目的 通過檢測異染色質(zhì)蛋白1α（HP1α）在DNA損傷后的磷酸化狀況，介紹一種用磷酸化標(biāo)簽(phos-tag)試劑檢測磷酸化蛋白質(zhì)的新方法。 方法 取雄雌C57小鼠交配后孕13.5 d胚胎，分離并原代培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞。對照組及實驗組(6個損傷時間點)各取2個100 mm培養(yǎng)皿的細(xì)胞進(jìn)行實驗，實驗組細(xì)胞用喜樹堿進(jìn)行DNA損傷；對照組用等量的二甲基亞砜處理。用摻入phos-tag的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白并轉(zhuǎn)印，將膜用抗HP1α的抗體孵育，用偶聯(lián)辣根過氧化物酶的抗體做二抗，通過成像系統(tǒng)檢測蛋白。 結(jié)果 實驗組存在一條與HP1α有明顯不同遷移率的磷酸化HP1α條帶，與對照組相比DNA損傷后磷酸化HP1α含量一過性增多。 結(jié)論 HP1α被DNA損傷誘導(dǎo)為磷酸化狀態(tài)，提示其可能在DNA修復(fù)過程中扮演重要角色。 Phos-tag 蛋白質(zhì)印跡法可采用普通抗體檢測磷酸化的蛋白，是一種簡便易行的檢測未知磷酸化蛋白質(zhì)的新方法。
目的 探究慢性腎臟?。╟hronic kidney disease, CKD）住院患者的營養(yǎng)不良現(xiàn)狀，分析其影響因素并構(gòu)建預(yù)測模型，為中國 CKD 住院患者的臨床營養(yǎng)支持與干預(yù)治療提供本土化理論依據(jù)和更加便捷的風(fēng)險預(yù)測指標(biāo)及模型。方法 采取便利抽樣，選取 2019 年 1 月－10 月四川大學(xué)華西醫(yī)院腎臟內(nèi)科的 CKD 住院患者為研究對象，采取一般資料問卷、營養(yǎng)風(fēng)險篩查 2002 量表、華西心晴指數(shù)問卷進(jìn)行調(diào)查，采用單因素分析、多因素 logistic 回歸分析探討 CKD 住院患者營養(yǎng)不良的危險因素，并建立預(yù)測模型進(jìn)行受試者操作特征曲線分析、Bootstrap 多次擬合驗證。結(jié)果 共發(fā)放 1118 份問卷，回收有效問卷 1059 份。1059 例 CKD 住院患者中，207 例（19.5%）有營養(yǎng)風(fēng)險。多因素 logistic 回歸分析顯示，CKD 分期［比值比（odds ratio, OR）=1.874，95%置信區(qū)間（confidence interval, CI）（1.631，2.152），P<0.001］、年齡［OR=1.015，95%CI（1.003，1.028），P=0.018］、華西心晴指數(shù)［OR=1.024，95%CI（1.002，1.048），P=0.033］是 CKD 住院患者營養(yǎng)不良的獨立危險因素，血清白蛋白［OR=0.880，95%CI（0.854，0.907），P<0.001］是 CKD 住院患者營養(yǎng)不良的獨立保護(hù)因素。多因素 logistic 回歸分析預(yù)測模型檢驗示：一致性指數(shù)為 0.977，標(biāo)準(zhǔn)差為 0.021，P<0.05；曲線下面積為 0.977。結(jié)論 CKD 住院患者存在較高的營養(yǎng)不良比例，CKD 分期、年齡、心理狀況、血清白蛋白是 CKD 住院患者營養(yǎng)不良的影響因素，基于上述指標(biāo)構(gòu)建的多因素 logistic 回歸分析模型具有較好的預(yù)測效果，有望為存在營養(yǎng)不良的中國 CKD 患者實施早期營養(yǎng)干預(yù)進(jìn)而改善其臨床結(jié)局和生活質(zhì)量提供助力。