目的 觀察正常Sprague-Dawley（SD）和遺傳性視網(wǎng)膜變性Royal College of Surgeons (RCS)大鼠視網(wǎng)膜發(fā)育過程中睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)及其受體(CNTFR)的表達(dá)水平與分布特點(diǎn)。 方法 新生至成年(12個(gè)月齡) SD和RCS大鼠視網(wǎng)膜石蠟切片，免疫組織化學(xué)染色顯示睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子及其受體表達(dá)水平和分布變化。 結(jié)果 出生后0～7 d,SD大鼠神經(jīng)視網(wǎng)膜全層染色呈陽性，隨著周齡增加，節(jié)細(xì)胞染色明顯增強(qiáng)，而其他細(xì)胞染色減弱，至28 d時(shí)節(jié)細(xì)胞染色達(dá)高峰，并持續(xù)至老年；RCS大鼠視網(wǎng)膜CNTF免疫組織化學(xué)染色結(jié)果與SD大鼠基本相同。出生后0～3 d, SD大鼠神經(jīng)視網(wǎng)膜全層CNTFR的表達(dá)呈弱陽性，節(jié)細(xì)胞染色稍深，在將來要發(fā)育成外節(jié)處可見斷續(xù)陽性染色；隨著周齡增加，光感受器外節(jié)處陽性染色逐漸增強(qiáng)，14～28 d染色達(dá)到高峰；56 d時(shí)外節(jié)染色減弱，而節(jié)細(xì)胞染色卻明顯增強(qiáng)，直至老年。3～14 d RCS大鼠視網(wǎng)膜CNTFR染色基本與同齡SD大鼠一致，但21 d起外節(jié)染色明顯減弱，28 d時(shí)外節(jié)染色基本呈陰性，但節(jié)細(xì)胞仍呈強(qiáng)陽性，一直持續(xù)到老年。 結(jié)論 CNTF的表達(dá)在正常和變性大鼠間無明顯差異；CNTFR主要在節(jié)細(xì)胞和光感受器外節(jié)處高水平表達(dá)，正常和變性RCS大鼠間存在顯著差異，為利用CNTF治療視網(wǎng)膜變性提供了實(shí)驗(yàn)證據(jù)。 (中華眼底病雜志, 2006, 22: 120-123)
目的 觀察逆轉(zhuǎn)錄病毒及睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)誘導(dǎo)的成人視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）細(xì)胞轉(zhuǎn)分化過程中的形態(tài)特征與標(biāo)志物變化。 方法 成人RPE細(xì)胞經(jīng)攜帶綠色熒光蛋白(GFP)基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染后，進(jìn)一步用脂質(zhì)體介導(dǎo)CNTF 表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)染.倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、免疫組織化學(xué)染色及Western blotting方法檢測細(xì)胞產(chǎn)生和分泌CNTF的能力、CNTF受體(CNTFR)、多種神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志物及信號傳導(dǎo)分子一類蛋白酪氨酸激酶（JAK）的表達(dá)水平。 結(jié)果 體外培養(yǎng)的成人RPE細(xì)胞經(jīng)GFP逆轉(zhuǎn)錄病毒感染后，RPE細(xì)胞的形態(tài)無明顯變化，但開始表達(dá)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的某些標(biāo)志物，如神經(jīng)絲蛋白(NF)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)；經(jīng)CNTF表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后，持續(xù)高水平表達(dá)CNTF的RPE細(xì)胞出現(xiàn)明顯的神經(jīng)細(xì)胞分化,CNTFR的表達(dá)量雖無明顯變化，但其分布發(fā)生改變，主要分布在細(xì)胞膜上; 此外，信號傳導(dǎo)分子JAK表達(dá)明顯上調(diào)。 結(jié)論 體外培養(yǎng)的成人RPE細(xì)胞在逆轉(zhuǎn)錄病毒及CNTF的影響下可出現(xiàn)明顯的神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)分化，轉(zhuǎn)分化與CNTF-CNTFR-JAK信號傳導(dǎo)通路有關(guān)。 (中華眼底病雜志，2006，22：400-403）
目的 觀察電穿孔介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)因子及血管生成抑制因子轉(zhuǎn)移治療脈絡(luò)膜黑色素瘤（CM）的效果。方法 采用編碼小鼠免疫調(diào)節(jié)因子白介素（IL）2、IL12、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF）可溶性受體（sFLK-1）、反義血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（antiVEGF121）及血管生成素1可溶性受體（ExTek）的真核表達(dá)質(zhì)粒pNGVL-mIL2、pNGVL-mIL12、pCI-sFLK-1、pCR3.1-antiVEGF121、pCI-ExTek分別轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞和人CM。采用酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）、蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測mIL2、mIL12、sFLK-1、VEGF和ExTek因子在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的表達(dá)。建立裸小鼠腫瘤模型并隨機(jī)分為4組，分別將體積30 mu;l的0.9%NaCl、pNGVL、antiVEGF121+sFLK1+ExTek、mIL2+mIL12注射入腫瘤內(nèi)。采用高電壓短脈沖方式進(jìn)行電擊。治療后7、14、21、28、35、42 d測量各組裸小鼠腫瘤體積，計(jì)算抑瘤率。結(jié)果 ELISA及Western blot檢測顯示，mIL2、mIL12、sFLK1和ExTek因子均能在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中有效表達(dá)；而VEGF在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中表達(dá)明顯受抑制。電穿孔基因治療后，mIL2+mIL12組腫瘤幾乎完全消失，抑瘤率為97.33%；antiVEGF121+sFLK-1+ExTek組及pNGVL組腫瘤持續(xù)長大，抑瘤率分別為53.33%和36.33%。結(jié)論 電穿孔介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)因子轉(zhuǎn)移可有效抑制CM生長；介導(dǎo)血管生成抑制因子轉(zhuǎn)移不能抑制CM生長。