目的 建立2型糖尿病大鼠后肢缺血模型并進(jìn)行評(píng)價(jià)，為后續(xù)的干預(yù)實(shí)驗(yàn)提供研究平臺(tái)。方法 將15只SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、糖尿病組及糖尿病后肢缺血組，每組5只。糖尿病組及糖尿病后肢缺血組的10只大鼠均給予高脂飲食喂養(yǎng)4周后，腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ，40 mg/kg）以建立2型糖尿病模型。糖尿病后肢缺血組大鼠建模成功后行雙側(cè)髂總動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)以建立后肢缺血模型，正常對(duì)照組和糖尿病組大鼠僅分離髂總動(dòng)脈，不予結(jié)扎。2周后對(duì)3組大鼠股動(dòng)脈的起始段行彩色多普勒超聲檢查，以檢測(cè)股動(dòng)脈的血流峰值速度和血流加速時(shí)間；取缺血部位的小腿三頭肌及大腿股四頭肌組織，分別行HE染色及免疫組化SP染色，以觀(guān)察3組大鼠肌細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)狀況及血管再生情況。結(jié)果 后肢缺血模型建模2周后，正常對(duì)照組、糖尿病組和糖尿病后肢缺血組大鼠的血流峰值速度分別為（22.49±3.02） cm/s、（17.36±2.60） cm/s和（11.23±1.26） cm/s，血流加速時(shí)間分別為（0.080±0.009） s、（0.120±0.009） s和（0.160±0.020） s，糖尿病后肢缺血組大鼠的股動(dòng)脈血流峰值速度小于正常對(duì)照組和糖尿病組（P＜0.05），而血流加速時(shí)間較長(zhǎng)（P＜0.05）。HE染色結(jié)果顯示：糖尿病后肢缺血組大鼠小腿三頭肌的結(jié)構(gòu)破壞，有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，肌肉損傷程度重于正常對(duì)照組和糖尿病組。免疫組化SP染色結(jié)果顯示：糖尿病后肢缺血組大鼠大腿股四頭肌的毛細(xì)血管密度〔（1.40±0.55） 個(gè)/HPF〕小于正常對(duì)照組 〔（6.80±0.84） 個(gè)/HPF〕及糖尿病組〔（4.60±0.55）個(gè)/HPF〕，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 對(duì)SD大鼠給予高脂飲食聯(lián)合小劑量STZ注射可以成功誘導(dǎo)2型糖尿病模型，在此模型基礎(chǔ)上結(jié)扎髂總動(dòng)脈可以成功制備糖尿病后肢缺血模型。
目的 探討生肌玉紅膠原在缺血組織中促進(jìn)血管新生的作用效果及其作用機(jī)理。方法 Wistar大鼠48只按隨機(jī)配對(duì)方法隨機(jī)均分為空白組、對(duì)照組（膠原）及實(shí)驗(yàn)組（生肌玉紅膠原）3組；在大鼠后肢缺血模型基礎(chǔ)上于大鼠右后肢缺血組織中植入不同的膠原制劑，分別于模型制作術(shù)后3，7、14及28d取埋植的膠原制劑標(biāo)本及標(biāo)本周?chē)s0.5cm 范圍的缺血肌肉組織。通過(guò)激光散斑成像系統(tǒng)觀(guān)察大鼠右后肢缺血模型制作術(shù)后各時(shí)點(diǎn)的血流灌注情況，采用光度計(jì)法測(cè)定膠原制劑（生肌玉紅膠原）內(nèi)的血紅蛋白含量，采用免疫組化染色方法檢測(cè)標(biāo)本周?chē)庋拷M織中的微血管計(jì)數(shù)，采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR 方法檢測(cè)缺血肌肉組織中各時(shí)點(diǎn)低氧誘導(dǎo)因子（HIF）-1αmRNA以及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF） mRNA的表達(dá)。結(jié)果 大鼠右后肢缺血模型制作成功即刻大鼠患肢呈現(xiàn)明顯的缺血狀態(tài)，其血流灌注值明顯低于術(shù)前（P ＜0.01）；在術(shù)后3d卻呈明顯的充血狀態(tài)，其血流灌注值明顯升高，且略高于術(shù)前水平，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）；在術(shù)后7～14d大鼠患肢的血流灌注值呈逐漸下降趨勢(shì)，至術(shù)后28d又開(kāi)始回升， 該3個(gè)時(shí)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組大鼠患肢的血流灌注值均高于空白組（P ＜0.05）， 對(duì)照組與空白組比較其差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）；術(shù)后7及14d實(shí)驗(yàn)組大鼠肢體的血流灌注值高于對(duì)照組（P ＜0.05）。各時(shí)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組膠原標(biāo)本內(nèi)血紅蛋白含量均高于對(duì)照組 （P ＜0.01）。實(shí)驗(yàn)組微血管計(jì)數(shù)于術(shù)后7及14d高于對(duì)照組（P ＜0.05）； 實(shí)驗(yàn)組術(shù)后各時(shí)點(diǎn)HIF-1α mRNA及VEGF mRNA的表達(dá)水平均高于對(duì)照組和空白組（P ＜0.05），而對(duì)照組與空白組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。結(jié)論 生肌玉紅膠原通過(guò)誘導(dǎo)HIF-1α mRNA及VEGF mRNA血管新生相關(guān)基因的表達(dá)而改善缺血組織的血流灌注，促進(jìn)微血管新生，從而達(dá)到促進(jìn)組織修復(fù)的功效。