摘要: 由于羊水干細(xì)胞(AFSC)具有高度增殖能力、來源容易 、免疫原性弱、致瘤性低、符合倫理學(xué)等獨(dú)特優(yōu)勢,并與其它干細(xì)胞一樣存在多向分化潛能,在細(xì)胞治療或組織工程研究中展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景,使其極有望成為心血管疾病再生醫(yī)學(xué)的理想種子細(xì)胞。羊水干細(xì)胞在心血管疾病中的研究尚處于起步階段,盡管許多研究結(jié)果令人振奮,但將其應(yīng)用于心血管疾病再生醫(yī)學(xué)中仍面臨許多挑戰(zhàn),在很多方面的研究亟需深入。我們總結(jié)了羊水干細(xì)胞的性質(zhì)、獲取羊水的時機(jī)對羊水干細(xì)胞的影響、分離純化及鑒定方法,重點(diǎn)綜述羊水干細(xì)胞向心血管細(xì)胞分化的潛能及在心臟組織工程中的應(yīng)用現(xiàn)狀和相關(guān)問題。
目的觀察鈣依賴性酪氨酸激酶2(Pyk2)在風(fēng)濕性心臟病患者中的表達(dá),與心肌纖維化指標(biāo)的關(guān)系及臨床意義。方法30例風(fēng)濕性心臟病患者心肌組織(實驗組)和6例正常心肌標(biāo)本(對照組)行Masson染色測定心肌藍(lán)色膠原灰度值,采用放射免疫法檢測血清透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)和Ⅳ型膠原(IV—C)含量,并通過免疫組織化學(xué)法和逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)法觀察Pyk2蛋白和信使核糖核酸(mRNA)的表達(dá),以及Pyk2表達(dá)與心肌纖維化指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果實驗組血清HA,LN和IV-C均較對照組高(174.95±76.14vg/K vs.70.06±15.63μg/L,153.86±20.72μg/L vs.90.01±14.11μg/L,95.26±7.66μg/L vs.63.21±10.62μg/L;P=0.003,0.013,0.035)。實驗組Pyk2蛋白吸光度和Pyk2 mRNA/磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)明顯高于對照組(0.325±0.032VS.0.106±0.013,0.870±0.085VS.0.573±0.042;P=0.048,0.006)。心肌Pyk2蛋白表達(dá)與心肌纖維化指標(biāo)HA、LN和IV—C含量呈明顯正相關(guān)(r=0.611,0.743,0.829,P〈0.01),心肌Pyk2 mRNA表達(dá)與LN,IV—C含量呈正相關(guān)(r=0.794,0.766,P〈0.05)。結(jié)論P(yáng)yk2可能通過增加風(fēng)濕性心臟病心肌膠原合成在風(fēng)濕性心臟病心肌間質(zhì)纖維化的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。
目的 研究肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)在心肺轉(zhuǎn)流術(shù)(CPB)中的變化及機(jī)制,并觀察己酮可可堿(PTX)對SP-A的保護(hù)作用。方法 改良原代培養(yǎng)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(AT-Ⅱ),將AT-Ⅱ與CPB中血清共同孵育,并設(shè)置PTX用藥組,觀察AT-Ⅱ的形態(tài)學(xué)改變及培養(yǎng)液中丙二醛(MDA)的變化,通過免疫組織化學(xué)、原位雜交方法檢測SP-A和SP-A信使核糖核酸(SP-A mRNA)的表達(dá)。結(jié)果 損傷實驗組AT-Ⅱ形態(tài)呈損傷性改變,培養(yǎng)液中丙二醛升高,細(xì)胞脫落率上升,成活率下降,SP-A表達(dá)在蛋白轉(zhuǎn)錄和翻譯水平均明顯降低,PTX組SP-A水平稍高。結(jié)論 CPB術(shù)后血清能直接損傷AT-Ⅱ并影響SP-A翻譯和轉(zhuǎn)錄,這可能是術(shù)后肺表面活性物質(zhì)質(zhì)和量異常的重要原因,PTX能有效阻止CPB術(shù)后血清對SP-A的抑制作用。