目的 評價HAP 涂層鎳鈦記憶合金的組織相容性，為其在骨缺損修復(fù)的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方 法 取24 只青紫蘭兔，體重2.0 ～ 2.5 kg，隨機分為實驗組和對照組，每組12 只。行左側(cè)股外側(cè)切口，分離顯露股骨后，選取股骨下1/3 處手術(shù)鉆孔作為種植區(qū)，實驗組植入HAP 涂層鎳鈦記憶合金，對照組不植入材料。大腿后外側(cè)肌肉覆蓋缺損區(qū)。分別于術(shù)后7、14、28、56 d 每組各處死3 只動物，取材行大體觀察、組織學(xué)觀察、BMP-2 免疫組織化學(xué)染色觀察及圖像灰度值分析，組織學(xué)觀察結(jié)果按照中華人民共和國國家標準GB/T16886.6-1997 從炎癥、纖維組織囊壁形成、材料降解及周邊組織反應(yīng)4 個方面進行組織學(xué)評價。 結(jié)果 所有兔均存活至取材，兩組植入物完全包埋于骨組織內(nèi)部，無松動，無明顯骨吸收現(xiàn)象。材料植入后7 d，兩組炎性細胞浸潤和纖維增生最明顯，纖維組織囊壁形成，植入材料呈大片狀被囊壁包裹；術(shù)后56 d，實驗組部分標本囊壁結(jié)締組織增生反應(yīng)仍較明顯，劣于對照組，但分級符合GB/T16886.6-1997 體內(nèi)植入標準。免疫組織化學(xué)染色示內(nèi)源性BMP-2 定位于多能MSCs、成骨細胞的胞質(zhì)內(nèi)；兩組圖像分析結(jié)果顯示，BMP-2隨骨缺損的修復(fù)過程呈階段性分泌，兩組BMP-2 在術(shù)后14 d 時表達最高，以后逐漸降低。BMP-2 在各時間點染色灰度值比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 HAP 涂層鎳鈦記憶合金作為生物醫(yī)學(xué)材料具有良好的骨組織相容性。
【摘 要】 目的 評價HA 復(fù)合rhBMP-2 的腺病毒（adenovirus mediated rhBMP-2，Adv-rhBMP-2）轉(zhuǎn)染的羊BMSCs 對骨痂延長骨愈合的影響。 方法 成年山羊19 只，雌雄不限，體重15 ～ 20 kg。于每只羊髂嵴上穿刺抽取骨髓10 mL，常規(guī)傳代培養(yǎng)BMSCs。取第3 代BMSCs，以感染復(fù)數(shù)200 轉(zhuǎn)染腺病毒。取0.25% 胰蛋白酶消化轉(zhuǎn)染后3 d 的細胞1 ×108 個，與HA 充分混勻制備Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA。建立山羊右側(cè)脛骨延長模型，術(shù)后立即于截骨部位注射自體細胞復(fù)合物。按術(shù)后注入物質(zhì)不同隨機分成4 組：A 組為Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA 組（n=6），B 組為Adv-rhBMP-2/BMSCs 組（n=5），C 組為Adv-β-gal/BMSCs/HA 組（n=4），D 組為空白組（n=4）。術(shù)后第7 天開始行脛骨延長，速度1 mm/d，共延長4 周。術(shù)后5、8、12 周攝X 線片觀察骨痂生長情況，12 周處死動物，取標本分別行骨密度檢測、生物力學(xué)測定、組織學(xué)觀察和骨形態(tài)計量學(xué)分析。 結(jié)果 X 線片檢查示，術(shù)后5、8 周A、B 組骨痂生成量明顯多于C、D 組，X 線片定量評分A、B 組明顯高于C、D 組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）；12 周各組均在骨延長部位形成連續(xù)骨痂。骨密度測定：術(shù)后12 周A、B、C、D 組延長部位骨礦物質(zhì)含量分別為（4.175 ± 1.921）、（2.600 ± 0.638）、（2.425 ± 0.826）和（1.175 ± 0.574） g，骨礦物質(zhì)密度分別為（0.612 ± 0.196）、（0.630 ± 0.159）、（0.450 ± 0.166）和（0.266 ± 0.113）g/cm2，A、B 組顯著高于C、D組（P lt; 0.05）。生物力學(xué)測定：A、B、C、D 組最大載荷分別為（490.20 ± 155.08）、（350.59 ± 80.48）、（221.95 ± 68.79）和（150.65 ± 92.29）N，彈性模量為（178.24 ± 105.80）、（105.88 ± 27.09）、（81.18 ± 48.67）和（50.35 ± 47.64）MPa，各指標A組顯著高于C、D 組（P lt; 0.05）。組織學(xué)觀察見A 組骨延長處大量新生骨組織，骨小梁多為縱行網(wǎng)狀排列。骨形態(tài)計量分析示A、B、C、D 組新骨體積分別為72.35% ± 5.68%、67.58% ± 7.42%、49.63% ± 4.87% 和38.87% ± 2.35%，A 組新生骨生成量明顯比D 組多（P lt; 0.05）。 結(jié)論 HA 復(fù)合rhBMP-2 修飾的BMSCs 制備的組織工程骨可促進羊脛骨延長骨愈合。
目的 探討雙層殼聚糖（chitosan，CS）/HAP 復(fù)合支架作為骨軟骨組織工程支架的可行性，并結(jié)合兔自體BMSCs 修復(fù)骨軟骨缺損。 方法 采用凍干法和燒結(jié)法制作雙層CS/HAP 復(fù)合支架，檢測其理化特性。取日本大耳白兔骨髓4 ～ 6 mL，全骨髓培養(yǎng)法分離純化BMSCs，并鑒定。調(diào)整第2 代BMSCs 細胞密度為2 × 107 個/mL，應(yīng)用纖維蛋白膠種植技術(shù)，接種至雙層CS/ HAP 復(fù)合支架，體外構(gòu)建細胞- 支架復(fù)合物。取36 只日本大耳白兔，于右側(cè)膝關(guān)節(jié)股骨下端外側(cè)髁負重區(qū)，作一直徑4 mm、深3 mm 的圓柱形缺損，制備兔膝關(guān)節(jié)骨軟骨缺損模型。根據(jù)缺損區(qū)植入物的不同，分為A、B、C 3 組（n=12）。A 組：植入細胞- 支架復(fù)合物；B 組：植入雙層CS/HAP 復(fù)合支架；C 組：不植入任何材料，作為空白對照組。術(shù)后6、12 周取材，行大體及組織學(xué)觀察，采用改良Wakitani 法評分。 結(jié)果 雙層CS/HAP 支架CS 層孔隙率為76.00% ± 5.01%，孔徑為200 ～ 400 μm，平均300 μm，孔洞相通；HAP 層孔隙率為72.00% ± 4.23%，孔徑為200 ～ 500 μm，平均350 μm，孔洞相通，結(jié)合部結(jié)合好。全骨髓法培養(yǎng)BMSCs，第7 天可見集落形成，14 d 傳代；免疫組織化學(xué)檢測示CD44（+）和CD45（—）。大體觀察和組織學(xué)檢測顯示，A 組基本修復(fù)軟骨缺損，骨缺損修復(fù)不良，有骨小梁長入；B、C 組骨、軟骨缺損修復(fù)不良，組織學(xué)檢測以纖維組織或無新生組織形成，軟骨及骨缺損均明顯存在。術(shù)后6、12 周，A 組改良Wakitani 評分分別為（5.17 ± 1.17）分和（3.20 ± 0.75）分，均優(yōu)于B、C 組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 雙層CS/ HAP 復(fù)合支架可作為骨軟骨組織工程支架，復(fù)合BMSCs 可修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨與骨缺損，重建關(guān)節(jié)解剖結(jié)構(gòu)
目的評估機器學(xué)習(xí)算法在心臟瓣膜病心房顫動患者心臟血栓形成的預(yù)測和表征中的應(yīng)用。方法本研究從四川大學(xué)華西醫(yī)院及其分院收集2016—2021年心臟瓣膜病伴心房顫動患者的臨床數(shù)據(jù)，從2 515例接受瓣膜手術(shù)的患者中篩選出886例瓣膜病伴心房顫動患者納入研究，其中男545例（61.5%）、女341例（38.5%），平均年齡（55.62±9.26）歲，192例患者術(shù)中證實有心臟血栓形成。采用5種監(jiān)督機器學(xué)習(xí)算法來預(yù)測患者的血栓形成?；诨颊叩呐R床數(shù)據(jù)（特征篩選后的33個特征），采用10折嵌套交叉驗證方法，通過曲線下面積、F1分數(shù)以及馬修斯相關(guān)系數(shù)等評價指標對模型的預(yù)測效果進行評價。最后，使用SHAP解釋方法來解釋模型，并以患者為例分析模型的特征。結(jié)果隨機森林模型各項綜合評估指標最佳，受試者工作特征曲線下面積為0.748±0.043，準確率79.2%。對模型的解釋和分析表明，每搏輸出量、二尖瓣E波峰值流速和三尖瓣壓力梯度等是影響預(yù)測的重要因素。結(jié)論隨機森林模型實現(xiàn)了最好的預(yù)測性能，有望被臨床醫(yī)生用作一種輔助決策工具，用于篩查患有瓣膜病心房顫動的高栓塞風(fēng)險患者。
目的 建立預(yù)測重癥慢性阻塞性肺疾病（簡稱慢阻肺）患者死亡風(fēng)險的機器學(xué)習(xí)模型，探討與慢阻肺患者死亡風(fēng)險相關(guān)的因素，并加以解釋，解決機器學(xué)習(xí)模型的“黑箱”問題。方法 選取美國多中心急診重癥監(jiān)護?。╡mergency intensive care unit，eICU）數(shù)據(jù)庫中的8 088例重癥慢阻肺患者為研究對象，提取每次入住重癥監(jiān)護病房的前24 h內(nèi)的數(shù)據(jù)并隨機分組，70%用于模型訓(xùn)練，30%用于模型驗證。采用LASSO回歸進行預(yù)測變量選擇，避免過擬合。采用5種機器學(xué)習(xí)模型對患者的住院病死率進行預(yù)測。通過曲線下面積（area under curve，AUC）比較5種模型和APACHE Ⅳa評分的預(yù)測性能，并采用SHAP（SHapley Additive exPlanations）方法解釋隨機森林（random forest，RF）模型的預(yù)測結(jié)果。結(jié)果 RF模型在5種機器學(xué)習(xí)模型和APACHE Ⅳa評分系統(tǒng)中表現(xiàn)出最佳的性能，AUC達到0.830（95%置信區(qū)間0.806～0.855）。通過SHAP方法檢測最重要的10種預(yù)測變量，其中無創(chuàng)收縮壓的最小值被認為是最重要的預(yù)測變量。結(jié)論 通過機器學(xué)習(xí)識別危險因素，并使用SHAP方法解釋預(yù)測結(jié)果，可早期預(yù)測患者的死亡風(fēng)險，有助于臨床醫(yī)生制定準確的治療計劃，合理分配醫(yī)療資源。
目的 系統(tǒng)評價來曲唑+促性腺激素釋放激素拮抗劑方案對體外受精-胚胎移植（IVF-ET）中低反應(yīng)患者促排卵的有效性。方法 計算機檢索VIP、CNKI、PubMed、EMbase和FMJS，收集有關(guān)來曲唑+拮抗劑方案對體外受精-胚胎移植低反應(yīng)患者促排卵有效性的隨機對照試驗或臨床對照試驗。由2位評價員根據(jù)納入與排除標準獨立進行文獻篩選、資料提取和質(zhì)量評價后，采用RevMan 5.0軟件進行Meta分析。結(jié)果 最終納入6個研究，共977例患者。Meta分析結(jié)果顯示：對體外受精-胚胎移植中低反應(yīng)患者，來曲唑+拮抗劑方案與對照組相比，Gn用量［MD= –8.05，95%CI（–13.67，–2.43），P=0.005］、HCG日E2值［MD= –1 026.41，95%CI（–1 949.61，–103.20），P=0.03］均小于對照組；而兩組獲卵數(shù)［MD= –0.61，95%CI（–2.41，–1.19），P=0.51］和臨床妊娠率［OR=1.03，95%CI（0.53，2.02），P=0.92］無明顯差異。結(jié)論 對IVF-ET低反應(yīng)患者促排卵治療的有效性而言，來曲唑+拮抗劑方案較對照組臨床結(jié)局無明顯改善，但能減少Gn用量，降低IVF治療費用。來曲唑+拮抗劑方案為卵巢低反應(yīng)患者提供了另一種臨床選擇。由于納入文獻存在質(zhì)量和數(shù)量不足以及方法學(xué)差異，建議本研究結(jié)論僅作為臨床分析的參考，尚需后效評價和不斷更新。
目的 制備并評價羧甲基殼聚糖-HA- 聚乙烯醇[carboxymethyl-chitosan/HA/ poly（vinyl alcohol），CHP] 共混膜片的理化性質(zhì)、眼內(nèi)生物相容性，探討其用于青光眼濾過手術(shù)的可行性。 方法 取羧甲基殼聚糖、HA、聚乙烯醇按 5 ∶ 4 ∶ 1（M/M）共混交聯(lián)，用流延法制備CHP 共混膜片。測定膜片吸水率、溶脹比、通透性及力學(xué)性能。取新西蘭白兔結(jié)膜下組織，分離培養(yǎng)兔眼結(jié)膜下成纖維細胞，取第4 代細胞以5 × 103 個/mL 密度接種于貼附CHP 共混膜片（實驗組）及不加膜片（對照組）的細胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)，于培養(yǎng)24、48、72 h 取細胞行MTT 檢測。將6 只新西蘭白兔隨機分為2 組（n=3），將CHP 共混膜片及SK 膠分別植入兔眼前房及結(jié)膜下，作為實驗組及對照組。術(shù)后第1、3、5、9、11、20、30、45、60 天進行裂隙燈觀察，記錄雙眼反應(yīng)，第15 天實驗組取角膜組織行掃描電鏡觀察，以研究共混膜片生物相容性和降解性。 結(jié)果 CHP 共混膜片吸水率為83.8% ± 1.3%，溶脹比為3.59 ± 0.50，干、濕態(tài)時抗張強度分別為（20.59 ± 1.73）、（0.51 ± 0.13）MPa，斷裂伸長率分別為10.69% ± 1.16%、53.15% ± 2.46%。CHP 共混膜片對 NaCl、L- 酪氨酸均有良好的通透性。接種后24、48、72 h 實驗組吸光度（A）值分別為 0.207 ± 0.083、0.174 ± 0.080、0.181 ± 0.048，對照組分別為0.284 ± 0.011、0.272 ± 0.083、0.307 ± 0.056，組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。術(shù)后第1 天實驗組前房植入共混膜片周圍有少量絮狀物滲出；第3 天滲出物吸收；第11 天無明顯炎性反應(yīng)；第60 天植入共混膜已大部分降解。術(shù)后15 d，掃描電鏡觀察示角膜內(nèi)皮細胞六邊形形態(tài)完整，表面無降解顆粒附著。對照組因SK 膠質(zhì)地軟，易斷裂，未能成功植入至前房。術(shù)后第1 天實驗組結(jié)膜植入處結(jié)膜局部有輕度充血，第9 天恢復(fù)正常，至第60 天無角膜水腫、前房炎性反應(yīng)。對照組觀察結(jié)果與實驗組相似。 結(jié)論 CHP 共混膜片具有較好的理化性質(zhì)及眼內(nèi)生物相容性，在青光眼濾過手術(shù)中具有潛在應(yīng)用價 值。
將成骨細胞與生物活性陶瓷復(fù)合培養(yǎng)，賦于材料以“生命”活性，可能會產(chǎn)生一種新型人工材料。為研究成骨細胞與生物活性陶瓷間的關(guān)系，選用新西蘭大白兔，取脛骨外骨膜組織，經(jīng)胰蛋白酶及膠原酶分步消化，分離出成骨細胞，用ＲＰＭＩ－１６４０培養(yǎng)液傳代培養(yǎng)１３代。通過對培養(yǎng)細胞堿性磷酸酶活性、體外礦化能力測定以及細胞超微結(jié)構(gòu)觀察，證實其為典型的成骨細胞。將培養(yǎng)細胞分別在三種生物活性陶瓷，包括生物活性玻璃陶瓷（ＢＧＣ）、羥基磷灰石（ＨＡ）和雙相羥基磷灰石（ＨＡ／ＴＣＰ）中培養(yǎng)４８小時后，利用掃描電鏡，３Ｈ－ＴｄＲ，ＸＲＤ，ＲＳ和ＥＤＸＡ等進行綜合評價。結(jié)果表明：ＨＡ／ＴＣＰ上培養(yǎng)成骨細胞較另兩種生物材料上顯示出更好的類成骨細胞形態(tài)和更高的細胞分化率。對成骨細胞與生物活性陶瓷反應(yīng)的機制進行了討論，并分析了影響細胞生長的材料因素，其結(jié)果為深入研究有生命的材料提供了依據(jù)。
目的:探討老年人自發(fā)性氣胸的臨床特點、治療及預(yù)后。方法:對本院在2005年11月至2008年4月間收治的79例老年人自發(fā)性氣胸患者臨床資料進行回顧性分析。結(jié)果:老年人自發(fā)性氣胸大多有肺部基礎(chǔ)疾病,臨床表現(xiàn)缺乏特異性,本組誤診為慢性阻塞性肺病急性發(fā)作4例、左心衰2例、支氣管哮喘1例。氣胸類型: 張力性氣胸47例(72.1%),閉合性氣胸11例,交通性氣胸21例。采用以肋間閉式引流的為主的治療措施,效果好。結(jié)論:老年人自發(fā)性氣胸大多有肺部基礎(chǔ)疾病, 易誤診,氣胸的類型以張力性氣胸多見,治療多需排氣減壓術(shù),及早的排氣減壓可望緩解癥狀,縮短肺復(fù)張時間,減少患者住院天數(shù), 降低死亡率,提高老年人生活質(zhì)量。
根據(jù)甲型H1N1流感病毒美國加利福尼亞毒株基因序列(A/California/07/2009(H1N1)),全基因合成甲型流感病毒血凝素(HA)編碼基因,利用輔助病毒依賴型腺病毒載體(HDAd)骨架質(zhì)粒pSC15B,構(gòu)建可表達HA基因的HDAd/HA DNA分子載體,以磷酸鈣法轉(zhuǎn)染293Cre4細胞,與輔助病毒H14連續(xù)共感染,獲得HDAd/HA載體,并大量制備和純化,進行形態(tài)觀察和體外感染的初步鑒定。透射電鏡下觀察HDAd/HA載體具有典型腺病毒形態(tài);與輔助病毒H14共感染293細胞,RT-PCR檢測HA基因有轉(zhuǎn)錄,顯示成功構(gòu)建HDAd/HA重組腺病毒載體,為甲型流感病毒體內(nèi)免疫效果和免疫保護作用的研究奠定實驗基礎(chǔ)。