目的 應(yīng)用細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)1/2抑制劑U0126研究ERK1/2在肝癌細(xì)胞增殖、凋亡中的作用。方法 以肝癌SMMC-7721細(xì)胞株為材料，分為空白對照組及不同濃度的U0126處理組。以MTT檢測細(xì)胞增殖情況，流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 不同濃度的U0126處理后均可明顯抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖（P＜0.05，P＜0.01）,使處于G0/G1期的細(xì)胞明顯增多（P＜0.05）且呈劑量依賴性，并誘發(fā)細(xì)胞凋亡發(fā)生（P＜0.05）。 結(jié)論 阻斷ERK1/2通路有可能成為肝癌治療的重要手段。
目的 探討多效生長因子（pleiotrophin，PTN）mRNA及其蛋白在結(jié)直腸癌組織中的表達及其臨床意義。方法 采用原位雜交和免疫組化染色方法，檢測結(jié)直腸癌組織和正常結(jié)直腸組織中PTN mRNA及其蛋白的表達，并分析其與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 結(jié)直腸癌組PTN mRNA及其蛋白的表達陽性率分別為63.9%（53/83）和60.2%（50/83），均高于（P=0.008，P=0.002）正常對照組的40.7%（22/54）和33.3%（18/54）。結(jié)直腸癌組織中PTN mRNA及其蛋白的表達與腫瘤分化程度和TNM分期均有關(guān)（P＜0.05），Ⅲ～Ⅳ期者和低分化者的表達陽性率均較高；而與年齡、性別及腫瘤類型均無關(guān)（P＞0.05）。結(jié)論 PTN mRNA及其蛋白在結(jié)直腸癌組織中高表達，其可能參與了結(jié)直腸癌的浸潤和轉(zhuǎn)移。PTN可作為預(yù)測結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移和預(yù)后的指標(biāo)之一。
目的 探討同一組術(shù)者行腹腔鏡輔助直腸癌根治術(shù)的學(xué)習(xí)曲線，總結(jié)腹腔鏡輔助直腸癌手術(shù)經(jīng)驗。 方法 回顧性分析2010年 1 月至2015年12月期間筆者所在醫(yī)院科室同一組術(shù)者連續(xù)開展的119例腹腔鏡輔助直腸癌根治術(shù)患者的臨床資料，對于每一例患者的手術(shù)時間，采用加權(quán)移動平均法、累及分析法（cumulative sum analysis，CUSUM）、風(fēng)險調(diào)整累及分析法（risk-adjusted CUSUM，RA-CUSUM）以及曲線擬合軟件Matlab分析學(xué)習(xí)曲線；再通過比較學(xué)習(xí)曲線中每一階段患者的手術(shù)時間、術(shù)中出血量、淋巴結(jié)檢出個數(shù)、遠(yuǎn)端切緣距腫瘤下緣距離、并發(fā)癥發(fā)生情況、術(shù)后住院時間以及術(shù)后首次進流食時間來驗證近期療效，總結(jié)腹腔鏡輔助直腸癌的手術(shù)經(jīng)驗。 結(jié)果 該組醫(yī)師行腹腔鏡輔助直腸癌手術(shù)學(xué)習(xí)曲線分為 3 個階段及 2 個時間截點，第 1 個截點是在完成手術(shù)第36例左右，第 2 個截點在完成手術(shù)第80例左右。 3個階段患者的一般資料比較其差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），但比較 3 個階段患者的手術(shù)時間、術(shù)中出血量、淋巴結(jié)檢出個數(shù)、遠(yuǎn)端切緣距腫瘤下緣距離、并發(fā)癥發(fā)生情況和術(shù)后住院時間，其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），以第 3 階段最優(yōu)，第 2 階段次之，第 1 階段最差。 結(jié)論 腹腔鏡輔助直腸癌根治術(shù)學(xué)習(xí)曲線可分為初步探索期、掌握期和熟練期；有豐富開腹直腸癌手術(shù)經(jīng)驗的該組固定手術(shù)團隊腹腔鏡輔助直腸癌手術(shù)達到掌握程度完成第 1 階段需要36例左右，達到熟練程度完成第 2 階段需80例左右，且在學(xué)習(xí)曲線不同階段所完成手術(shù)的近期療效有差異。
目的 探討抑癌基因Ras相關(guān)區(qū)域家族1A （RASSF1A）基因在結(jié)腸癌組織以及相應(yīng)正常結(jié)腸組織中的表達并分析其表達與結(jié)腸癌臨床病理因素之間的關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)SP法和Western blot法檢測34例結(jié)腸癌手術(shù)標(biāo)本和相應(yīng)的正常結(jié)腸組織中RASSF1A蛋白的表達水平，應(yīng)用RT-PCR法檢測RASSF1AmRNA在結(jié)腸癌和正常結(jié)腸組織中的表達情況。結(jié)果 ①免疫組織化學(xué)法結(jié)果：結(jié)腸癌組織中RASSF1A蛋白表達陽性率明顯低于其在正常結(jié)腸組織中的表達陽性率 〔35.3% （12/34）比97.1% （33/34），P＜0.05〕。結(jié)腸癌組織中RASSF1A蛋白的表達與腫瘤分化程度和TNM分期均有關(guān)（P＜0.05），即高、中分化及TNM分期較低（Ⅰ＋Ⅱ期）者的RASSF1A蛋白表達陽性率較高（P＜0.05）。②Western blot法結(jié)果：在34例結(jié)腸癌患者中RASSF1A蛋白表達水平明顯低于其在相應(yīng)的正常結(jié)腸組織中的表達水平 〔0.316 8±0.019 6比0.914 4±0.177 6，P＜0.05〕；該結(jié)果與RT-PCR法檢測到的RASSF1A mRNA表達情況基本一致 〔0.158 9±0.223 7和0.572 3±0.193 9，P＜0.05〕。結(jié)論 RASSF1A基因的失表達可能在原發(fā)性結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，檢測RASSF1A的表達情況可為結(jié)腸癌的早期診斷提供幫助。
目的探討人5拷貝低氧反應(yīng)元件（5HRE）聯(lián)合癌胚抗原啟動子（CEAp）調(diào)控元件的靶向性及調(diào)控RAS相關(guān)區(qū)域家族1A（RASSF1A）抑癌基因的慢病毒載體對SGC7901胃癌細(xì)胞的抑制作用。 方法①分別采用實時定量RT-PCR（qRT-PCR）、免疫組織化學(xué)SP染色及Western blot法檢測SGC7901、MKN28和MCF-10A細(xì)胞株中癌胚抗原（CEA）mRNA及其蛋白，以及RASSF1A蛋白的表達水平，以確定實驗細(xì)胞和陰性對照細(xì)胞。②構(gòu)建pGL4.20-5HRE-CEAp-Luc載體以轉(zhuǎn)染SGC7901、MKN28和MCF-10A細(xì)胞株，將各細(xì)胞株分為2組，分別加入（缺氧組）或不加入CoCl2（常氧組），比較各細(xì)胞株中缺氧組和常氧組細(xì)胞的啟動活性。③將重組慢病毒載體（pLV-5HRE-CEAp-RASSF1A）及相應(yīng)空病毒載體包裝成病毒顆粒LV-5HC-RASSF1A（感染組）和LV-NC（陰性對照組），感染SGC7901細(xì)胞。以未感染任何病毒的SGC7901細(xì)胞作為空白對照組，將該3組細(xì)胞再分為2個亞組，分別加入（缺氧組）或不加入CoCl2（常氧組），比較缺氧組和常氧組細(xì)胞中RASSF1A蛋白的表達水平和細(xì)胞增殖抑制率。 結(jié)果①qRT-PCR結(jié)果顯示：SGC7901細(xì)胞株中CEA mRNA的表達水平高于MKN28及MCF-10A細(xì)胞株（P＜0.05）；免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：CEA的表達水平在SGC7901、MKN28及MCF-10A細(xì)胞株中依次遞減，兩兩比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；Western blot結(jié)果顯示：在SGC7901及MKN28細(xì)胞株中未檢測到RASSF1A蛋白的電泳條帶，而在MCF-10A細(xì)胞株中可檢測到。據(jù)此確定SGC7901細(xì)胞株為實驗細(xì)胞，MKN28細(xì)胞株為陰性對照細(xì)胞。②轉(zhuǎn)染pGL4.20-5HRE-CEAp-Luc載體后，在SGC7901及MKN28細(xì)胞株中，同種細(xì)胞株內(nèi)與常氧組比較，缺氧組細(xì)胞的活性倍數(shù)均升高（P＜0.01）；而在MCF-10A細(xì)胞株中，常氧組和缺氧組細(xì)胞的活性倍數(shù)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。在不加入CoCl2條件和加入CoCl2條件下，同等條件下與SGC7901細(xì)胞株比較，MKN28及MCF-10A細(xì)胞株的活性倍數(shù)均較低（P＜0.05）；與MKN28細(xì)胞株比較，MCF-10A細(xì)胞株的活性倍數(shù)較低（P＜0.05）。③細(xì)胞感染病毒后的Western blot檢測結(jié)果顯示：在SGC7901細(xì)胞，空白對照組及陰性對照組細(xì)胞在常氧和缺氧條件下其RASSF1A蛋白均呈弱表達，差異不明顯；感染組細(xì)胞在常氧條件下RASSF1A蛋白呈弱表達，而在缺氧條件下RASSF1A蛋白的表達水平明顯增加。在MKN28細(xì)胞，空白對照組、陰性對照組及感染組細(xì)胞在常氧及缺氧條件下均未見電泳條帶。細(xì)胞活性檢測實驗結(jié)果顯示：在SGC7901細(xì)胞，與感染-缺氧組比較，其余5組細(xì)胞的生長抑制率均較低（P＜0.05）；在MKN28細(xì)胞，與空白對照-常氧組和空白對照-缺氧組細(xì)胞比較，其余4組細(xì)胞的生長抑制率均較高（P＜0.05），但該4組細(xì)胞間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 結(jié)論5HRECEAp調(diào)控元件具有低氧誘導(dǎo)及靶向CEA轉(zhuǎn)錄陽性胃癌細(xì)胞的雙調(diào)控能力；RASSF1A慢病毒載體（pLV-5HRECEAp-RASSF1A）在低氧誘導(dǎo)下具有抑制SGC7901胃癌細(xì)胞株增殖的能力。