目的 概述神經(jīng)、內(nèi)分泌與免疫學(xué)機(jī)制的變化對(duì)皮膚修復(fù)的影響,以及近年來(lái)的研究進(jìn)展,為深入開展這一領(lǐng)域的研究和臨床治療提供依據(jù)。方法 廣泛閱讀國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn),并進(jìn)行分析、綜合,確定神經(jīng)、內(nèi)分泌與免疫機(jī)制在皮膚修復(fù)中的作用。結(jié)果 皮膚作為神經(jīng)依賴性器官、內(nèi)分泌器官及免疫器官,在皮膚損傷修復(fù)與再生中發(fā)揮重要作用。結(jié)論 目前對(duì)這一領(lǐng)域研究較少,應(yīng)加強(qiáng)相關(guān)基礎(chǔ)研究。
目的 對(duì)近年來(lái)國(guó)內(nèi)外有關(guān)脂肪源性干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ASCs)在臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用中應(yīng)該或必須關(guān)注的問題進(jìn)行綜述。 方法廣泛查閱近年相關(guān)文獻(xiàn),對(duì)ASCs生產(chǎn)和使用過程中有關(guān)產(chǎn)品的管理、生產(chǎn)、運(yùn)輸、使用、安全性等方面進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果ASCs作為成體干細(xì)胞家族的新成員在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域展現(xiàn)了廣闊的應(yīng)用前景。目前在美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院(NIH)的http: //www.clinicaltrials.gov網(wǎng)站上已注冊(cè)登記的在15個(gè)國(guó)家進(jìn)行的臨床試驗(yàn)達(dá)40多個(gè),說(shuō)明世界范圍內(nèi)從事干細(xì)胞研究和應(yīng)用的學(xué)者對(duì)ASCs臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用的濃厚興趣和重視。在臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用中,ASCs產(chǎn)品存在管理,生產(chǎn)應(yīng)遵循的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),病原微生物污染的預(yù)防措施,分離過程中對(duì)酶和相關(guān)試劑的要求,取材過程中供區(qū)、年齡和性別可能的影響,低溫貯藏,產(chǎn)品運(yùn)輸以及安全性等一系列問題。 結(jié)論ASCs作為成體干細(xì)胞具有較好的臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用優(yōu)點(diǎn),在臨床應(yīng)用中對(duì)其存在的問題必須給予高度重視和進(jìn)一步研究,以加速其臨床轉(zhuǎn)化過程。
目的 通過回顧雌激素調(diào)控血管內(nèi)皮細(xì)胞功能以及所涉及的血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和VEGF,探討雌激素參與創(chuàng)面新血管形成和創(chuàng)面愈合過程的機(jī)制。 方法 查閱國(guó)內(nèi)外有關(guān)雌激素對(duì)微血管形成影響的文獻(xiàn),并進(jìn)行總結(jié)分析。 結(jié)果 創(chuàng)面肉芽組織經(jīng)血管發(fā)生、血管形成完成新血管的形成,新生血管可運(yùn)輸氧和養(yǎng)料以滿足愈合組織的局部代謝需要。雌激素通過其受體影響血管內(nèi)皮細(xì)胞。周圍血管內(nèi)皮祖細(xì)胞能分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞并參與新血管的形成。雌二醇影響血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)并影響新血管形成,VEGF 是雌二醇調(diào)節(jié)血管形成的重要介導(dǎo)子。 結(jié)論 理解創(chuàng)面愈合中血管形成的分子機(jī)制,尤其是雌激素調(diào)控其受體和血管生成因子對(duì)于創(chuàng)面愈合的處理提供了新途徑。
目的 探討脂肪組織與創(chuàng)面愈合的關(guān)系。 方法 通過對(duì)近期文獻(xiàn)的回顧,脂肪組織參與食物攝入、能量代謝等生理過程。通過內(nèi)分泌、自分泌和旁分泌參與創(chuàng)面愈合的調(diào)節(jié)。 結(jié)果 脂肪組織主要分泌的幾種因子:瘦素、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子和脂質(zhì)等參與創(chuàng)面愈合過程。 結(jié)論 脂肪組織在創(chuàng)面愈合過程中可能具有重要作用,進(jìn)一步了解脂肪細(xì)胞與上皮形成間的關(guān)系有助于揭示創(chuàng)面愈合的機(jī)制。
目的 回顧研究和評(píng)價(jià)10年來(lái)有關(guān)生長(zhǎng)因子在臨床創(chuàng)面治療中的作用,特別是在中國(guó)的應(yīng)用實(shí)踐。方法 從文獻(xiàn)和互聯(lián)網(wǎng)檢索近10年來(lái)發(fā)表的有關(guān)生長(zhǎng)因子在臨床治療急慢性創(chuàng)面的報(bào)告,分析其療效和不良反應(yīng)。結(jié)果 臨床應(yīng)用生長(zhǎng)因子顯著加速了急慢性創(chuàng)面愈合速度,縮短了愈合時(shí)間,提高了愈合質(zhì)量,尚未見不良反應(yīng)發(fā)生。結(jié)論 應(yīng)用生長(zhǎng)因子促進(jìn)創(chuàng)面愈合已顯示出有效性和安全性。為了將來(lái)更好地臨床應(yīng)用,尚有一些潛在的問題需要探討。
目的 探討局部外用鹽酸普萘洛爾乳膏對(duì)糖尿病小鼠創(chuàng)面愈合的影響及其可能機(jī)制。 方法 取8 周齡雌性自發(fā)性BKS.Cg-Dock7m+/+Leprdb/JNju糖尿病小鼠18只,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組(n=9)。于兩組小鼠背部左、右側(cè)各制備直徑為0.6 cm的圓形全層皮膚缺損創(chuàng)面,實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組創(chuàng)面分別涂抹含或不含鹽酸普萘洛爾的乳膏,術(shù)后2、5、7、10、14、17 d重復(fù)涂抹1次。術(shù)后2、5、7、10、14、17、21 d,觀察創(chuàng)面愈合情況,計(jì)算創(chuàng)面愈合率;取材行HE染色、Masson染色、甲苯胺藍(lán)染色,觀察創(chuàng)面再上皮化、膠原纖維、肥大細(xì)胞情況,Western blot檢測(cè)創(chuàng)面組織中IL-1β和促血管生成素2(angiogenin 2,Ang2)蛋白的表達(dá)。 結(jié)果 兩組創(chuàng)面均逐漸愈合,但實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面愈合速度快于對(duì)照組,除術(shù)后21 d外,其余各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面愈合率均高于對(duì)照組,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。組織學(xué)觀察示,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面再上皮化加快,創(chuàng)面內(nèi)肥大細(xì)胞分布較少。Western blot檢測(cè)示除術(shù)后10 d外,其余各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組IL-1β蛋白相對(duì)表達(dá)量均低于對(duì)照組;術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組Ang2蛋白相對(duì)表達(dá)量均低于對(duì)照組。 結(jié)論 局部外用鹽酸普萘洛爾乳膏可促進(jìn)自發(fā)性糖尿病小鼠創(chuàng)面愈合,可能與其減少炎性反應(yīng)、穩(wěn)定血管及促進(jìn)表皮細(xì)胞增殖等有關(guān)。
目的探討關(guān)節(jié)鏡輔助下內(nèi)側(cè)髕股韌帶重建術(shù)治療髕骨脫位股骨側(cè)止點(diǎn)定位方法及效果。方法2014 年 1 月—2018 年 9 月,收治 35 例髕骨脫位患者。男 14 例,女 21 例;年齡 16~38 歲,平均 22.6 歲?;颊呔邢リP(guān)節(jié)扭傷史;病程 1~7 d,平均 2.8 d。髕骨脫位 2~4 次,平均 2.5 次。術(shù)前 Lysholm 評(píng)分為(47.60±11.24)分,Kujala 評(píng)分為(48.37±9.79)分。髕股適合角為(31.40±6.81)°、髕骨傾斜角為(29.95±5.44)°、外側(cè)髕股角為(?11.46±5.18)°,脛骨結(jié)節(jié)-股骨滑車間距為(16.66±1.28)mm。于關(guān)節(jié)鏡輔助下取自體半腱肌重建內(nèi)側(cè)髕股韌帶,在髕骨內(nèi)緣中點(diǎn)與中上 1/3 點(diǎn)應(yīng)用帶線錨釘固定韌帶,分別在內(nèi)收肌大結(jié)節(jié)、股骨內(nèi)上髁及其兩點(diǎn)間中點(diǎn)以及偏前、偏后位置鉆入克氏針,將肌腱固定于克氏針,膝關(guān)節(jié)屈曲過程中觀察韌帶等長(zhǎng)性、張力、髕骨軌跡及髕股對(duì)合關(guān)系,選擇最佳股骨側(cè)止點(diǎn)重建內(nèi)側(cè)髕股韌帶。術(shù)后影像學(xué)檢查測(cè)量髕股適合角、髕骨傾斜角、外側(cè)髕股角,評(píng)估髕股對(duì)合關(guān)系;應(yīng)用 Lysholm 評(píng)分與 Kujala 評(píng)分評(píng)價(jià)膝關(guān)節(jié)功能。結(jié)果術(shù)后切口均Ⅰ期愈合,無(wú)膝關(guān)節(jié)及切口感染發(fā)生?;颊呔@隨訪,隨訪時(shí)間 12~18 個(gè)月,平均 15.4 個(gè)月。術(shù)后 12 個(gè)月,Lysholm 評(píng)分為(94.40±3.99)分、Kujala 評(píng)分為(92.28±4.13)分,均較術(shù)前明顯改善(P<0.05)。隨訪期內(nèi)均無(wú)髕骨再脫位發(fā)生。術(shù)后 12 個(gè)月髕股適合角為(6.57±4.59)°、髕骨傾斜角為(9.73±2.82)°、外側(cè)髕股角為(7.14±4.63)°,均較術(shù)前明顯改善(P<0.05)。結(jié)論關(guān)節(jié)鏡輔助下有限切開重建內(nèi)側(cè)髕股韌帶時(shí),應(yīng)用股骨側(cè)解剖標(biāo)志定位,通過觀察內(nèi)側(cè)髕股韌帶張力、等長(zhǎng)性以及髕股關(guān)節(jié)對(duì)合關(guān)系、髕骨軌跡,可以使股骨側(cè)止點(diǎn)定位更準(zhǔn)確,臨床效果滿意。
目的 表皮干細(xì)胞(epidermal stem cells,ESCs)在體內(nèi)的微環(huán)境十分復(fù)雜,雌激素可能是主要的參與者。探討雌激素對(duì)體外培養(yǎng)的hESCs 增殖與遷移的影響。 方法 取自愿捐贈(zèng)的正常人包皮標(biāo)本,采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)hESCs,并傳至第2 代。流式細(xì)胞儀檢測(cè)第2 代hESCs 整合素β1、細(xì)胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)、CK14和CK10 抗原表達(dá)以鑒定hESCs。取第2 代hESCs 2 × 106 個(gè)分別用含0.1 nmol/L 雌激素的ESCs 專用培養(yǎng)基(A 組)、含10 nmol/L 雌激素受體阻斷劑的ESCs 專用培養(yǎng)基(B 組)以及普通ESCs 專用培養(yǎng)基(C 組)進(jìn)行培養(yǎng);于培養(yǎng)后24 h 刮擦生長(zhǎng)融合成片的hESCs,制備寬度為100 μm 的體外單層hESCs 損傷模型。于模型制備后24、48、72 h,倒置相差顯微鏡下觀察各組表皮創(chuàng)面愈合情況(即hESCs 遷移情況),并計(jì)算模型制備后72 h 各組創(chuàng)面愈合率;于模型制備后24、48、72、96、120 h,采用MTT 法檢測(cè)hESCs 分裂增殖活性。 結(jié)果 原代培養(yǎng)的hESCs 貼壁呈單層卵圓形、集落樣生長(zhǎng)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)第2 代hESCs 的整合素β1、CK19、CK14 呈陽(yáng)性標(biāo)記,陽(yáng)性率分別為96.63%、95.47%、94.27%;CK10 呈陰性標(biāo)記,陽(yáng)性率為1.32%。模型制備后24、48、72 h,各組均可見hESCs 遷移越過創(chuàng)緣,其中A 組越過創(chuàng)緣的細(xì)胞數(shù)多于B、C 組,C 組多于B 組;模型制備后72 h,A、B、C 組創(chuàng)面愈合率分別為69.00% ± 0.05%、35.00% ± 0.05%、48.00% ± 0.06%,組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。模型制備后24、48、72、96 和120 h,A 組hESCs 分裂增殖活性高于B、C 組,C 組高于B 組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.01)。 結(jié)論 雌激素具有促進(jìn)hESCs 分裂增殖和遷移的作用,并藉此可能參與皮膚諸多的生物學(xué)作用。