目的 人參皂苷Rg1 可增強(qiáng)神經(jīng)元對缺氧缺血應(yīng)激的耐受能力，在缺氧缺血性腦損傷（hypoxia ischemia brain damage，HIBD）中發(fā)揮一定的抗凋亡作用。觀察人參皂苷Rg1 對新生鼠HIBD 后神經(jīng)元凋亡及神經(jīng)功能恢復(fù)的影響，并探討其可能機(jī)制。 方法 10 天齡SPF 級(jí)SD 大鼠54 只，體重16 ～ 22 g，隨機(jī)分為假手術(shù)對照組（假手術(shù)組，n=6）、HIBD 模型組（模型組，n=24）和人參皂苷Rg1 組（Rg1 組，n=24）。模型組及Rg1 組大鼠采用結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈并低氧通氣制備HIBD 模型；假手術(shù)組僅分離右側(cè)頸總動(dòng)脈，不結(jié)扎，不進(jìn)行低氧通氣。Rg1 組于術(shù)后即刻腹腔內(nèi)注射0.1 mL 含人參皂苷Rg1（40 mg/kg）的生理鹽水，此后每隔24 h 按相同劑量注射人參皂苷Rg1；模型組和假手術(shù)組相同時(shí)間點(diǎn)腹腔內(nèi)注射0.1 mL 生理鹽水。術(shù)后觀察大鼠一般情況，于術(shù)后4、8、24、72 h 采用Longa 評分法行神經(jīng)行為學(xué)評價(jià)后，處死大鼠取右側(cè)腦組織，采用Western blot 及免疫組織化學(xué)染色檢測缺氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α）和活化的半胱天冬氨酸酶3（cleaved caspase 3，CC3）蛋白表達(dá)；TUNEL 法檢測原位神經(jīng)元凋亡情況。 結(jié) 果 術(shù)后大鼠均存活至實(shí)驗(yàn)完成。與假手術(shù)組比較，模型組和Rg1 組大鼠均出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)行為學(xué)異常；兩組Longa 評分與假手術(shù)組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；術(shù)后72 h 時(shí)Rg1 組與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。Western blot 檢測顯示，各組各時(shí)間點(diǎn)均有HIF-1α、CC3 蛋白表達(dá)；模型組及Rg1 組各時(shí)間點(diǎn)HIF-1α 蛋白表達(dá)均較假手術(shù)組有明顯增加（P lt; 0.05），Rg1 組均較同一時(shí)間點(diǎn)模型組有明顯上調(diào)（P lt; 0.05）。模型組各時(shí)間點(diǎn)CC3 蛋白表達(dá)均較假手術(shù)組明顯增加（P lt; 0.05），Rg1 組僅術(shù)后4 h 與假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；Rg1 組各時(shí)間點(diǎn)均較模型組明顯下調(diào)（P lt; 0.05）。免疫組織化學(xué)染色可見HIF-1α 蛋白、CC3 蛋白定位主要集中在胞核及胞漿，各組各時(shí)間點(diǎn)蛋白表達(dá)強(qiáng)度與Western blot 觀察結(jié)果一致。TUNEL 染色各組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)均見陽性細(xì)胞；模型組各時(shí)間點(diǎn)凋亡細(xì)胞數(shù)均較假手術(shù)組明顯增加（P lt; 0.05），Rg1 組術(shù)后4、8 h 與假手術(shù)組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；Rg1 組在8、24 及72 h 凋亡細(xì)胞數(shù)目較模型組明顯減少（P lt; 0.05）。 結(jié)論 Rg1 通過增強(qiáng)并穩(wěn)定HIF-1α 信號(hào)途徑，從而抑制半胱天冬氨酸酶3 的活化，在新生鼠HIBD 中發(fā)揮抗凋亡作用。
目的探討人參皂苷Rg1在新生鼠缺氧缺血性腦損傷（hypoxia ischemia brain damage，HIBD）中的抗凋亡作用，分析可能的信號(hào)通路機(jī)制。 方法10日齡SPF級(jí)SD大鼠48只，體質(zhì)量17～21 g，隨機(jī)分為4組（n=12），假手術(shù)組、模型組（HI組）、模型+人參皂甙Rg1組（HI+Rg1組）、模型+人參皂甙Rg1+U0126干預(yù)組（HI+Rg1+U0126組）。HI組、HI+Rg1組及HI+Rg1+U0126組大鼠采用結(jié)扎單側(cè)頸總動(dòng)脈并低氧通氣方法制備HIBD模型；假手術(shù)組僅分離右側(cè)頸總動(dòng)脈。HI+Rg1+U0126組于造模前1 h右側(cè)腦室注射5 μL含U0126（25 μg/kg）的PBS，其余3組同法注射5 μL PBS。HI+Rg1組及HI+Rg1+U0126組于術(shù)后即刻腹腔內(nèi)注射0.1 mL含Rg1（40 mg/kg）的生理鹽水；HI組和假手術(shù)組注射0.1 mL生理鹽水。術(shù)后4、24 h處死各組大鼠，取右側(cè)半球皮層和海馬腦組織，采用Western blot及免疫組織化學(xué)染色檢測胞外信號(hào)相關(guān)蛋白激酶1/2（extracellular signalrelated protein kinase 1/2，Erk1/2）及磷酸化Erk1/2（phospho-Erk1/2，p-Erk1/2）、缺氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxia induciblefactor 1α，HIF-1α）和活化的半胱天冬氨酸酶3（cleaved Caspase-3，CC3）蛋白表達(dá)；TUNEL法檢測原位神經(jīng)元凋亡情況。 結(jié)果Western blot檢測示，各時(shí)間點(diǎn)各組均有Erk1/2、p-Erk1/2、HIF-1α、CC3蛋白表達(dá)；術(shù)后4、24 h，HI組HIF-1α、CC3蛋白表達(dá)均較假手術(shù)組明顯增加（P＜0.05）；術(shù)后4 h，HI組p-Erk1/2蛋白表達(dá)較假手術(shù)組明顯增加（P＜0.05）；術(shù)后4、24 h，HI+Rg1組p-Erk1/2及HIF-1α蛋白表達(dá)較HI組明顯上調(diào)（P＜0.05），CC3蛋白表達(dá)則明顯下調(diào)（P＜0.05）；術(shù)后4、24 h，HI+Rg1+U0126組p-Erk1/2及HIF-1α蛋白表達(dá)較HI+Rg1組明顯下調(diào)（P＜0.05），CC3蛋白表達(dá)則明顯上調(diào)（P＜0.05）。各時(shí)間點(diǎn)各組間Erk1/2蛋白表達(dá)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。免疫組織化學(xué)染色可見HIF-1α蛋白、CC3蛋白定位主要集中在細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)，Erk1/2、p-Erk1/2蛋白定位主要集中在細(xì)胞質(zhì)，蛋白表達(dá)強(qiáng)度與Western blot結(jié)果一致。TUNEL染色示術(shù)后4、24 h，HI組神經(jīng)元凋亡指數(shù)較假手術(shù)組明顯上升（P＜0.05）；術(shù)后24 h，HI+Rg1組神經(jīng)元凋亡指數(shù)較HI組及HI+Rg1+U0126組明顯降低（P＜0.05）。 結(jié)論Rg1通過Erk1/2信號(hào)通路增強(qiáng)并穩(wěn)定HIBD誘導(dǎo)的HIF-1α表達(dá)，從而抑制Caspase-3活化，減輕新生鼠HIBD后神經(jīng)元凋亡。