目的 探討壓應(yīng)力對體外培養(yǎng)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖和凋亡的影響。方法 應(yīng)用組織塊培養(yǎng)法獲取人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞。以簡易氣控加壓細(xì)胞培養(yǎng)儀給細(xì)胞 施5、10、15、25、50、100、150mmHg(1mmHg=0.133 kPa)壓力(n=6),持續(xù)4 d,作為實驗組;不施壓設(shè)為對照組(n=6)。分別以MTT法測定細(xì)胞吸光度(A)值并計算生長抑制率(inhibition ratio,IR),流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞生長周期及Annexin-V-PI標(biāo)記法測定細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 5、10、15、25、50、100、150mmHg壓力組及對照組,細(xì)胞A值分別為0.228±0.004、0.226±0.003、0.213±0.005、0.180±0.005、0.172±0.007、0.165±0.004、0.164±0.004、0.230±0.005,IR分別為0.8%、2.0%、7.3%、21.7%、25.2%、28.2%、28.2%和0。DNA G1期細(xì)胞百分比分別為71.80%±0.44%、72.32%±0.40%、74.56%±1.01%、82.82%±2.76%、86.77%±2.06%、88.23%±1.27%、89.11%±1.74%、71.46%±0.49%,早期細(xì)胞凋亡率分別為4.22%±0.49%、5.12%±0.74%、8.58%±0.79%、19.28%±140%、25.60%±1.21%、35.80%±2.39%、36.18%±2.38%、4.00%±0.36%。其中5、10mmHg壓力組上述各指標(biāo)與對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P> 0.05);15、25、50、100、150mmHg壓力組各指標(biāo)與對照組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);10、15、25、50mmHg壓力組細(xì)胞A值和G1期細(xì)胞百分比組間比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01), 50、100、150 mmHg壓力組各組間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);10、15、25、50、100mmHg壓力組早期細(xì)胞調(diào)亡率組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01), 100、150mmHg壓力組組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論 適當(dāng)?shù)某掷m(xù)壓應(yīng)力對增生性瘢痕成纖維細(xì)胞具有誘導(dǎo)凋亡、抑制增殖的復(fù)合效應(yīng),是臨床上壓迫療法治療增生性瘢痕的重要機(jī)制之一。
目的 觀察創(chuàng)緣表皮干細(xì)胞在全層皮膚創(chuàng)面愈合過程中的分布特征,初步探討其在創(chuàng)面愈合過程中的作用。方法 將已行BrdU活體標(biāo)記的 20只Wistar大鼠背部制備4個為2.4 cm 2 的全層皮膚創(chuàng)面,分別于傷后3、7、14和21 d(n=5)行組織學(xué)檢查,動態(tài)觀察創(chuàng)面愈合情況,并行β1整合素、角蛋白19(K19)與BrdU免疫組織化學(xué)法檢測表皮干細(xì)胞在創(chuàng)面愈合過程中的分布情況。結(jié)果 創(chuàng)面愈合率為83.75%(61/80)。所有創(chuàng)面肉芽組織于各時相點均未見β1整合素、K19陽性細(xì)胞出現(xiàn),但于創(chuàng)緣表皮的棘層或顆粒層均出現(xiàn)散在的β1整合素、K19和BrdU陽性細(xì)胞。且越接近創(chuàng)面陽性細(xì)胞越密集,組織學(xué)上與基底層的陽性細(xì)胞無直接聯(lián)系;其數(shù)量隨創(chuàng)面的縮小逐漸增加,直至創(chuàng)面愈合。創(chuàng)面上皮化后,陽性細(xì)胞逐漸減少,并隨愈合創(chuàng)面表皮腳的出現(xiàn)而消失。而感染創(chuàng)面的陽性細(xì)胞數(shù)量明顯少于未感染創(chuàng)面。結(jié)論 表皮干細(xì)胞能主動參與創(chuàng)面的修復(fù),創(chuàng)緣的表皮干細(xì)胞異位的主要功能可能是促進(jìn)創(chuàng)面再上皮化。