華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 關(guān)鍵詞 包含"血管黏附分子1" 1條結(jié)果
  • 降鈣素基因相關(guān)肽促進(jìn)大鼠BMSCs 遷移及VEGF 的表達(dá)

    目的 觀察外源性降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在大鼠BMSCs 遷移中的作用及對(duì)VEGF、血管黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)表達(dá)的影響,探討CGRP 通過BMSCs促進(jìn)血管生成的作用機(jī)制。 方法 全骨髓法分離、培養(yǎng)SD 大鼠BMSCs,采用Western blot 法于傳代培養(yǎng)1、2、3 周時(shí)檢測(cè)BMSCs 中CGRP 受體(CGRP receptor,CGRPR)蛋白的表達(dá)。使用濃度為1 × 10-8 mol/L 的CGRP 作用于BMSCs作為實(shí)驗(yàn)組,單純BMSCs 作為對(duì)照組,在培養(yǎng)72 h 時(shí)采用細(xì)胞趨化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CGRP 對(duì)BMSCs 遷移的影響;在培養(yǎng)1、3、5、7 d 采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)CGRP 作用后VCAM-1 mRNA 的表達(dá)變化,采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色、Western blot 法檢測(cè)CGRP 作用后VEGF 的表達(dá)變化。 結(jié)果 Western blot 檢測(cè)示BMSCs 穩(wěn)定表達(dá)CGRPR,2 周時(shí)表達(dá)最高。細(xì)胞趨化實(shí)驗(yàn)顯示,實(shí)驗(yàn)組CGRP 刺激后穿膜遷移細(xì)胞數(shù)(3.20 ± 1.77)個(gè)/HP,較對(duì)照組(1.11 ± 0.49)個(gè)/HP 明顯增多(t=4.230,P=0.001)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)示,實(shí)驗(yàn)組VCAM-1 mRNA 表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增加,7 d 時(shí)最高;實(shí)驗(yàn)組3、5、7 d的VCAM-1 mRNA 表達(dá)量與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。免疫細(xì)胞化學(xué)染色示,培養(yǎng)1、3 d 兩組均無陽性染色;培養(yǎng)5、7 d 實(shí)驗(yàn)組VEGF 染色呈陽性,對(duì)照組無陽性染色。Western blot 檢測(cè)示,培養(yǎng)1、3 d 兩組均未檢測(cè)到VEGF蛋白表達(dá);培養(yǎng)5、7 d 實(shí)驗(yàn)組VEGF 蛋白表達(dá)量均明顯高于對(duì)照組(P lt; 0.05);實(shí)驗(yàn)組5 d 的VEGF 蛋白表達(dá)量明顯高于7 d(P lt; 0.05)。 結(jié)論 CGRP 能促進(jìn)BMSCs 遷移及VEGF 表達(dá),這可能是CGRP 調(diào)節(jié)骨內(nèi)部血流變化而影響骨代謝的機(jī)制之一。

    發(fā)表時(shí)間:2016-08-31 05:42 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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