目的 探討糖尿病(DM)鼠視網(wǎng)膜血管細胞間黏附分子-1(ICAM-1)在血視網(wǎng)膜屏障(BRB)破壞中的作用及玻璃體注射曲安奈德(TA)對BRB破壞的治療作用?！? 方法 60只Wistar鼠建立DM模型，分為對照組、DM 4個月組和DM 6個月組。每組各分為免疫組織化學組和BRB測定組，BRB測定組再分為未行TA治療組、TA治療1周組和2周組。大鼠玻璃體內(nèi)注射TA 5mu;l。視網(wǎng)膜鋪片免疫組織化學染色觀察視網(wǎng)膜ICAM-1的表達及形態(tài)學變化，圖像分析軟件測定內(nèi)皮細胞平均吸光度(A)［舊稱光密度（OD）］，定量ICAM-1表達。測定視網(wǎng)膜伊凡思藍(EB)含量，評價BRB的變化。 結果 免疫組織化學組:對照組視網(wǎng)膜血管無明顯ICAM-1陽性表達，同對照組相比，DM 4個月組陽性表達顯著增強(P＜0.001)，已出現(xiàn)毛細血管管徑粗細不一等形態(tài)學改變；DM 6個月組陽性表達進一步增強(P＜0.001)，形態(tài)學改變進一步加重，可出現(xiàn)無細胞性毛細血管。BRB測定組:各對照組間EB含量無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。未行TA治療組中，兩DM組EB含量明顯高于對照組(P＜0.001)，且DM 6個月組高于4個月組(P＜0.01)。TA治療組中，各DM組EB含量均顯著降低(P＜0.001)，但組間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，然而DM 4個月治療2周組已基本恢復正常(P＞0.05)，余治療組仍高于對照組(P＜0.05)。內(nèi)皮細胞 A 值與視網(wǎng)膜EB含量呈直線相關(r=－0.959)。 結論 糖尿病鼠視網(wǎng)膜ICAM-1的表達與BRB破壞呈正相關。玻璃體內(nèi)注射TA可有效減輕BRB破壞。 (中華眼底病雜志, 2006, 22: 24-27)
目的 探討可誘導的共刺激分子（ICOS）在實驗性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎(EAU)中的表達及意義。 方法 Lewis大鼠28只，用視網(wǎng)膜S抗原（50 mu;g）和福完全佐劑免疫24只大鼠以誘導EAU模型（免疫組），另外4只作為正常對照。裂隙燈顯微鏡每日觀察大鼠眼部變化。免疫組大鼠分別于免疫后第7、12、15、21天被處死，摘除其脾臟后制作冰凍連續(xù)切片并提取組織蛋白。使用多克隆抗ICOS抗體，用免疫組織化學細菌蛋白過氧化物酶（SP）法在上述組織切片上進行免疫組織化學染色，并對提取的蛋白進行Westernblotting檢測。對照組大鼠在相應各時間點做同樣處理。 結果 正常脾組織中可見少量ICOS陽性細胞；分別在免疫后第7、12 d，脾臟中ICOS陽性細胞數(shù)量明顯增加，免疫后第15天時陽性細胞數(shù)量最多，21 d時陽性細胞數(shù)量減少，但仍顯著高于正常組；Westernblotting檢測結果顯示，ICOS蛋白的動態(tài)變化與免疫組織化學顯示的陽性細胞數(shù)量變化一致。 結論 脾臟ICOS表達升高出現(xiàn)于EAU發(fā)生之前，隨炎癥的出現(xiàn)和加重而升高，在EAU消退期其表達有所降低，提示ICOS參與EAU的形成、發(fā)展和消退，在EAU發(fā)病中有重要意義。 (中華眼底病雜志,2005,21:114-117)
目的 觀察不同種系動物眼內(nèi)腔針對可溶性抗原刺激是否具有支持誘導免疫偏離的能力及其維持時間。 方法 使用牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)作為可溶性抗原，將其分別接種于不同動物(大鼠、兔和猴)的前房、玻璃體腔和視網(wǎng)膜下腔。皮下注射BSA和完全弗氏佐劑免疫動物。皮內(nèi)注射抗原觀察眼內(nèi)腔接種BSA動物的遲發(fā)型超敏反應(delayed-type hypersensitivity,DTH)。定時評估免疫偏離的維持時間。 結果 所有眼內(nèi)腔接種抗原的動物均顯示DTH陰性反應。不同部位抗原接種后免疫偏離的平均維持時間分別為：前房組：大鼠70天，兔90天，猴320天；玻璃體腔組：大鼠100天，兔１50天，猴360天；視網(wǎng)膜下腔組：大鼠50天，兔70天，猴300天。 結論 不同種系動物和不同眼內(nèi)腔免疫偏離的維持時間不同。生物進化與免疫系統(tǒng)的進化具有同步性。 (中華眼底病雜志, 1999, 15: 170-173)
目的 觀察1～16周糖尿病大鼠視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞(retinal vessel endothelial cells,RVECs)凋亡、增生特性的變化及p53和bcl-2的表達，探討糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)的發(fā)病機制。 方法 用四氧嘧啶造Wistar大鼠糖尿病模型。視網(wǎng)膜血管行碳素墨水灌注，作視網(wǎng)膜鋪片和切片、核苷酸末端轉移酶介導dUTP缺口翻譯法(TdT mediated dUTP mick end labelling method，TUNEL法）和抗生物素蛋白-生物素-過氧化物酶復合物法(avidin biotin peraxidase complex, ABC)染色，光鏡觀察。 結果 1～16周糖尿病大鼠RVECs未見凋亡。與對照組大鼠視網(wǎng)膜相比，血管形態(tài)和結構無明顯變化。第10～16周糖尿病大鼠RVECs呈增生細胞核抗原、5-溴-2-脫氧核苷尿嘧啶、p53和bcl-2免疫反應陽性，但未見內(nèi)皮細胞堆積和新生血管形成征象。對照組大鼠RVECs為陰性反應。 結論 1～16周糖尿病大鼠RVECs尚未發(fā)生凋亡和增生，但10周時已被激活進入細胞周期。p53和bcl-2的表達可能對穩(wěn)定早期糖尿病RVECs正常起重要作用。 (中華眼底病雜志, 1999, 15: 157-159)