目的 觀察人工關(guān)節(jié)磨損產(chǎn)物 Co2+、Cr3+ 刺激下人單核細(xì)胞生物反應(yīng)過(guò)程中TNF-α 的表達(dá)，以及人單核細(xì)胞凋亡與Caspase-3 的變化，探討Co2+、Cr3+ 引發(fā)假體周圍骨溶解的作用機(jī)制。 方法 將CoCl2 粉末與CrCl3 粉末溶于無(wú)菌注射用水，分別配制成濃度為10 mg/L 和500 mg/L 的CoCl2 溶液和CrCl3 溶液。從健康志愿者外周血分離培養(yǎng)單核細(xì)胞，調(diào)整濃度為4 × 106 個(gè)/ 培養(yǎng)皿，根據(jù)培養(yǎng)液不同，分為3 組。A 組生理鹽水作為對(duì)照，B 組CoCl2 溶液，C 組CrCl3 溶液。于培養(yǎng)12、24 及48 h 后吸取細(xì)胞上清液，ELISA 法檢測(cè)TNF-α 含量，TUNEL 檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，比色法測(cè)定Caspase-3 活性。 結(jié)果 各時(shí)間點(diǎn)B、C 組TNF-α 含量及Caspase-3 活性均高于A 組（P lt; 0. 05），分別于24 h 及48 h達(dá)峰值。各時(shí)間點(diǎn)3 組均存在TUNEL 染色陽(yáng)性細(xì)胞，細(xì)胞核固縮深染，細(xì)胞體積皺縮，胞膜完整。各時(shí)間點(diǎn)B、C 組細(xì)胞凋亡率與A 組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。Caspase-3 活性與細(xì)胞凋亡率成正相關(guān)（r=0.765）。 結(jié)論 Co2+、Cr3+均能刺激人單核細(xì)胞釋放TNF-α 并誘導(dǎo)其凋亡；細(xì)胞凋亡參與了假體周圍骨溶解的病理過(guò)程，且可能與Casepase-3的激活有關(guān)。
目的 金屬磨損產(chǎn)物對(duì)人工關(guān)節(jié)的無(wú)菌性松動(dòng)有影響，通過(guò)觀察Co2+、Cr3+ 對(duì)小鼠成骨細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期以及在離子刺激下對(duì)成骨細(xì)胞分泌ALP 的影響，為防治人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體周圍骨溶解提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方 法 體外培養(yǎng)小鼠顱骨成骨細(xì)胞MC3T3-E1 至第3 ～ 5 代，調(diào)整細(xì)胞密度至5 × 105 個(gè)/mL，根據(jù)干預(yù)方法不同將細(xì)胞分為兩組。實(shí)驗(yàn)組：成骨細(xì)胞于含10%FBS 的α-MEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待細(xì)胞完全貼壁后，加入CoCl2 與CrCl3 混合溶液；對(duì)照組：成骨細(xì)胞于含10%FBS 的α-MEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng)。于培養(yǎng)12、24、48 h 后，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率及周期分布，ELISA 法檢測(cè)培養(yǎng)上清液中ALP 含量。 結(jié)果 培養(yǎng)12、24、48 h，實(shí)驗(yàn)組凋亡率分別為13.90% ± 0.52%、14.80% ± 0.41%、13.40% ± 0.26%，對(duì)照組分別為8.56% ± 0.31%、8.19% ± 0.24%、2.15% ± 0.11%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞G2M期分布比例明顯較對(duì)照組降低，G0G1 期分布比例較對(duì)照組增多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。培養(yǎng)12、24、48 h，實(shí)驗(yàn)組ALP 含量檢測(cè)吸光度（A）值分別為0.955 ± 0.052、0.624 ± 0.041、0.498 ± 0.026，對(duì)照組分別為1.664 ± 0.041、1.986 ± 0.024、2.192 ± 0.041，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 Co2+、Cr3+ 對(duì)成骨細(xì)胞的細(xì)胞周期分布有明顯影響，抑制其增殖，使細(xì)胞大部分處于G0G1 期，同時(shí)增加其凋亡率，抑制成骨細(xì)胞釋放ALP。