研究胃癌增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)表達(dá)與腹腔灌洗液端粒酶活性及腹膜轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，并比較腹腔灌洗液中端粒酶活性和細(xì)胞學(xué)檢測游離癌細(xì)胞預(yù)測腹膜轉(zhuǎn)移的應(yīng)用價值。方法應(yīng)用免疫組化SP法檢測60例胃癌患者胃癌組織中PCNA表達(dá),PCRTRAPELISA法檢測腹腔灌洗液中端粒酶活性,同時行腹腔灌洗液脫落細(xì)胞學(xué)(peritoneal lavage cytology,PLC)檢測； 并分析其與相關(guān)臨床病理因素的關(guān)系。結(jié)果胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性的陽性率為41.7%； 與漿膜侵犯、組織學(xué)類型、浸潤深度、漿膜受累面積及腹膜轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，并隨著浸潤深度及漿膜受累面積的增加而升高(P＜0.05)。PLC檢測陽性率為25.0%； 在伴肉眼可見腹膜轉(zhuǎn)移灶(P1～3)者明顯增高，也隨著浸潤深度及漿膜受累面積的增加而升高。兩種方法檢測的陽性率總體上差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但在未分化型癌、pT4、伴肉眼可見腹膜轉(zhuǎn)移灶(P1～3)者端粒酶活性陽性率明顯高于PLC。PCNA增殖指數(shù)（PI）在腹腔灌洗液端粒酶活性表達(dá)陽性者明顯高于表達(dá)陰性者，伴肉眼可見腹膜轉(zhuǎn)移灶(P1～3)者明顯高于無肉眼可見腹膜轉(zhuǎn)移灶（P0）者，漿膜受侵者明顯高于漿膜未受侵者（P均＜0.05）。結(jié)論兩種方法均適用于胃癌腹腔脫落癌細(xì)胞的診斷或腹膜轉(zhuǎn)移的預(yù)測，端粒酶活性檢測微量癌細(xì)胞的靈敏度優(yōu)于PLC法檢測； 胃癌端粒酶活性與惡性增殖活性密切相關(guān)； 胃癌高增殖活性是漿膜受侵及腹膜轉(zhuǎn)移的重要原因。
目的 觀察膽囊結(jié)石患者膽汁（CB）對人膽囊癌細(xì)胞系GBC-SD生長的影響，探討膽囊結(jié)石與膽囊癌發(fā)生與發(fā)展的關(guān)系。 方法 應(yīng)用四唑藍(lán)（MTT）比色法檢測20例CB和20例正常膽汁（NB）對GBC-SD細(xì)胞增殖的影響，應(yīng)用流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞周期和凋亡。 結(jié)果 CB與NB比較，前者可明顯促進(jìn)GBC-SD細(xì)胞增殖，用CB處理48 h后GBC-SD細(xì)胞增殖指數(shù)顯著上升（P＜0.05）。CB組S期細(xì)胞比例為（49.26±8.07）%，明顯高于NB組的（25.54±6.57）%，P＜0.05； CB組G0/G1期細(xì)胞比例為（40.59±9.12）%，明顯低于NB組的（60.64±13.42）%，P＜0.05。CB組和NB組細(xì)胞凋亡率分別為（5.50±1.16）%和（3.91±1.76）%，Pgt;0.05。 結(jié)論 CB具有潛在的促增殖活性，且膽囊結(jié)石與膽囊癌的發(fā)生與發(fā)展關(guān)系密切。
目的 探討β-catenin（連環(huán)素）在胰腺癌表達(dá)的臨床意義。方法 對手術(shù)切除的46例胰腺癌標(biāo)本進(jìn)行免疫組化染色，檢測β-catenin在胰腺癌中的表達(dá)，并分析其和胰腺癌的分級、分期以及有無轉(zhuǎn)移等指標(biāo)的關(guān)系。結(jié)果 β-catenin在胰腺癌細(xì)胞膜的異常表達(dá)率為54.3%，且分化越差則在細(xì)胞膜的異常表達(dá)率越高，有轉(zhuǎn)移者高于無轉(zhuǎn)移者； 其在細(xì)胞漿的異常表達(dá)率為21.7%，與胰腺癌的分化、分期及有無轉(zhuǎn)移無顯著相關(guān)性，但23例術(shù)前介入化療的患者中，腫塊縮小者（14例）在細(xì)胞漿的異常表達(dá)率為0，顯著低于9例腫塊無縮小者的33.3%； β-catenin在細(xì)胞膜和細(xì)胞漿異常表達(dá)具有一致性，為63.0%。結(jié)論 β-catenin在細(xì)胞膜的異常表達(dá)能促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移，在細(xì)胞漿內(nèi)的異常表達(dá)可能會促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖。
目的通過血管內(nèi)放射防治頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)(CEA)后再狹窄，動態(tài)觀察其對中膜平滑肌細(xì)胞(SMC)凋亡和增殖的影響，并初步探討其防治再狹窄的可能機理。方法40只兔行CEA后，隨機分為4組，分別給予0 Gy、10 Gy、20 Gy及40 Gy放射劑量的32P，于術(shù)后3 d、7 d、14 d、28 d及56 d分別處死動物，取出血管標(biāo)本進(jìn)行病理組織學(xué)分析。結(jié)果術(shù)后除3 d及7 d外，對照組發(fā)生明顯內(nèi)、中膜增生及管腔狹窄，而內(nèi)放射組可見內(nèi)、中膜增生明顯受抑制，管腔面積縮小顯著減輕(P＜0.05)。SMC凋亡率和細(xì)胞增殖核抗原(PCNA)陽性細(xì)胞均于術(shù)后3 d增加，7 d時達(dá)高峰，治療組與對照組比較差異有顯著性意義(P＜0.01)； 20 Gy和40 Gy的作用明顯強于10 Gy組(P＜0.01)。結(jié)論內(nèi)放射治療可能是通過抑制SMC增殖、遷移，誘導(dǎo)SMC凋亡，防治再狹窄，并且隨劑量呈遞增效應(yīng)； 球囊損傷后早期以細(xì)胞增生和凋亡為主要表現(xiàn)，晚期表現(xiàn)為內(nèi)、中膜面積的增加。