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找到 關(guān)鍵詞 包含"骨形成蛋白2活性多肽" 1條結(jié)果
  • 骨形成蛋白2活性多肽體外定向誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨方向分化的劑量依賴性研究

    目的 探討自行合成的骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)活性多肽對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)體外定向誘導(dǎo)成骨的能力,評(píng)價(jià)BMP-2活性多肽的成骨誘導(dǎo)性及誘導(dǎo)成骨的劑量依賴性 方法取4周齡Wistar大鼠分離培養(yǎng)MSCs,傳至第3代時(shí)改用條件培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中分別加入濃度為300、200、100、50及0 μg/ml的BMP2活性多肽,并依次記為A、B、C、D和E組。細(xì)胞培養(yǎng)至5、10、15及20 d,檢測(cè)堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,測(cè)定鈣含量,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(fluorescent quantitative PCR,F(xiàn)QPCR)檢測(cè)Ⅰ型膠原、骨橋蛋白 (osteopontin,OPN) 及骨鈣素(osteocalcin,OCN) mRNA的表達(dá),檢測(cè)不同濃度BMP2活性多肽體外誘導(dǎo)成骨的能力。結(jié)果 倒置相差顯微鏡下觀察,用條件培養(yǎng)基培養(yǎng)3~4 d后,培養(yǎng)細(xì)胞由長(zhǎng)梭形轉(zhuǎn)變?yōu)槎趟笮位蚨嘟切巍kS條件培養(yǎng)基中BMP-2活性多肽濃度的增加,細(xì)胞發(fā)生成骨樣改變的時(shí)間提前。ALP活性和鈣含量檢測(cè)顯示,A組和B組較其他組增加明顯,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05),但A、B組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。FQ-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)不同濃度條件培養(yǎng)基培養(yǎng)14 d后,Ⅰ型膠原、OPN和OCN mRNA在各組均有表達(dá)。Ct值表明其表達(dá)量的大小順序?yàn)锳、B、C、D組,E組無(wú)表達(dá),A組和B組的Ct值明顯大于C組和D組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05),但A組和B組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。結(jié)論 BMP-2活性多肽能有效地促進(jìn)MSCs向成骨方向分化,其誘導(dǎo)作用存在劑量依賴關(guān)系,最佳誘導(dǎo)劑量為200 μg/ml。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:20 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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