目的 系統(tǒng)評價糞便基因異常甲基化診斷結(jié)直腸腫瘤的準確性。方法 計算機檢索The Cochrane Library、PubMed、EMbase、CBM、Web of Science、CNKI和WanFang Data，收集糞便基因甲基化診斷結(jié)直腸腫瘤的研究，檢索時限為1990年1月至2012年2月，同時依據(jù)QUADAS條目評價納入研究質(zhì)量，采用Meta-Disc1.4軟件進行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果 最終共納入32個研究，3 951例患者。Meta分析結(jié)果顯示：糞便基因甲基化對于檢測結(jié)直腸腫瘤的合并敏感度（Sen）、特異度（Spe）、診斷比值比（DOR）、SROC曲線下面積（AUC）及Q值分別為92%［95%CI（91%，93%）］、63%［95%CI（61%，65%）］、20.79［95%CI（15.13，28.57）］、0.861 9（SE=0.020 4）及0.792 6（SE=0.019 8）；對于檢測結(jié)直腸癌的合并Sen、Spe及SROC AUC分別為91%［95%CI（89%，92%）］、75%［95%CI（73%，77%）］及0.9007；而對于結(jié)直腸腺瘤的合并Sen、Spe及SROC AUC分別為79%［95%CI（76%，83%）］、75%［95%CI（73%，77%）］及0.845 7。結(jié)論 糞便基因異常甲基化對于診斷結(jié)直腸腫瘤具有較高的敏感性（92%）和中度特異性（63%），可作為診斷結(jié)直腸腫瘤的無創(chuàng)性初篩方法。
目的 探討聯(lián)合使用DNA甲基化酶抑制劑（DNA methyltransferase inhibitor, DNMTi）和組蛋白脫乙?；敢种苿╤istone deacetylase inhibitor, HDACi）干預(yù)膽管癌細胞后，對E-cadherin 基因的表達和細胞侵襲力的影響。方法 根據(jù)給予膽管癌細胞不同的處理方法分為4組： 空白對照組、肼屈嗪組、丙戊酸組和肼屈嗪+丙戊酸組，用RT-PCR、Western blot檢測E-cadherin基因和蛋白的表達，用Transwell法檢測細胞體外侵襲、轉(zhuǎn)移力。結(jié)果 空白對照組和丙戊酸組E-cadherin 基因和蛋白均無表達，肼屈嗪+丙戊酸組E-cadherin基因和蛋白表達量均明顯高于肼屈嗪組（ P ＜ 0.01）； 同時肼屈嗪+丙戊酸組細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移力較空白對照組、丙戊酸組和肼屈嗪組明顯下降（ P ＜ 0.01）。結(jié)論 DNMTi與HDACi協(xié)同恢復(fù)E-cadherin基因的表達，降低細胞侵襲、轉(zhuǎn)移力，對于膽管癌的治療有著重要的作用
目的 研究聯(lián)合檢測微衛(wèi)星不穩(wěn)定性( MSI) 和p16 基因啟動子甲基化在早期肺癌中的診斷價值。方法 對肺癌、癌前病變和正常肺組織采用PCR 單鏈長度分析法檢測MSI, 采用甲基化特異PCR 法檢測p16 甲基化。結(jié)果 癌前病變組MSI 的發(fā)生率顯著高于肺癌組( P lt;0. 05) 和正常肺組織組( P lt;0. 01) , 肺癌組MSI 的發(fā)生率顯著高于正常肺組織組( P lt;0. 01) ; 肺癌組p16 甲基化的發(fā)生率顯著高于癌前病變組( P lt;0. 01) 和正常肺組織組( P lt;0. 01) , 癌前病變組p16 甲基化的發(fā)生率顯著高于正常肺組織組( P lt;0. 01) ; 聯(lián)合檢測MSI 和p16 甲基化的敏感性顯著高于單一檢測MSI( P lt;0. 01) 和p16 甲基化( P lt;0. 05) ; 聯(lián)合檢測法與單一檢測MSI 和單一檢測p16 甲基化的特異性比較,差異無顯著性意義( P gt;0. 05) 。結(jié)論 聯(lián)合檢測MSI 和p16 甲基化可以顯著提高早期肺癌診斷的敏感性同時不降低其特異性, 值得臨床推廣。
目的 明確哮喘大鼠肺T淋巴細胞中的組蛋白去乙?；?( HDAC1) 蛋白表達水平及組蛋白整體乙?；图谆? 探討其在哮喘發(fā)病機制中的作用。方法 16 只Wistar 大鼠隨機分為對照組和哮喘組( 每組8 只) , 用卵白蛋白( OVA) 致敏并激發(fā)建立哮喘大鼠模型。通過哮喘臨床表現(xiàn)、氣道高反應(yīng)性測定、肺組織HE 染色、血清和BALF中細胞因子IL-4、γ干擾素( IFN-γ) 及IgEELISA 測定, 判斷哮喘大鼠模型是否成功。分離肺T 細胞并進行純度鑒定。Western blot 檢測肺T細胞HDAC1 蛋白表達水平, 組蛋白H3、H4 整體乙酰化, 以及H3k9 整體二甲基化水平。結(jié)果 與對照組比較, 哮喘組HDAC1 蛋白表達水平低于對照組( P lt; 0. 05) , 組蛋白H3、H4 整體乙?；胶虷3k9 整體二甲基化水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 肺T 細胞HDAC1 可能參與了支氣管哮喘的發(fā)病環(huán)節(jié), 組蛋白整體乙?；图谆脚c哮喘發(fā)病無明顯相關(guān)性, HDAC1 對組蛋白修飾作用可能是一個基因轉(zhuǎn)錄特異性事件。
目的 研究支氣管哮喘模型大鼠肺CD4 + T 細胞中的Notch1 基因mRNA 表達水平、Notch1 基因啟動子區(qū)DNA 甲基化水平及其甲基化改變的位點。方法 20 只Wistar 大鼠隨機分為對照組和哮喘組( 每組10 只) , 哮喘組用卵白蛋白( OVA) 致敏并激發(fā)的方法建立哮喘大鼠模型。免疫磁珠分離肺CD4 + T細胞并進行純度鑒定。Real-time PCR 檢測肺CD4 + T 細胞Notch1 基因mRNA 表達水平, 重亞硫酸鹽測序檢測Notch1 基因啟動子區(qū)DNA 甲基化水平。結(jié)果 哮喘組大鼠肺CD4 + T細胞中Notch1 基因mRNA 表達水平為對照組的( 2. 254 ±0. 403) 倍( P lt; 0. 01) 。哮喘組大鼠肺CD4 + T淋巴細胞Notch1 基因啟動子區(qū)DNA 10 個位點整體甲基化水平低于對照組( 0. 150 ±0. 108 比0. 300 ±0. 667, P lt;0. 01) 。結(jié)論 哮喘大鼠肺CD4 + T 細胞Notch1 基因DNA 低甲基化可能參與了Notch1 基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控, 增高了Notch1 基因的表達量, 從而參與了哮喘的發(fā)病。
目的 探討三氧化二砷(As2O3 )誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細胞瘤（RB）Y79細胞系P16基因去甲基化及轉(zhuǎn)錄激活的可能機制。方法四甲基偶氮唑鹽微量酶反應(yīng)比色法（MTT）法檢測As2O3對Y79細胞生長和增生的抑制作用；流式細胞儀DNA含量分析法探討As2O3對Y79細胞周期的影響；巢式甲基特異性聚合酶鏈反應(yīng)法(n-MSP)及DNA克隆測序分析法檢測As2O3作用前后Y79細胞P16基因甲基化狀態(tài)；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR）檢測P16基因、DNA甲基轉(zhuǎn)移酶 (DNMT3A、DNMT3B)基因mRNA的表達。結(jié)果 As2O3 能明顯抑制Y79細胞生長，使細胞阻滯于G0~G1期；未處理組細胞P16基因不表達，As2O3作用48 h后P16基因表達增強，甲基化程度減弱，甲基轉(zhuǎn)移酶DNMT3A、DNMT3B mRNA 表達下降。結(jié)論 RB Y79細胞系存在P16基因高甲基化，As2O3通過抑制DNA甲基轉(zhuǎn)移酶mRNA表達誘導(dǎo)P16基因去甲基化，顯著上調(diào)P16基因mRNA表達,將細胞阻滯于G0~G1期, 抑制Y79細胞增生。
骨髓增生異常綜合征（MDS）是一種起源于造血干細胞的克隆性疾病，疾病臨床表現(xiàn)呈異質(zhì)性，多數(shù)患者最終轉(zhuǎn)化為急性髓細胞性白血病。近年來發(fā)現(xiàn)DNA甲基化異常與MDS的嚴重程度及預(yù)后有關(guān)，去甲基化治療作為一種新的方法引入到MDS的治療中。現(xiàn)將指導(dǎo)MDS患者臨床合理使用去甲基化藥物的生物學(xué)指標進行綜述。
【摘要】抑癌基因啟動子CpG島甲基化是抑癌基因表達下降的一種重要修飾方式,與腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切。胃癌的發(fā)生是多種因素累積的結(jié)果,抑癌基因甲基化與胃癌的發(fā)生可能具有重要的關(guān)系。在此綜述新見4種胃癌相關(guān)抑癌基因甲基化:鋅指蛋白1基因,速激酶1基因,電壓依賴性鈣通道α2/δ3亞基基因,X染色體連鎖凋亡抑制蛋白相關(guān)因子1基因。
目的 探討缺血再灌注小腸中DNA甲基化對小腸細胞凋亡和增殖是否具有調(diào)控作用。方法 將35只健康雄性Wistar大鼠隨機分為正常組（n=5）、假手術(shù)組（n=5）及缺血再灌注（0、3、6、12、24h，n=5）組。利用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標記測定法、透射電鏡和免疫組織化學(xué)方法分別檢測細胞凋亡和細胞增殖的變化，最后通過DNA甲基化位點組織末端酶鏈接檢測法檢測DNA甲基化。結(jié)果?、倥c正常組和假手術(shù)組比較，缺血再灌注組缺血再灌注后3、6及12h時在小腸絨毛上皮、黏膜固有層及隱窩上皮中凋亡細胞均明顯增加（P＜0.01），且透射電鏡檢測證實，黏膜固有層的凋亡細胞主要是淋巴細胞和少量吞噬細胞。②與正常組和假手術(shù)組比較，缺血再灌注后3、6、12及24h時在小腸絨毛上皮中細胞增殖明顯（P＜0.01），缺血再灌注后6h和12h時在小腸黏膜固有層和隱窩上皮中細胞增殖明顯（P＜0.01）。③正常組和假手術(shù)組DNA甲基化在小腸絨毛上皮和隱窩上皮部分有弱表達；在缺血再灌注組中，小腸隱窩上皮部分DNA甲基化在近小腸干細胞部位表達最強，從隱窩上皮到絨毛上皮是以從強到弱的趨勢發(fā)生變化的。結(jié)論 本研究的初步研究結(jié)果提示，缺血再灌注小腸中DNA甲基化可能對小腸細胞凋亡和增殖具有調(diào)控作用。
目的 探討甲狀腺乳頭狀癌（PTC）中微小RNA-34b（miR-34b）基因的表達及其啟動子區(qū)的甲基化情況，并分析甲基化與其臨床病理特征的關(guān)系。方法 收集2008年9月至2010年10月期間南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院行手術(shù)切除的25例PTC患者的癌組織和癌旁組織。采用實時定量PCR法檢測其miR-34bmRNA的表達，采用甲基化特異性（MSP）PCR法檢測miR-34b基因啟動子區(qū)的甲基化情況。結(jié)果 PTC癌組織中miR-34bmRNA的相對表達量為0.85±0.05，較癌旁組織的1.62±0.09低（P=0.030）。25例PTC癌組織中，有18例（72%）患者的miR-34b基因啟動子區(qū)發(fā)生甲基化，癌旁組織組有10例（40%），癌組織的甲基化比例較高（P=0.021）。甲基化與PTC患者的年齡、性別、腫瘤大小、TNM分期和包膜浸潤均無關(guān)（P＞0.05），而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的甲基化比例高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0.05）。結(jié)論 PTC癌組織中miR-34b基因啟動子區(qū)的異常甲基化可能是該基因失活的原因之一，并且可能與PTC的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移均有關(guān)，其機理值得進一步研究。