華西醫(yī)學期刊出版社
關鍵詞
  • 標題
  • 作者
  • 關鍵詞
  • 摘要
高級搜索
高級搜索

搜索

找到 關鍵詞 包含"DNA酶" 1條結果
  • Egr-1 DNA酶抑制自體移植靜脈內膜增生的實驗研究

    目的探討早期生長反應基因-1(Egr-1)DNA酶(Egr-1 DNA enzyme,EDRz)對血管平滑肌細胞(VSMC)增殖和內膜增生的抑制作用,從而證實基因治療靜脈移植后狹窄、閉塞的可行性。方法構建EDRz,建立自體靜脈移植模型,將大鼠右頸總靜脈端-端吻合于腎下腹主動脈,EDRz轉染移植靜脈,分別于移植后1、2、6、24 h及3、7、14、28、42 d切取移植靜脈標本,每個時相按隨機數(shù)字表法隨機抽取10只大鼠。熒光顯微鏡下觀察EDRz轉染移植靜脈情況; 應用原位雜交和RT-PCR方法檢測Egr-1 mRNA的表達; 應用Western蛋白印跡和免疫組織化學方法檢測Egr-1蛋白表達情況; HE染色光鏡下觀察組織學形態(tài)。結果①EDRz轉染移植靜脈情況: 移植后1 h時,EDRz主要位于移植靜脈的外膜、中膜和部分內皮細胞; 2、6及24 h時,EDRz則主要位于移植靜脈的中膜; 7 d時,EDRz主要位于移植靜脈的內膜; 14、28及42 d時未檢測到EDRz的表達。②Egr-1 mRNA表達結果。RT-PCR檢測結果: 轉染EDRz后1 h時,Egr-1 mRNA表達出現(xiàn)高峰,2、6及24 h表達下降,3 d時表達微弱,移植后7、14、28及42 d未見Egr-1 mRNA的表達,轉染EDRz后1 h時Egr-1 mRNA表達明顯高于其余各時相(Plt;0.01)。原位雜交檢測Egr-1 mRNA表達的變化趨勢與RT-PCR結果基本一致。③Egr-1蛋白表達結果。Western蛋白印跡結果: 正常靜脈中未檢測到Egr-1蛋白陽性表達。轉染EDRz后2 h時,出現(xiàn)Egr-1蛋白陽性表達,6 h、24 h及3 d時其表達逐漸降低,移植后1 h時和移植后7、14、28及42 d時未見Egr-1蛋白陽性表達。移植后2 h時的Egr-1蛋白表達的吸光度值高于其他時相(Plt;0.01)。免疫組織化學方法檢測的Egr-1蛋白陽性表達的變化趨勢與Western蛋白印跡結果基本一致。④EDRz轉染移植靜脈與未轉染同期相比VSMC的增殖程度和內膜厚度明顯減輕。結論EDRz通過減少Egr-1在自體移植靜脈中的表達,可有效地抑制自體移植靜脈中VSMC增殖和內膜增生,可用來防治自體靜脈移植后所導致的血管狹窄、閉塞。

    發(fā)表時間:2016-09-08 10:45 導出 下載 收藏 掃碼
共1頁 上一頁 1 下一頁

Format

Content