目的探討細(xì)胞骨架重塑對(duì)體外大鼠跟腱來(lái)源肌腱干細(xì)胞（tendon stem cells,TSCs）成脂分化的影響。 方法取3周齡雄性SD大鼠跟腱組織，采用酶消化法分離、培養(yǎng)TSCs，取第3代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。將細(xì)胞分別以細(xì)胞松弛素D（cytochalasin D,CYD）終濃度為0、50、100、500、1 000 ng/mL的含15%FBS的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞存活及形態(tài)變化，纖維肌動(dòng)蛋白（fibros actin,F-actin）染色觀察細(xì)胞骨架，Western blot檢測(cè)F-actin/球狀肌動(dòng)蛋白（globular actin,G-actin）比值，根據(jù)結(jié)果選擇CYD有效使用濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。取TSCs分別采用成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基（誘導(dǎo)組）、含CYD的成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基（CYD+誘導(dǎo)組）以及普通培養(yǎng)基（普通組）、含CYD的普通培養(yǎng)基（CYD+普通組）培養(yǎng)3、7 d，收集各組細(xì)胞行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)成脂分化相關(guān)特異標(biāo)志性基因表達(dá)，包括過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ）、脂蛋白酯酶（1ipoprotein lipase,LPL）、脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2)，Western blot檢測(cè)PPARγ、aP2蛋白表達(dá)。 結(jié)果CYD濃度為100 ng/mL時(shí)既能有效干擾TSCs細(xì)胞骨架F-actin的聚合，又不影響TSCs的存活，選擇該濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western blot檢測(cè)示，3、7 d時(shí)CYD+誘導(dǎo)組PPARγ、LPL和aP2基因及PPARγ、aP2蛋白表達(dá)均顯著高于誘導(dǎo)組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。3、7 d時(shí)CYD+普通組PPARγ、LPL和aP2基因表達(dá)也顯著高于普通組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論細(xì)胞骨架重塑是TSCs成脂分化的一個(gè)先決條件，抑制F-actin聚合可促進(jìn)TSCs的成脂分化，對(duì)肌腱病的發(fā)病機(jī)制研究具有重要意義。
目的探討自體腘繩肌腱聯(lián)合（足母）長(zhǎng)屈肌腱轉(zhuǎn)移重建跟腱的臨床療效。 方法2009年2月－2011年10月，采用自體腘繩肌腱聯(lián)合（足母）長(zhǎng)屈肌腱轉(zhuǎn)移重建9例9足跟腱缺損。男6例，女3例；年齡21～65歲，平均43歲。其中運(yùn)動(dòng)傷導(dǎo)致陳舊性跟腱斷裂伴缺損5例；跟腱病變切除后跟腱缺損4例，其中跟腱纖維玻璃樣變伴壞死2例、跟腱巨細(xì)胞瘤1例、跟腱慢性炎癥伴玻璃樣變1例。病程31～387 d，平均137.6 d。跟腱缺損長(zhǎng)度為5～18 cm，平均8.6 cm。術(shù)后踝關(guān)節(jié)石膏固定6周后開始功能鍛煉。 結(jié)果術(shù)后2例發(fā)生切口裂開、滲液，1例出現(xiàn)脛神經(jīng)損傷導(dǎo)致的足底疼痛；余患者切口均Ⅰ期愈合，無(wú)相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生。9例患者均獲隨訪，隨訪時(shí)間13～25個(gè)月，平均19.7個(gè)月。隨訪期間均無(wú)重建肌腱斷裂發(fā)生。術(shù)后1年及末次隨訪時(shí)踝關(guān)節(jié)背伸活動(dòng)度與術(shù)前比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），踝關(guān)節(jié)跖屈活動(dòng)度均顯著大于術(shù)前（P lt; 0.05）。術(shù)后1年及末次隨訪時(shí)踝關(guān)節(jié)跖屈、背伸活動(dòng)度均顯著大于術(shù)后3個(gè)月（P lt; 0.05），末次隨訪時(shí)與術(shù)后1年比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）?；颊咝g(shù)后美國(guó)矯形足踝協(xié)會(huì)（AOFAS）及簡(jiǎn)明健康調(diào)查量表（SF-36量表）評(píng)分均較術(shù)前顯著提高，且末次隨訪時(shí)評(píng)分顯著高于術(shù)后3個(gè)月時(shí)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。末次隨訪時(shí)，跟腱修復(fù)術(shù)后臨床療效評(píng)分（ATRS）亦顯著高于3個(gè)月時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t= —7.982，P=0.000）。 結(jié)論自體腘繩肌腱聯(lián)合（足母）長(zhǎng)屈肌腱轉(zhuǎn)移重建跟腱療效確切。
目的 總結(jié)H型微型鈦板治療肱三頭肌腱止點(diǎn)斷裂的療效。 方法 2007年1月－2012年3月，應(yīng)用H型微型鈦板治療10例肱三頭肌腱止點(diǎn)斷裂傷患者。男7例，女3例；年齡20～57歲，平均38.5歲。致傷原因：交通事故傷3例，高處墜落傷3例，撞擊傷2例，運(yùn)動(dòng)傷2例。受傷至入院時(shí)間為3 h～2 d，平均11 h。開放損傷2例，閉合損傷8例。6例存在肱三頭肌腱止點(diǎn)鷹嘴處撕脫骨折。1例合并前臂尺、橈骨骨折。 結(jié)果術(shù)后切口均Ⅰ期愈合。10例均獲隨訪，隨訪時(shí)間9～18個(gè)月，平均14.5個(gè)月。術(shù)后3個(gè)月復(fù)查X線片示撕脫骨折愈合，彩色超聲多普勒檢查示肱三頭肌腱止點(diǎn)連續(xù)性良好，未見(jiàn)斷裂征。術(shù)后4個(gè)月伸肘肌力均達(dá)5 級(jí)；按 Mayo 肘關(guān)節(jié)功能評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為91～98 分；隨訪期間肘關(guān)節(jié)功能無(wú)丟失，未發(fā)生肌腱再斷裂、骨化性肌炎、關(guān)節(jié)僵硬等現(xiàn)象。 結(jié)論H型微型鈦板治療肱三頭肌腱止點(diǎn)斷裂傷具有操作簡(jiǎn)便、固定牢靠、并發(fā)癥少，以及肘關(guān)節(jié)功能恢復(fù)好等優(yōu)點(diǎn)。
目的探討B(tài)MP-2體外誘導(dǎo)人跟腱來(lái)源肌腱干細(xì)胞（human Achilles tendon-derived stem cells，hATDSCs）成軟骨分化的作用。 方法無(wú)菌條件下取急性跟腱斷裂患者自愿捐贈(zèng)的跟腱組織，膠原酶消化獲得有核細(xì)胞；以500個(gè)/cm2細(xì)胞密度接種，細(xì)胞貼壁呈克隆樣生長(zhǎng)，混合培養(yǎng)獲得原代hATDSCs；體外傳代培養(yǎng)至第3代，流式細(xì)胞儀檢測(cè)hATDSCs免疫表型；油紅O染色、茜素紅染色及番紅O/快綠染色分別鑒定hATDSCs成脂、成骨及成軟骨分化能力。取第3代細(xì)胞體外三維培養(yǎng)成微球后分為兩組，實(shí)驗(yàn)組用重組人BMP-2（recombinant human BMP-2，rhBMP-2）干預(yù)，對(duì)照組不進(jìn)行干預(yù)。3周后行微球大體觀察；組織學(xué)切片行HE染色、番紅O/快綠染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色觀察；實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)成軟骨特異性基因SOX9、Ⅱ型膠原和軟骨聚集蛋白多糖（Aggrecan）表達(dá)。 結(jié)果原代hATDSCs體外培養(yǎng)呈克隆樣集落生長(zhǎng)；傳代后以紡錘形、成纖維樣細(xì)胞生長(zhǎng)，形態(tài)均一。hATDSCs陽(yáng)性表達(dá)MSCs特異性表面標(biāo)志CD44、CD90、CD105，陰性表達(dá)CD34、 CD45和CD146。多向分化潛能鑒定示hATDSCs成脂誘導(dǎo)3周油紅O染色陽(yáng)性，成骨誘導(dǎo)4周茜素紅染色陽(yáng)性，成軟骨誘導(dǎo)3周番紅O/快綠染色陽(yáng)性。rhBMP-2誘導(dǎo)hATDSCs 3周，實(shí)驗(yàn)組微球形成，體積顯著大于對(duì)照組；HE染色、番紅O/快綠染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色均呈陽(yáng)性，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)示SOX9、Ⅱ型膠原和Aggrecan mRNA表達(dá)顯著高于對(duì)照組（P lt; 0.05）。 結(jié)論體外BMP-2可促進(jìn)hATDSCs成軟骨分化和蛋白聚糖合成增加，為研究慢性腱病組織病理學(xué)變化提供細(xì)胞生物學(xué)依據(jù)。
目的 綜述Tenomodulin在肌腱組織工程中的研究現(xiàn)狀，展望其研究和應(yīng)用發(fā)展方向。 方法查閱近年關(guān)于Tenomodulin在肌腱組織工程中的相關(guān)研究文獻(xiàn)，并進(jìn)行分析總結(jié)。 結(jié)果Tenomodulin是一種Ⅱ型跨膜蛋白，具有調(diào)節(jié)肌腱組織發(fā)育作用，其C端具有抑制血管發(fā)生的活性作用。生物信息學(xué)特征分析Tenomodulin cDNA全長(zhǎng)1 360 bp，定位于染色體Xq22.1上。多種細(xì)胞因子對(duì)Tenomodulin的表達(dá)具有調(diào)控作用，其中與堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子Scleraxis關(guān)系最為密切；支架材料的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)等對(duì)種子細(xì)胞Tenomodulin的表達(dá)也具有調(diào)控作用；應(yīng)力負(fù)載和傳代培養(yǎng)對(duì)Tenomodulin的表達(dá)具有一定影響。 結(jié)論Tenomodulin作為肌腱相對(duì)特異性標(biāo)記分子，開發(fā)和利用其C端血管發(fā)生抑制作用，將在肌腱組織工程中具有重要應(yīng)用潛力和前景。
目的研究反復(fù)凍融結(jié)合核酸酶處理小牛肌腱脫細(xì)胞效果以及對(duì)肌腱組織形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生化成分和力學(xué)特性的影響。 方法取新鮮1日齡西門塔爾小牛跟腱48根，隨機(jī)分為3組（n=16）：A組為正常對(duì)照組，B組采用液氮冷凍/37℃復(fù)溫反復(fù)凍融5次，C組在反復(fù)凍融基礎(chǔ)上結(jié)合核酸酶處理24 h。每組取2根跟腱用于掃描電鏡觀察，3根用于、組織學(xué)及免疫組織化學(xué)染色觀察，3根用于DNA殘留量檢測(cè)，8根用于生物力學(xué)檢測(cè)。 結(jié)果掃描電鏡觀察示A、B組膠原纖維排列致密有序，形態(tài)完整，未見(jiàn)斷裂；C組膠原纖維排列松散，幾乎無(wú)斷裂。阿利新藍(lán)、天狼星紅染色及免疫組織化學(xué)染色示C組糖胺聚糖、Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、纖維連接蛋白大部分被保留；HE染色和DAPI染色示A、B組膠原纖維間可見(jiàn)較多完整的細(xì)胞核，而C組膠原纖維之間未見(jiàn)完整細(xì)胞核，但腱內(nèi)膜上仍有部分細(xì)胞核殘留。A、B、C組的DNA殘留量分別為（0.24 ± 0.12）、（0.16 ± 0.07）、（0.05 ± 0.02）μg/mg，C組顯著低于A、B組（P lt; 0.05）；A、B組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 生物力學(xué)檢測(cè)顯示，A、B、C組間拉伸強(qiáng)度、斷裂應(yīng)變、剛度和彈性模量差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論反復(fù)凍融結(jié)合核酸酶處理小牛肌腱，可有效去除細(xì)胞成分，同時(shí)基本保留肌腱原始膠原纖維結(jié)構(gòu)、形態(tài)、大部分細(xì)胞外基質(zhì)成分和力學(xué)特性。
目的對(duì)細(xì)胞-支架復(fù)合物構(gòu)建組織工程肌腱的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。 方法查閱近年來(lái)肌腱組織工程中細(xì)胞-支架復(fù)合物的相關(guān)文獻(xiàn)，并進(jìn)行綜述，從支架材料、種子細(xì)胞、培養(yǎng)方法和應(yīng)用方面闡述細(xì)胞-支架復(fù)合物的研究概況。 結(jié)果肌腱組織工程主要通過(guò)對(duì)支架材料進(jìn)行修飾，并復(fù)合合適的種子細(xì)胞構(gòu)建細(xì)胞-支架復(fù)合物。對(duì)于復(fù)合材料中細(xì)胞的培養(yǎng)有多種方法，尤其是力學(xué)刺激的應(yīng)用，能有效促進(jìn)細(xì)胞功能發(fā)揮。多種肌腱缺損動(dòng)物模型研究表明，采用細(xì)胞-支架復(fù)合物有良好的修復(fù)效果。 結(jié)論細(xì)胞-支架復(fù)合物構(gòu)建組織工程肌腱是目前的研究熱點(diǎn)，雖還未達(dá)到臨床使用要求，但已顯示了廣闊的應(yīng)用前景。
目的探討人羊膜修復(fù)雞足趾腱鞘缺損后防止肌腱粘連的可行性和有效性。 方法取行剖腹產(chǎn)術(shù)產(chǎn)婦自愿捐贈(zèng)的胎盤，制備大小為1.5 cm × 1.0 cm的羊膜片。3～6月齡健康雄性來(lái)亨雞40只，體重（1.86 ± 0.04）kg，取雙足第3趾制備肌腱、腱鞘損傷模型。“8”字縫合修復(fù)肌腱后，右足采用羊膜片修復(fù)缺損腱鞘（A組），左足缺損腱鞘不作處理（B組）。術(shù)后1、2、4、6周各取10只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行大體及組織學(xué)觀察，并按照Tang等肌腱粘連大體觀察分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)，生物力學(xué)試驗(yàn)測(cè)定肌腱滑移度及總屈趾角度。 結(jié)果術(shù)后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)完成，切口均愈合良好。隨術(shù)后時(shí)間延長(zhǎng)，大體及組織學(xué)觀察顯示兩組均有假鞘（新生腱鞘）形成，但A組假鞘較B組成熟、光滑。術(shù)后1、6周A組肌腱粘連分級(jí)均明顯優(yōu)于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。生物力學(xué)試驗(yàn)測(cè)定示，術(shù)后1、2周兩組肌腱滑移度比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），4、6周時(shí)A組肌腱滑移度均較B組長(zhǎng)（P lt; 0.05）。術(shù)后1、2、4、6周A組總屈趾角度均小于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論采用人羊膜修復(fù)雞腱鞘缺損能有效預(yù)防肌腱粘連，利于肌腱滑動(dòng)功能的恢復(fù)。
目的 總結(jié)關(guān)節(jié)鏡下治療肩袖鈣化性肌腱炎的近期療效。 方法2007年7月－2011年6月，采用關(guān)節(jié)鏡下徹底清除鈣化灶治療20例肩袖鈣化性肌腱炎患者。男6例，女14例；年齡38～62歲，平均48.2歲。肩關(guān)節(jié)疼痛3～12個(gè)月，平均6.8個(gè)月；肩關(guān)節(jié)功能均嚴(yán)重受限。鈣化灶位于肩袖表面6例，岡上肌腱內(nèi)8例，岡上、岡下肌腱交界處4例，岡下肌腱內(nèi)2例。 結(jié)果術(shù)后患者切口均Ⅰ期愈合，無(wú)手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥發(fā)生?；颊呔@隨訪，隨訪時(shí)間6～24 個(gè)月，平均16個(gè)月。術(shù)后6個(gè)月復(fù)查X線片示鈣化灶均消失。術(shù)后患者運(yùn)動(dòng)或靜息時(shí)關(guān)節(jié)疼痛均較術(shù)前顯著改善，術(shù)后1、4周及6個(gè)月時(shí)關(guān)節(jié)疼痛評(píng)分、關(guān)節(jié)活動(dòng)度評(píng)分以及關(guān)節(jié)功能評(píng)分與術(shù)前比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論關(guān)節(jié)鏡下治療肩袖鈣化性肌腱炎可徹底清除鈣化灶，恢復(fù)肩關(guān)節(jié)活動(dòng)度，緩解關(guān)節(jié)疼痛，近期療效較好。
目的探討掌長(zhǎng)肌腱轉(zhuǎn)移重建伸肌腱終腱止點(diǎn)治療陳舊性錘狀指畸形的療效。 方法2009年2月－2011年2月，采用掌長(zhǎng)肌腱轉(zhuǎn)移重建伸肌腱終腱止點(diǎn)治療32例陳舊性錘狀指畸形患者。男28例，女4例；年齡22～58歲，平均32.5歲。致傷原因：運(yùn)動(dòng)傷26例，戳傷6例。損傷指別：示指8例，中指3例，環(huán)指16例，小指5例。按Rockwell等分型標(biāo)準(zhǔn)均為Ⅰ型。受傷至手術(shù)時(shí)間為4～16周，平均6周。 結(jié)果術(shù)后切口均Ⅰ期愈合，無(wú)皮膚壞死、感染及甲床損傷等并發(fā)癥發(fā)生。32例均獲隨訪，隨訪時(shí)間12～20個(gè)月，平均14個(gè)月。指腹側(cè)均無(wú)疼痛及感覺(jué)異常。末次隨訪時(shí)，根據(jù)Patel等錘狀指療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定：優(yōu)8例，良21例，中2例，差1例，優(yōu)良率為90.6%。 結(jié)論采用掌長(zhǎng)肌腱轉(zhuǎn)移重建伸肌腱終腱止點(diǎn)是治療陳舊性錘狀指畸形的一種有效方法。