目的 探討大鼠血清體外擴增BMSCs 的可能性，及淤膽大鼠血清和肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）體外誘導其分化為肝細胞，解決肝組織工程細胞來源短缺的可行性。 方法 取6 周齡健康雌性Wistar 大鼠股骨和脛骨骨髓細胞，分離、純化并傳代培養(yǎng)BMSCs。取12 ～ 14 周齡健康Wistar 大鼠40 只，隨機分為兩組（n=20），制備正常及淤膽大鼠血清。取第3 代BMSCs 按培養(yǎng)液不同分組：A 組，DMEM 加10%FBS；B 組，肝細胞生長培養(yǎng)基（hepatocyte growth medium，HGM）加5%FBS；C 組，HGM 加5% 正常大鼠血清；D 組，HGM 加5% 淤膽大鼠血清；E 組，HGM 加5% 淤膽大鼠血清、25 μg/L HGF。觀察各組誘導培養(yǎng)過程中的細胞形態(tài)變化，MTT 法測定細胞生長曲線，免疫細胞化學法檢測甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）、細胞角蛋白18（cytokeratin 18，CK18）表達，高碘酸- 希夫染色檢測糖原表達，脲酶- 谷氨酰脫氫酶法檢測上清液尿素含量。 結(jié)果 誘導培養(yǎng)過程中D、E 組出現(xiàn)多角形及雙核細胞，A、B、C 組細胞形態(tài)無明顯變化。MTT 生長曲線顯示C 組細胞生長速度最快，B 組最慢，與A、D、E 組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05），A、D、E 組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。D、E 組于誘導培養(yǎng)7 d 開始出現(xiàn)AFP 及CK18 陽性表達，14 d 開始出現(xiàn)糖原陽性表達，同時間點E 組陽性表達率高于D 組（P lt; 0.05）；D、E 組上清液中尿素含量隨誘導時間延長逐漸升高，同時間點E 組高于D 組（P lt; 0.05）。各時間點A、B、C 組均未見AFP、CK18、糖原陽性表達，尿素濃度無明顯變化。 結(jié)論 正常大鼠血清能明顯促進BMSCs 增殖；淤膽大鼠血清對BMSCs 有一定促增殖作用，且能有效誘導其向肝細胞分化；聯(lián)合使用淤膽血清和HGF 能提高細胞分化率。
目的 系統(tǒng)評價國內(nèi)有關套扎治療與硬化劑治療肝硬化食管靜脈曲張出血的有效性和安全性。方法 計算機檢索CBMdisc（1979～2006）和CNKI（1994～2006），收集有關套扎與硬化劑比較治療肝硬化食管靜脈曲張出血的隨機對照試驗（RCT）和半隨機對照試驗（CCT），由兩名評價員獨立對納入文獻進行質(zhì)量評價和數(shù)據(jù)提取，并使用RevMan4.2.7軟件進行Meta分析。結(jié)果 共納入9個RCT，包括1 371例患者，其中套扎組688例，硬化劑組683例。Meta分析結(jié)果顯示：對于死亡率，兩組間差異有統(tǒng)計學意義[RR=0.60，95%CI（0.36，0.98）]，套扎治療組低于硬化劑治療組；對于急診止血率、出血復發(fā)率和并發(fā)癥發(fā)生率，套扎治療組也顯示出更好的療效趨勢；而對于曲張靜脈消失率和曲張靜脈復發(fā)率，硬化劑治療組則顯示出更好的療效趨勢。結(jié)論 在治療肝硬化食管靜脈曲張出血患者時，套扎較硬化劑治療顯示出更好的療效及更少的并發(fā)癥。但由于納入研究質(zhì)量不高，這一結(jié)論的強度受到一定的限制，尚需今后開展高質(zhì)量隨機對照試驗來進一步驗證。
【摘要】 目的 探討丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS4B對肝細胞內(nèi)p53表達的影響，以及在肝癌發(fā)生中的作用與機制。 方法 設置空白對照組、空白載體組、轉(zhuǎn)染NS4B組、轉(zhuǎn)染p53組、共轉(zhuǎn)染NS4B及p53組。使用脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染法，轉(zhuǎn)染丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白重組質(zhì)粒PCXN2-NS4B及突變型p53基因重組質(zhì)粒pC53-CX22AN3進入Chang肝細胞內(nèi)，并用G418篩選獲得穩(wěn)定表達細胞。采用免疫細胞化學法檢測p53表達率。 結(jié)果 空白對照組無p53表達，空白載體組及轉(zhuǎn)染NS4B組呈弱陽性表達，轉(zhuǎn)染p53組及共轉(zhuǎn)染組呈陽性表達；轉(zhuǎn)染p53組、共轉(zhuǎn)染組分別與空白對照組、空白載體組及轉(zhuǎn)染NS4B組比較，差異均有統(tǒng)計學意義 （Plt;0.05）。 結(jié)論 NS4B可能抑制p53表達，也可能阻止其進入細胞核，但NS4B與突變型p53關系不明確。NS4B導致肝細胞異常增生，誘導肝癌發(fā)生可能不依賴p53的異常表達及突變。【Abstract】 Objective To investigate the effect of hepatitis C Virus on-structural protein 4B(HCV NS4B) on expression of p53 in hepatic cell, and to study the role and mechanism in development of hepatocellular carcinoma. Methods The experiment was divided into negative control, pure vector PCXN2, PCXN2-NS4B, PC53-cx22AN3, and co-transfection group. Recombinant plasmid PCXN2-NS4B and mutant p53 gene--PC53-cx22AN3, PC53-cx22AN3 with PCXN2-NS4B, blank vectors were transfected into Chang liver cell by liposome-mediated transfection respectively. Positive cells were screened by G418. The expression rate of p53 was measured by immunocytochemistry. Result No expression rate of p53 gene in control group was found, lower positive expression in group PCXN2 and PCXN2-NS4B. The expression of p53 gene in group PC53-CX22AN3 and co-transfection was ber than the others (Plt;0.005). Conclusion HCV-NS4B may inhibit the expression of p53 gene, and it may play a crucial role in inhibiting p53 transfered to hepatic cells nuclear. But it isn’t clear that the. HCV-NS4B can enhance the role of mutant p53 gene. It suggested that HCV-NS4B induce proliferation of hepatic cell not through regulating the expression of p53.