目的 研究纖維粘連蛋白（fibronection, FN）與堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）單獨(dú)或聯(lián)合應(yīng)用時(shí)對(duì)成骨細(xì)胞在生物衍生骨支架上黏附的影響，并探索其潛在機(jī)制。 方法 取第3代成骨細(xì)胞，以bFGF(01、1、10和100 ng/ml)刺激，接種于FN(01、1、10和100 μg/ml)或多聚賴氨酸（Polylysine）修飾的生物衍生骨支架上，MTT法檢測(cè)組間細(xì)胞黏附效率差異，電鏡觀察細(xì)胞密度與形態(tài)。GRGDS肽封閉后再次重復(fù)上述步驟。 結(jié)果 單獨(dú)應(yīng)用FN與bFGF均可增加成骨細(xì)胞在生物衍生骨支架上的黏附效率（Plt;0.05），聯(lián)合應(yīng)用時(shí),產(chǎn)生的效應(yīng)顯著增強(qiáng)，兩者存在交互作用（Plt;0.01）。而Polylysine與bFGF無(wú)此交互作用（P＞0.05）。電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，兩者聯(lián)合應(yīng)用時(shí)細(xì)胞密度、鋪展效果均優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用。應(yīng)用GRGDS肽后，F(xiàn)N聯(lián)合bFGF產(chǎn)生的黏附促進(jìn)作用被顯著阻斷。 結(jié)論 bFGF與FN對(duì)成骨細(xì)胞在生物衍生骨三維支架上的黏附存在協(xié)同刺激作用，細(xì)胞黏附產(chǎn)生這一效應(yīng)的機(jī)制很可能是由RGD-整合素α5β1途徑來介導(dǎo)的，需深入研究探討。
目的 制備生物衍生骨-WO-1藥物緩釋系統(tǒng)，對(duì)其理化性質(zhì)和WO-1的體外釋放情況進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法 采用Pluronic F-127負(fù)載WO-1制作生物衍生骨-WO-1藥物緩釋系統(tǒng)。掃描電鏡觀察生物衍生骨及生物衍生骨-WO-1藥物緩釋系統(tǒng)形貌特征，測(cè)量其孔徑和孔隙率；應(yīng)用X線衍射分析儀和X線能量散射分析儀對(duì)其成分進(jìn)行分析；應(yīng)用高效液相色譜分析儀評(píng)價(jià)WO-1在雙蒸水中1～7 d的藥物釋放情況。結(jié)果 生物衍生骨具有天然的網(wǎng)狀孔隙結(jié)構(gòu)，孔隙間互相連通；生物衍生骨-WO-1藥物緩釋系統(tǒng)也具有互相連通的網(wǎng)狀孔隙結(jié)構(gòu)，孔徑和孔隙率分別為522.43±16.75 μm和55%, 低于生物衍生骨的孔徑623.67±12.31 μm和孔隙率75%。生物衍生骨-WO-1藥物緩釋系統(tǒng)主要成分為羥基磷灰石，鈣/磷比為1.54；生物衍生骨鈣/磷比為1.77。 藥物釋放實(shí)驗(yàn)：生物衍生骨-WO-1藥物緩釋系統(tǒng)1 d表現(xiàn)為爆發(fā)釋放，溶液濃度為4.6 μg/ml，此后可連續(xù)釋放6 d，濃度維持在0.2~0.8 μg/ml。結(jié)論 生物衍生骨-WO-1藥物緩釋系統(tǒng)可望成為一種更佳的骨組織工程支架材料，有待于進(jìn)一步進(jìn)行體內(nèi)研究。
目的 追溯不同種類生物衍生骨修復(fù)骨缺損的研究進(jìn)展。方法 廣泛查閱近期相關(guān)文獻(xiàn)，綜述不同種類生物衍生骨制備方法，以及修復(fù)骨缺損的治療效果。結(jié)果 采用不同物理化學(xué)方法處理的異體骨或異種骨不僅是天然的骨替代材料，還可作為支架材料與種子細(xì)胞復(fù)合構(gòu)建組織工程骨，修復(fù)骨缺損。結(jié)論 目前組織工程生物衍生骨是骨缺損治療的新突破點(diǎn)。
目的 探討骨髓基質(zhì)干細(xì)胞（marrow stromal stem cells,MSCs）與生物衍生骨復(fù)合修復(fù)山羊脛骨的長(zhǎng)段骨-骨膜缺損的可行性。方法 將12月齡山羊35只雙側(cè)脛骨制備成中段20 mm的骨-骨膜缺損，其中33只，將MSCs與生物衍生骨于體外復(fù)合培養(yǎng)后，將其植入右側(cè)缺損處，常規(guī)鋼板螺釘內(nèi)固定作為實(shí)驗(yàn)組，以單純生物衍生骨植入左側(cè)作為對(duì)照組，另2只為空白組不植入任何材料，在2、4、6、8、12、16及24周各時(shí)間點(diǎn)分別行大體標(biāo)本、組織學(xué)觀察，以及生物力學(xué)測(cè)試，比較3組骨缺損修復(fù)的能力。結(jié)果 4周時(shí)實(shí)驗(yàn)組支架材料部分吸收，植入物表面有纖維骨痂形成，對(duì)照組支架材料少量吸收，植入物表面有少量骨樣組織形成；8周時(shí)，大體標(biāo)本、組織學(xué)觀察，實(shí)驗(yàn)組中的支架材料已完全降解，骨缺損部分修復(fù)，對(duì)照組中植入物兩端少量新骨形成，材料中為纖維骨樣組織，但8周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的生物力學(xué)強(qiáng)度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；12周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組骨缺損完全修復(fù)，對(duì)照組植入物兩端有新骨包繞，與骨端連接緊密。12～24周實(shí)驗(yàn)組彎曲應(yīng)力大于對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；24周時(shí)空白組骨缺損未修復(fù)。結(jié)論 所構(gòu)建的組織工程骨修復(fù)能力較強(qiáng)，成骨迅速，且量大，同期新生骨組織的生物力學(xué)強(qiáng)度優(yōu)于單純材料。
目的 探討不同方法保存的生物衍生骨修復(fù)節(jié)段性橈骨缺損的效果。方法 凍干生物衍生骨用兩種不同保存液保存3個(gè)月，以保存相同時(shí)間的凍干生物衍生骨為對(duì)照。選擇60只新西蘭大白兔，制作15 mm長(zhǎng)的雙側(cè)橈骨節(jié)段性骨缺損模型，實(shí)驗(yàn)根據(jù)植入不同方法保存的材料分為A、 B和C組。A組植入1號(hào)保存液處理材料，B組植入2號(hào)保存液處理材料，A、B組再根據(jù)材料是否復(fù)合成骨細(xì)胞培養(yǎng)分為A1和A2、B1和B2組，A1和B1組于動(dòng)物左側(cè)橈骨缺損區(qū)植入組織工程生物衍生骨，A2和B2組于右側(cè)植入單純材料。C組分為C1和C2組，于動(dòng)物左側(cè)橈骨缺損區(qū)植入凍干材料，右側(cè)為空白對(duì)照。術(shù)后4、8和16周取材，攝X線片、組織學(xué)觀察、計(jì)算機(jī)圖像分析和生物力學(xué)測(cè)定。結(jié)果 術(shù)后4、8和16周各組骨缺損區(qū)均有新骨生成，成骨量隨時(shí)間的推移而增加。經(jīng)X線片、組織學(xué)和生物力學(xué)評(píng)估，各組的成骨能力依次為：A1gt;A2gt;C1gt;B1gt;B2gt;C2有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001，Plt;0.05)，其中A1組成骨能力最強(qiáng)，術(shù)后16周骨缺損完全修復(fù)，骨髓腔再通，生物力學(xué)性能接近正常骨。結(jié)論 選擇適宜的保存液對(duì)生物衍生骨支架材料的骨修復(fù)能力有一定的促進(jìn)作用。
目的 研制具有抗感染作用的WO-1生物衍生骨緩釋材料。方法 應(yīng)用Ⅰ型膠原和同種骨制備膠原生物衍生骨復(fù)合材料，將WO-1吸附于膠原生物衍生骨構(gòu)建成WO-1生物衍生骨緩釋材料，掃描電鏡觀察其形貌特征；將3 H四環(huán)素（45.1GBq/mmol）以WO-1標(biāo)準(zhǔn)品溶液稀釋，吸附于膠原生物衍生骨，測(cè)定緩釋材料中WO-1的體外釋放；將WO-1生物衍生骨緩釋材料置入接種金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌的培養(yǎng)基中，檢測(cè)其體外抑菌能力。將WO-1生物衍生骨植入24只新西蘭大白兔橈骨缺損處，術(shù)后9、16、23及30 d各處死2只兔測(cè)定血中WO-1的濃度，以及材料周圍肌肉與骨中的WO-1的濃度。結(jié)果 WO-1生物衍生骨復(fù)合材料保留了天然骨的三維結(jié)構(gòu)，表面有膠狀膜覆蓋；在體外釋放實(shí)驗(yàn)中第1天呈暴發(fā)釋放，以后呈恒定釋放；對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等骨感染的常見致病菌有持久穩(wěn)定的抑菌能力。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中周圍骨組織及肌肉組織中WO-1在各時(shí)間點(diǎn)均保持較高的濃度，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）,而動(dòng)物血中WO-1濃度較低，與骨及肌肉組織中WO-1濃度相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 WO-1生物衍生骨緩釋材料具有良好的藥物緩釋功能及較強(qiáng)的抑菌能力。
目的 了解不同保存方法對(duì)生物衍生骨支架材料細(xì)胞相容性的影響。方法 凍干生物衍生骨用兩種不同保存液同等條件4℃冷藏保存3個(gè)月，以保存相同時(shí)間凍干生物衍生骨為對(duì)照。實(shí)驗(yàn)分為A組：成骨細(xì)胞復(fù)合 1號(hào)保存液處理材料培養(yǎng)；B組：成骨細(xì)胞復(fù)合 2號(hào)保存液處理材料培養(yǎng)；C組：成骨細(xì)胞復(fù)合凍干骨培養(yǎng)；D組：?jiǎn)渭兂晒羌?xì)胞培養(yǎng)。以2×106個(gè)/ml密度的成骨細(xì)胞懸液復(fù)合材料培養(yǎng)1、3、5和7天。用倒置相差顯微鏡和掃描電鏡觀察細(xì)胞的黏附和生長(zhǎng)情況、檢測(cè)細(xì)胞活力、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期。結(jié)果 成骨細(xì)胞與三種不同方法保存的材料均可黏附，并在材料孔隙內(nèi)生長(zhǎng)、分化和增殖。復(fù)合培養(yǎng)1和3天，各組間無(wú)顯著差異；復(fù)合培養(yǎng)5和7天，黏附于材料的細(xì)胞活力大小依次為 A組gt;C組gt;B組 (P＜0.01，P＜0.05)。復(fù)合培養(yǎng)7天，黏附于材料的細(xì)胞ALP活性大小依次為 A組gt;C組gt;B組(P＜0.01) 。各組細(xì)胞周期未見明顯變化，未見異倍體細(xì)胞。 結(jié)論 選擇適宜的保存液對(duì)生物衍生骨支架材料的細(xì)胞相容性有一定優(yōu)化作用。
目的 探討成骨細(xì)胞復(fù)合 Pluronic F- 12 7表面修飾生物衍生骨的三維培養(yǎng) ,對(duì)成骨細(xì)胞活力及功能表達(dá)的影響?！》椒ā⑿迈r豬肋骨加工制成生物衍生骨 ,應(yīng)用 Pluronic F- 12 7對(duì)生物衍生骨進(jìn)行表面修飾 ,然后體外復(fù)合第 3代成骨細(xì)胞三維培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)為 A、B和 C組。A組為單純生物衍生骨復(fù)合成骨細(xì)胞組 ,B組為 Pluronic F- 12 7表面修飾生物衍生骨復(fù)合成骨細(xì)胞組 ,C組為單純成骨細(xì)胞組。應(yīng)用倒置相差顯微鏡和掃描電鏡對(duì)各組成骨細(xì)胞生長(zhǎng)及黏附進(jìn)行觀察 ,并對(duì)其細(xì)胞活力和堿性磷酸酶 (AL P)活性進(jìn)行檢測(cè)?！〗Y(jié)果 B組成骨細(xì)胞在支架材料上黏附、伸展及生長(zhǎng)良好 ,成骨細(xì)胞活力和 AL P活性表達(dá)與 A組成骨細(xì)胞比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (Pgt;0 .0 5 ) ;A、B組與 C組比較 ,成骨細(xì)胞活力和 AL P活性均明顯降低 ,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (Plt;0 .0 1)?！〗Y(jié)論 生物衍生骨經(jīng) Pluronic F- 12 7表面修飾后具有良好的細(xì)胞相容性 ,可作為負(fù)載生物活性分子的載體修飾生物衍生骨。