【摘 要】 目的 應(yīng)用不同來源的成肌細(xì)胞（myoblast，Mb）研究肌球蛋白輕鏈（myosin light chain，Myl）在肌肉再生中的作用，為進(jìn)一步了解Myl 的生理功能提供依據(jù)。 方法 3 周齡健康雄性C57BL/6 小鼠12 只。采用酶消化法和Preplate 技術(shù)分離純化小鼠眼外肌、膈肌和腓腸肌Mb（eMb、dMb 和gMb），進(jìn)行傳代培養(yǎng)。采用RT-PCR 和Western blot法檢測第1 代細(xì)胞Myl 的表達(dá)，亞甲基藍(lán)法檢測細(xì)胞增殖能力，倒置相差顯微鏡觀察肌管形成情況。采用濃度為1、2、4、8、16 ng/mL Myl 單克隆抗體分別處理3 種細(xì)胞（實(shí)驗(yàn)組），與未處理的細(xì)胞比較（對照組），觀察細(xì)胞增殖能力及肌管形成的變化。 結(jié)果 培養(yǎng)24 h 的eMb、dMb 和gMb 均檢測到Myl1、Myl4 mRNA 和Myl 蛋白表達(dá)，且eMb 的表達(dá)水平顯著低于dMb 和gMb（P lt; 0.01），dMb 和gMb 間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05） ；3 種細(xì)胞均未檢測到Myl2 和 Myl3 mRNA 表達(dá)。eMb 的增殖速度高于dMb 和gMb（P lt; 0.01）；eMb 和dMb、gMb 分別在接種后40 h 和16 h 出現(xiàn)肌管；第6 天eMb 肌管數(shù)為（137.2 ± 24.5）/ 視野，顯著高于dMb 的（47.6 ± 15.5）/ 視野和gMb 的（39.8 ± 5.1）/ 視野（P lt; 0.01），后兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。Myl 抗體作用后，3 種細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組各濃度吸光度值均顯著高于對照組（P lt; 0.05），表現(xiàn)濃度依賴性；dMb 實(shí)驗(yàn)組和對照組16 h 肌管數(shù)分別為（48.2 ± 7.1）/ 孔和（23.4 ± 4.9）/ 孔，6 d 肌管數(shù)分別為（40.6 ± 10.2）/ 視野和（63.1 ±6.1）/ 視野，兩組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。 結(jié) 論 Myl 可能通過促使Mb 終末分化，負(fù)性影響Mb 增殖而在肌肉再生中發(fā)揮一定作用。
目的 探討增生性瘢痕、瘢痕疙瘩及正常皮膚成纖維細(xì)胞中肌動蛋白和肌球蛋白 的不同表達(dá)情況及其與瘢痕攣縮的關(guān)系。方法 取增生性瘢痕 15例 ,瘢痕疙瘩 10例 ,正常皮膚 15例 ,用免疫組織化學(xué)方法檢測其中肌動蛋白和肌球蛋白 的表達(dá)情況 ,同時(shí)做細(xì)胞培養(yǎng) ,用流式細(xì)胞術(shù)檢測成纖維細(xì)胞中肌動蛋白和肌球蛋白 的表達(dá)情況。結(jié)果 增生性瘢痕肌球蛋白 的免疫組織化學(xué)染色呈陽性 ,而瘢痕疙瘩及正常皮膚肌球蛋白 的表達(dá)均為陰性。增生性瘢痕肌球蛋白 的表達(dá)較其它兩種組織有非常顯著性差異 (Plt;0 .0 1) ,而瘢痕疙瘩和正常皮膚無顯著性差異 (Pgt;0 .0 5 )。流式細(xì)胞術(shù)檢測增生性瘢痕、瘢痕疙瘩及正常皮膚三種組織中肌球蛋白 的陽性率分別為 (95 .11± 2 .78) %、(16 .86± 7.11) %及 (5 .31± 1.79) % ,增生性瘢痕肌球蛋白 表達(dá)的陽性率較其它兩種組織有非常顯著性差異 (Plt;0 .0 1) ,而瘢痕疙瘩和正常皮膚無顯著性差異 (Pgt;0 .0 5 )。三種組織中肌動蛋白的免疫組織化學(xué)染色均為陽性 ,無顯著性差異 (Pgt;0 .0 5 )。流式細(xì)胞術(shù)檢測三種組織中肌動蛋白的陽性率分別為（77.77±15.43）%、（88.89 ±10.29）%及（82.92± 13.48）%，其表達(dá)的陽性率無顯著性差異（Pgt;0 .0 5 ）。結(jié)論 瘢痕攣縮與肌球蛋白 密切相關(guān)，而肌動蛋白在細(xì)胞中收縮蛋白之一外，同時(shí)與細(xì)胞的活動及運(yùn)動有關(guān)，是細(xì)胞生命活動中必不可少的蛋白之一。
【摘要】 目的 原肌球蛋白是肌球蛋白主要相關(guān)蛋白之一，在細(xì)胞骨架與運(yùn)動中起著重要的作用。探討原肌球蛋白在增生性瘢痕中的作用，有助于揭示瘢痕攣縮的產(chǎn)生機(jī)制。 方法 收集2006年3月-2008年7月48例患者不同時(shí)期增生與非增生瘢痕組織標(biāo)本，利用基因芯片篩選出的瘢痕相關(guān)基因——原肌球蛋白基因特異片段，制備成寡核苷酸探針與瘢痕組織切片進(jìn)行原位雜交。同時(shí)，將各標(biāo)本進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)，制備成纖維細(xì)胞爬片，進(jìn)行原位雜交。 結(jié)果 原肌球蛋白基因在3、6個月的增生性瘢痕中表達(dá)均明顯強(qiáng)于9、12個月增生性瘢痕及非增生性瘢痕，陽性細(xì)胞比例也高于9、12個月增生性瘢痕及非增生性瘢痕。 結(jié)論 瘢痕增生攣縮與細(xì)胞骨架運(yùn)動的相關(guān)基因存在密切關(guān)系，而原肌球蛋白可能在其中起著重要作用?！続bstract】 Objective Tropomyosin is one of the proteins of cytoskeleton and cell movement. The aim of this study is to investigate the effect of gene expression of fibroblast tropomyosin on the formation and contraction of hypertrophic scar. Methods According to the results of differently expressed genes, in hypertrophic scar by gene microarray, topomyosin, one of the most important genes, was selected and made into oligonucleotide probe. Twenty-four hypertrophic scars and 24 non-hypertrophic scars and 12 normal skins were used and these scar were taken on 3, 6, 9, and 12 months after burned between March 2006 and July 2008. Frozen section and cultured fibroblasts were made to detect the expression of the gene by in situ hybridization. Results Expression of tropomyosin was defected in scar tissue, but those in the hypertrophic scar on 3 and 6 months after burn were significantly ber than those in the hypertrophic scar on 9 and 12 months after burn and non-hypertrophic scar. Conclusion Overexpression of cytoskeletal relative genes causes the contraction of scar and tropomyosin acts leading and key functions.
細(xì)胞自噬主要通過清除細(xì)胞中異?；蚨嘤嗟慕Y(jié)構(gòu)，起到維持饑餓過程中物質(zhì)和能量的代謝穩(wěn)定的功能，而細(xì)胞骨架調(diào)控涉及膜重排和囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)等多種細(xì)胞進(jìn)程。細(xì)胞自噬受到微管和肌動蛋白絲的調(diào)控:微管促進(jìn)自噬體的合成，與自噬體的移動密切相關(guān)；肌動蛋白絲支撐自噬泡的擴(kuò)張，促進(jìn)自噬體的移動以及與溶酶體的融合；非肌性肌球蛋白ⅡA 參與調(diào)控自噬體形成初期的膜傳遞，肌球蛋白Ⅵ和肌球蛋白 1C 分別影響自噬體的成熟以及自噬體與溶酶體的融合。本文綜述了細(xì)胞骨架系統(tǒng)對細(xì)胞自噬的多重調(diào)節(jié)，重點(diǎn)介紹肌動蛋白和肌球蛋白對自噬進(jìn)程的調(diào)控，以期為研究自噬相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制以及開創(chuàng)新的療法提供一些新的思路。