華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 關(guān)鍵詞 包含"hBMSCs" 11條結(jié)果
  • hBMSCs 的生物打印初步研究

    目的 初步確立hBMSCs 的二維生物打印方法,實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞噴射過程的控制并保持打印后細(xì)胞活力。 方法 取健康志愿者骨髓5 mL,常規(guī)培養(yǎng)hBMSCs 至第2 代,調(diào)整為1 × 106 個/mL 單細(xì)胞懸液。實(shí)驗(yàn)分3 組:打印組1 細(xì)胞先行碘化丙啶(propidium iodide,PI)熒光標(biāo)記,快速成型組織打印機(jī)進(jìn)行二維細(xì)胞打印,x 軸間隔300 μm,y 軸間隔1 500 μm,激光共聚焦顯微鏡觀察。打印組2 細(xì)胞未行PI 標(biāo)記,經(jīng)生物打印后培養(yǎng)2 h,Live/Dead viability Kit 測定細(xì)胞活力,激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞熒光染色情況;取1 份未經(jīng)Live/Dead viability Kit 測試的打印組2 細(xì)胞,培養(yǎng)7 d 后倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),貼壁后常規(guī)培養(yǎng),動態(tài)觀察細(xì)胞生長狀態(tài)。對照組除細(xì)胞懸液不行打印,其余操作同打印組2。 結(jié)果 打印組1 細(xì)胞激光共聚焦顯微鏡觀察,“細(xì)胞墨滴”在二維組織中規(guī)則且均勻分布,滿足二維設(shè)計(jì)細(xì)胞打印要求;每個“細(xì)胞墨滴”包含細(xì)胞15 ~ 35 個。打印組2 細(xì)胞經(jīng)活力測試,細(xì)胞孵育30 min 后激光共聚焦顯微鏡觀察顯示細(xì)胞熒光染色情況。對照組細(xì)胞活力與打印組2 無明顯區(qū)別。打印后細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)7 d,細(xì)胞可正常貼壁生長,形態(tài)、生長狀態(tài)良好。 結(jié)論 通過生物打印技術(shù)可實(shí)現(xiàn)hBMSCs 在二維平面上的定向、定量規(guī)則分布,并為進(jìn)一步的細(xì)胞三維打印乃至器官打印體系奠定基礎(chǔ)。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:05 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 缺氧對hBMSCs 和胎盤來源MSCs 增殖的影響

    目的 比較hBMSCs 和人胎盤基蛻膜MSCs(human placental decidua basalis-MSCs,hPDB-MSCs)在化學(xué)缺氧條件下的增殖情況,為尋找組織工程新的種子細(xì)胞提供理論依據(jù)。 方法 采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)hBMSCs 與hPDB-MSCs,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物;CoCl2 建立化學(xué)缺氧模型,MTT 法檢測兩種細(xì)胞在不同CoC12 濃度(0、50、75、100、125、150、175、200 μmol/L)和不同時間(6、12、24、48、72 和96 h)的增殖情況。 結(jié)果 流式細(xì)胞儀檢測顯示hPDB-MSCs 與hBMSCs 均表達(dá) CD9、CD29、CD44、CD105、CD106、人類白細(xì)胞抗原ABC(humanleucocyte antigen ABC,HLA-ABC),不表達(dá)CD34、CD40L 和HLA-DR;但與hBMSCs 相比,hPDB-MSCs 階段特異表達(dá)的胚胎抗原1(stage-specific embryonic antigen 1,SSEA-1)、SSEA-3、SSEA-4、腫瘤排斥抗原(tumor rejection autigen,TRA)-1-60、TRA-1-81 表達(dá)更高?;瘜W(xué)缺氧12 h 內(nèi),hBMSCs 與hPDB-MSCs 增殖均被抑制,12 h 后均能促進(jìn)增殖;與對照組比較,hBMSCs 經(jīng)150 μmol/L CoCl2 作用24 h 出現(xiàn)顯著增殖(P lt; 0.05),hPDB-MSCs 在75 μmol/L CoCl2 作用12 h 后出現(xiàn)顯著增殖(P lt; 0.05)。 結(jié)論 與hBMSCs 相比,hPDB-MSCs 表達(dá)更高的胚胎干細(xì)胞特有表面抗原,同時對化學(xué)缺氧所致的增殖影響更為敏感,可能成為一種新的組織工程種子細(xì)胞來源。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:05 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 瘦素對hBMSCs 成骨分化的作用及機(jī)制研究

    目的 探討瘦素(leptin,LEP)對 hBMSCs 成骨分化的作用及機(jī)制。 方法 采用全骨髓法培養(yǎng)hBMSCs,取第3 代hBMSCs 分為A、B、C、D、E、F 組,待細(xì)胞貼壁后各組分別加入400、200、100、50 ng/mL LEP 、100 ng/ mL BMP 和普通培養(yǎng)基2 mL 進(jìn)行培養(yǎng)。于培養(yǎng)后7 d 行ALP 染色、21 d 行礦化結(jié)節(jié)染色,倒置相差顯微鏡觀察染色結(jié)果;并于培養(yǎng)后7、14、21 d,檢測各組ALP 活性、骨鈣素(osteocalcin,OCN)水平,篩選 LEP 的最佳誘導(dǎo)濃度;B、E、F 組細(xì)胞培養(yǎng)7 d 后,采用 RT-PCR 檢測成骨相關(guān)基因:核心結(jié)合因子(core-binding factor α1,Cbfα1)、ALP、Col Ⅰ、OCN mRNA 的表達(dá)。 結(jié)果 誘導(dǎo)培養(yǎng)7 d,ALP 染色結(jié)果顯示,A、B、C、D、E 組細(xì)胞胞漿均呈藍(lán)色陽性著色,F(xiàn) 組呈弱陽性;誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d,礦化結(jié)節(jié)染色結(jié)果顯示,A、B、C、D、E 組細(xì)胞染色呈陽性,F(xiàn) 組呈陰性。B 組培養(yǎng)后7、14、21 d,ALP、OCN 活性低于 E 組,但顯著高于其余各組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05),200 ng/mL LEP 為最佳濃度。B、E、F組細(xì)胞培養(yǎng)7 d,F(xiàn) 組Cbfα1、ALP、Col Ⅰ、OCN mRNA 均不表達(dá);B、E 組各產(chǎn)物mRNA 均有表達(dá),但B 組低于E 組。 結(jié)論 LEP 可促進(jìn) hBMSCs 成骨分化,其機(jī)制可能為LEP 促進(jìn)了成骨相關(guān)基因的表達(dá)

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:05 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 不同接種方法下hBMSCs 在生物珊瑚支架中的空間分布和基因表達(dá)分析

    目的 比較采用兩種不同方法接種的hBMSCs 在生物珊瑚支架中的三維空間分布和基因表達(dá)。 方法 采用傳統(tǒng)接種法(A 組)和纖維蛋白凝膠接種法(B 組)構(gòu)建hBMSCs 和生物珊瑚支架復(fù)合體。A 組孵育3 h,B 組孵育30 min 后檢測兩組細(xì)胞接種效率。培養(yǎng)后2、7、14、21 d,兩組分別取材行DAPI 染色后,熒光顯微鏡觀察,采用AxioVision 圖像分析軟件測量每個切片10 倍物鏡視野中的細(xì)胞數(shù)量,以切片的不同水平區(qū)域(從表面到底部為L1 ~ L5)和垂直區(qū)域(從中心到邊緣)比較兩組細(xì)胞分布情況;采用實(shí)時熒光RT-PCR 檢測成骨分化基因骨凝集素(osteonectin,ON)、核心結(jié)合因子α1(core binding factor α1,Cbfα1)和骨鈣素(osteocalcin,OC)表達(dá)。 結(jié)果 B 組細(xì)胞接種效率為88.32% ± 4.20%,明顯高于A組66.51% ± 12.33%(P lt; 0.01)。培養(yǎng)后2 d,兩組細(xì)胞水平區(qū)域分布由L1 ~ L4 逐漸減少(P lt; 0.05);垂直區(qū)域細(xì)胞數(shù)目比較,A 組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05),B 組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);兩組間各成骨分化基因表達(dá)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。培養(yǎng)后 7 d,A 組細(xì)胞數(shù)目較2 d 時逐步減少,各水平區(qū)域間細(xì)胞數(shù)目比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05),而B 組細(xì)胞數(shù)目和各成骨分化基因表達(dá)量迅速增加,各水平區(qū)域細(xì)胞數(shù)目趨于平衡,細(xì)胞分布均勻(P gt; 0.05),ON 和Cbfα1 基因表達(dá)量明顯高于A 組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt; 0.05)。培養(yǎng)后14 d,A 組各水平及垂直區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞數(shù)目均較7 d 時急速減少(P lt; 0.05),B 組細(xì)胞增殖良好且細(xì)胞總數(shù)與7 d 時相近;B 組OC 基因表達(dá)量達(dá)峰值,兩組間各基因表達(dá)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt; 0.05)。培養(yǎng)后21 d,兩組各水平區(qū)域細(xì)胞數(shù)目和兩組間各基因表達(dá)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);兩組各垂直區(qū)域細(xì)胞數(shù)目比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt; 0.05)。培養(yǎng)后714、21 d,B 組大部分區(qū)域細(xì)胞數(shù)目均較A 組多,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 通過纖維蛋白凝膠接種較傳統(tǒng)方法接種可使hBMSCs 在支架中空間分布更均勻,能達(dá)到更快的細(xì)胞增殖和更有效的成骨分化。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:07 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 脂質(zhì)體介導(dǎo)的重組質(zhì)粒pIRES-hBMP-2-hVEGF165體外轉(zhuǎn)染對hBMSCs 成骨能力的影響

    目的 探討重組質(zhì)粒pIRES-hBMP-2-hVEGF165 體外轉(zhuǎn)染對hBMSCs 成骨誘導(dǎo)分化的影響。 方 法 構(gòu)建hBMP-2 和hVEGF165 真核共表達(dá)載體。取健康成人自愿捐獻(xiàn)的骨髓分離培養(yǎng)hBMSCs,采用陽離子脂質(zhì)體將構(gòu)建的質(zhì)粒pIRES-hBMP-2-hVEGF165、pIRES-hBMP-2、pIRES-hVEGF165 和空質(zhì)粒載體(pIRES-neo)轉(zhuǎn)染至hBMSCs,作為A、B、C、D 組;另取相同數(shù)量的未轉(zhuǎn)染細(xì)胞作為對照組(E 組)。培養(yǎng)4 周,采用RT-PCR 檢測hBMP-2、hVEGF165 以及骨鈣mRNA 表達(dá),Western blot 檢測細(xì)胞 hBMP-2 和 hVEGF165 表達(dá),定量檢測ALP 活性,免疫組織化學(xué)方法檢測Col Ⅰ表達(dá)。 結(jié) 果 與E 組比較,A 組hBMSCs 高表達(dá)hBMP-2、hVEGF165、Col Ⅰ及骨鈣素,B 組大量表達(dá)骨鈣素及Col Ⅰ,C組高表達(dá)hVEGF165,而B 組hVEGF165 及C 組hBMP-2 和Col Ⅰ的表達(dá)與D、E 組相似,呈陰性或僅有痕量表達(dá)。A、B、C、D 及E 組ALP 活性分別為0.91 ± 0.03、0.90 ± 0.02、0.64 ± 0.03、0.67 ± 0.01、0.66 ± 0.02,A、B 組與E 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05),C、D、E 組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。 結(jié)論 重組質(zhì)粒通過陽離子脂質(zhì)體能成功轉(zhuǎn)染hBMSCs,外源性hBMP-2 和 hVEGF165 基因在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中能持續(xù)表達(dá),并能增強(qiáng)hBMSCs 的成骨能力。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:08 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 腺病毒介導(dǎo)的生長分化因子5 基因?qū)BMSCs 成骨分化的影響

    目的 利用重組腺病毒載體將生長分化因子5(growth and differentiation factor 5,GDF-5)基因?qū)雋BMSCs,研究GDF-5 基因的表達(dá)和對hBMSCs 成骨分化的影響。 方法 將重組腺病毒GDF-5(adenovirus GDF-5,Ad-GDF-5) [ 含綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)標(biāo)記] 和空載腺病毒Ad-GFP 進(jìn)行擴(kuò)增并測定滴度,并以不同滴度兩種病毒感染第3 代hBMSCs,干預(yù)后2 d 熒光顯微鏡下觀察GFP 表達(dá)情況,RT-PCR 檢測GDF-5 在hBMSCs中的表達(dá)。取第3 代貼壁hBMSCs 隨機(jī)分為4 組:實(shí)驗(yàn)組(GDF-5 基因轉(zhuǎn)染組)、成骨誘導(dǎo)組、空載組和對照組。于干預(yù)后不同時間行倒置相差顯微鏡觀察、熒光顯微鏡觀察、熒光定量RT-PCR、免疫熒光染色和von Kossa 染色檢測細(xì)胞分化情況。 結(jié)果 Ad-GDF-5 滴度為1.0 × 109 pfu/mL,Ad-GFP 滴度為1.2 × 109 pfu/mL。Ad-GDF-5 及Ad-GFP 均能對hBMSCs 有效感染,并使其表達(dá)目的基因和GFP 基因。干預(yù)后1 ~ 7 d 實(shí)驗(yàn)組和成骨誘導(dǎo)組hBMSCs 細(xì)胞形態(tài)及生長方式向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化,而對照組和空載組hBMSCs 仍保持原有形態(tài)及生長方式。熒光定量RT-PCR 檢測示,干預(yù)后4 d 實(shí)驗(yàn)組GDF-5 基因表達(dá)明顯高于其余各組(P lt; 0.05);實(shí)驗(yàn)組和成骨誘導(dǎo)組ALP、Col Ⅰ、骨鈣素基因表達(dá)均高于空載組和對照組(P lt; 0.05),成骨誘導(dǎo)組Col Ⅰ基因表達(dá)高于實(shí)驗(yàn)組(P lt; 0.05)。干預(yù)后4 d,免疫熒光染色示成骨誘導(dǎo)組和實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞表達(dá)并分泌Col Ⅰ,空載組和對照組細(xì)胞未見Col Ⅰ表達(dá)。干預(yù)后10 d,成骨誘導(dǎo)組和實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞von Kossa 染色為陽性,對照組和空載組為陰性。 結(jié)論 GDF-5 基因可通過腺病毒載體導(dǎo)入hBMSCs 穩(wěn)定表達(dá),并促使其成骨分化,為進(jìn)一步研究這種轉(zhuǎn)基因hBMSCs 修復(fù)骨組織奠定了基礎(chǔ)。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:07 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 全骨髓培養(yǎng)法和密度梯度離心法分離hBMSCs 的比較研究

    目的 比較全骨髓培養(yǎng)法和密度梯度離心法對hBMSCs 的分離效果。 方法 取健康成年人自愿捐贈的骨髓,分別采用全骨髓培養(yǎng)法和密度梯度離心法分離、培養(yǎng)hBMSCs 并進(jìn)行傳代。采用倒置相差顯微鏡觀察原代細(xì)胞形態(tài)變化;取第2 代細(xì)胞培養(yǎng)7 d 后行HE 染色;對比原代及第2、3 代細(xì)胞傳代時間;流式細(xì)胞儀檢測表面標(biāo)志物;并檢測細(xì)胞經(jīng)成骨誘導(dǎo)后3、6、9 d 的ALP 含量,于第9 天采用Kaplow 法染色觀察細(xì)胞ALP 染色情況。 結(jié)果 全骨髓培養(yǎng)法分離的原代細(xì)胞呈聚集樣生長,而密度梯度離心法分離的原代細(xì)胞呈單個、散在生長。HE 染色示兩種方法分離培養(yǎng)的第2 代細(xì)胞輪廓清晰,大小及形態(tài)均勻一致。全骨髓培養(yǎng)法原代細(xì)胞的傳代時間(15.36 ± 1.67) d;明顯快于密度梯度離心法的(18.57 ± 1.05)d,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.01);第2、3 代細(xì)胞的傳代時間兩種分離方法差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測,兩種方法培養(yǎng)的hBMSCs 上陽性表面標(biāo)志物CD29、CD44、CD71、CD105、CD166 含量和陰性表面標(biāo)志物CD34 含量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05),陰性表面標(biāo)志物CD14、CD45 含量差異 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.01)。兩種方法分離的第2 代細(xì)胞經(jīng)成骨誘導(dǎo)后各時間點(diǎn)ALP 含量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05);成骨誘導(dǎo)后第9 天ALP 染色程度基本一致。 結(jié)論 全骨髓培養(yǎng)法可分離出hBMSCs,其分離效果與密度梯度離心法相似。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:08 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • hBMSCs 誘導(dǎo)分化類髓核細(xì)胞

    目的 探討人椎間盤細(xì)胞和關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的分子表型差異,分析hBMSCs 經(jīng)TGF-β3 和BMP-7 聯(lián)合誘導(dǎo)后能否分化為軟骨細(xì)胞和髓核細(xì)胞。 方法 取9 例自愿捐贈者髂嵴骨髓20 ~ 40 mL 分離培養(yǎng)hBMSCs。取第4 代hBMSCs 行三維微球培養(yǎng)。根據(jù)基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入的生長因子不同,實(shí)驗(yàn)分成 4 組,分別為加入10 ng/mL TGF-β3 組(A 組)、200 ng/mL BMP-7 組(B 組)、同時加入兩種生長因子組(C 組)以及空白對照組(D 組)。于培養(yǎng)后21 d,行組織學(xué)及免疫組織化學(xué)觀察;于培養(yǎng)后4、21 d 進(jìn)行PCR 檢測Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型膠原、蛋白多糖和SOX9 基因的表達(dá)。 結(jié)果 培養(yǎng)后21 d,HE 染色示A 組和C 組細(xì)胞呈軟骨細(xì)胞樣形態(tài)特征,甲苯胺藍(lán)染色及免疫組織化學(xué)染色Ⅱ型膠原表達(dá)呈陽性。B 組和D 組細(xì)胞形態(tài)無明顯改變,PCR 檢測示培養(yǎng)后21 d,A、C 組SOX9、蛋白多糖、Ⅰ型膠原及Ⅱ型膠原表達(dá)較4 d 時明顯增加(P lt; 0.05)。B、D 組Ⅰ型膠原表達(dá)較4 d 時明顯增加(P lt; 0.05),SOX9、蛋白多糖及Ⅱ型膠原較4 d 時無明顯變化(P gt;0.05)。其中僅A組Ⅹ型膠原表達(dá)呈陽性。 結(jié)論 TGF-β3 和BMP-7 聯(lián)合應(yīng)用能促進(jìn)hBMSCs 分化更接近于椎間盤細(xì)胞,可能為椎間盤組織工程提供種子細(xì)胞。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:19 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • BMSCs 向心肌分化的基因表達(dá)譜分析

    目的 分析hBMSCs 經(jīng)5- 氮雜胞苷(5-azacytidine,5-aza)誘導(dǎo)向心肌樣細(xì)胞分化過程中基因表達(dá)譜的改變。 方法 取胸外科非血液病患者手術(shù)中廢棄的肋骨骨髓分離培養(yǎng)hBMSCs,5-aza 誘導(dǎo)第2 代hBMSCs。取誘導(dǎo)前及誘導(dǎo)后的細(xì)胞,免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測α-actin、肌鈣蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和連接蛋白43(connexin 43)表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測cTnT 陽性細(xì)胞百分率;利用人表達(dá)譜基因芯片技術(shù)篩選分化過程中的差異表達(dá)基因,對部分基因進(jìn)行功能分類和分層聚類分析。 結(jié)果 hBMSCs 經(jīng)5-aza 誘導(dǎo)后,部分呈肌細(xì)胞樣形態(tài)。免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測示誘導(dǎo)前細(xì)胞α-actin、cTnT 染色呈弱陽性,connexin 43 染色呈陰性;誘導(dǎo)后3 周細(xì)胞α-actin、cTnT、connexin 43 染色均呈陽性。流式細(xì)胞儀檢測示誘導(dǎo)前cTnT 陽性細(xì)胞百分率為7.43% ± 0.02%,誘導(dǎo)后3 周為49.64% ± 0.05%。分化過程中共檢測到1 814 個顯著差異表達(dá)基因,對其中647 個基因分層聚類,聚為5 類,生物功能包括信號傳導(dǎo)、細(xì)胞代謝、增殖分化、發(fā)育以及形態(tài)發(fā)生等。 結(jié)論 hBMSCs 經(jīng)5-aza 誘導(dǎo)向心肌樣細(xì)胞分化過程受信號傳導(dǎo)通路、轉(zhuǎn)錄基因、生長因子等多種因素在不同時間點(diǎn)上的共同調(diào)控。

    發(fā)表時間:2016-08-31 04:23 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
  • 誘導(dǎo)hBMSCs 成骨分化中微小RNA 和靶基因表達(dá)水平的變化

    目的 明確萎縮性骨不連組織中表達(dá)上調(diào)的數(shù)種微小RNA(micro RNA,miRNA)與其相應(yīng)靶基因mRNA、蛋白在hBMSCs 成骨分化過程中的表達(dá)變化趨勢和生物學(xué)功能。 方法 取自體髂骨植骨手術(shù)患者的髂骨骨髓血,采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)hBMSCs。取第4 代hBMSCs 以成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)成骨分化,分別提取0、12 h,1、2、4、7、14 d 時的細(xì)胞總RNA 和蛋白,進(jìn)行miRNA 的實(shí)時定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)、相應(yīng)靶基因mRNA 的qRT-PCR 和蛋白Western blot 檢測。 結(jié)果 誘導(dǎo)hBMSCs 成骨分化時,成骨性靶基因堿性磷酸酶(alkaline phosphatase liver/bone/kidney,ALPL)、PDGF-α 多肽(PDGF-α polypeptide,PDGF-A)和BMP-2 的mRNA 和蛋白表達(dá)在多數(shù)時間點(diǎn)同對照(0 h)相比增加(BMP-2 在12 h 和1 d 時下降),1 ~ 7 d 變化最為顯著。不同時間點(diǎn)的miRNA、靶基因mRNA 和蛋白表達(dá)水平存在差異,其中hsa-miRNA-149 和hsa-miRNA-654-5p miRNA 含量的變化趨勢與各自靶基因ALPL 和BMP-2 的mRNA 及蛋白表達(dá)水平總體上成負(fù)相關(guān)(P lt; 0.05),hsa-miRNA-221 與其靶基因PDGF-A 的變化趨勢無明顯負(fù)相關(guān)關(guān)系(P gt; 0.05)。 結(jié)論 誘導(dǎo)hBMSCs 成骨分化過程中,hsa-miRNA-149 和hsa-miRNA-654-5p 對其相應(yīng)靶基因ALPL 和BMP-2 的mRNA 及蛋白存在密切調(diào)控關(guān)系。

    發(fā)表時間:2016-08-31 04:23 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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