目的 研究玻璃體腔內(nèi)注射基質(zhì)金屬蛋白酶-3（MMP-3）對兔眼玻璃體視網(wǎng)膜界面粘附作用及玻璃體凝膠狀態(tài)的影響. 方法 取健康成年灰兔24只，隨機分成實驗A、B、C組和對照組，每組各6只兔（12只眼）。實驗A、B、C組分別注射含5、10、20 ng的MMP-3溶液0.1 ml，對照組注射等量的平衡鹽溶液，于注射前后行視網(wǎng)膜電圖（ERG）、熒光素眼底血管造影（FFA）及光學(xué)顯微鏡、透射電子顯微鏡檢查。 結(jié)果 實驗B組于注射后1周 第1次發(fā)現(xiàn)臨床可見的玻璃體后脫離（PVD）及局限性玻璃體液化；實驗A、B組于注射后15周分別有1、3只眼發(fā)現(xiàn)臨床可見的PVD，但玻璃體液化進展緩慢。組織病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，實驗A、B組于注射后60 min分別有1、3只眼形成部分性PVD；注射后1周全部兔眼形成部分性PVD；注射后15周分別有1、3只眼形成完全性PVD，但其空隙比較狹窄。實驗C組于注射早期可見視網(wǎng)膜內(nèi)層炎性細胞浸潤及視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)的破壞，F(xiàn)FA結(jié)果顯示后期有熒光素滲漏。對照組有1只眼于注射后15周可見局限的PVD。 結(jié)論 MMP-3能在短時間內(nèi)造成玻璃體視網(wǎng)膜間的分離且具有較弱的促玻璃體液化作用；10 ng的MMP-3玻璃體腔內(nèi)注射對兔眼是一個安全有效的劑量，有可能作為玻璃體手術(shù)的輔助手段。（中華眼底病雜志，2004，20：67-132）
目的 觀察目的基因在玻璃體增生膜的表達情況，以探討基因治療增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy,PVR) 的可行性。 方法 用beta;-半乳糖苷酶基因作為報告基因，以逆轉(zhuǎn)錄病毒載體攜帶，直接注入PVR模型眼玻璃體腔中，觀察其在PVR 眼各組織表達情況。 結(jié)果 基因轉(zhuǎn)染后可見玻璃體增生膜組織有轉(zhuǎn)染基因表達，表達主要位于增生膜的表面，而視網(wǎng)膜組織及其它眼組織未見表達。 結(jié)論 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體用于PVR的基因治療有靶向性作用，表明PVR基因治療具有可行性。 (中華眼底病雜志,2001,17:224-226)
目的 觀察玻璃體腔注射粉防己堿對實驗性鼠脈絡(luò)膜新生血管的抑制作用及其對視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)和功能的影響。 方法 應(yīng)用半導(dǎo)體激光（波長810 nm，曝光時間0.1 s，光斑直徑100 mu;m，能量120 mW）光凝誘導(dǎo)20只Brown Norway (BN) 大鼠20只眼的脈絡(luò)膜新生血管(CNV)模型。將大鼠隨機分為實驗組和對照組，每組各10只大鼠20只眼，實驗組大鼠激光光凝后0、3 d玻璃體注射0.05 ml濃度為3.21 mu;mol/L的粉防己堿藥液，對照組玻璃體內(nèi)注射同體積的生理鹽水；兩組均在激光光凝14 d后行熒光素眼底血管造影，觀察其新生血管的發(fā)生率。另有5只健康BN大鼠，每只鼠右眼玻璃體內(nèi)注射入0.05 ml濃度為3.21 mu;mol/L的粉防己堿藥液，左眼注射同體積生理鹽水，第一次注藥前及注藥后1 h、1 d和第二次注藥后1 h、1、7、14 d行視網(wǎng)膜電圖（ERG）檢查，第二次注藥后14 d行光學(xué)、電子顯微鏡檢查。 結(jié)果 實驗組大鼠CNV發(fā)生率為23.26%，明顯低于對照組63.33%（Plt;0.01）。3.21 mu;mol/L的粉防己堿玻璃體內(nèi)注射b波波幅比率與注藥前相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05)。光學(xué)、電子顯微鏡檢查未見明顯細胞異常。 結(jié)論 粉防己堿能抑制鼠CNV形成；3.21 mu;mol/L濃度的粉防己堿玻璃體內(nèi)注射對視網(wǎng)膜無毒性作用。 (中華眼底病雜志, 2006, 22, 242-244)
目的 觀察轉(zhuǎn)錄因子E2F的圈套寡核苷酸（decoy ODNs）對培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜色素上皮(HRPE)細胞增生的影響。 方法 在脂質(zhì)體lipofectamineTM2000介導(dǎo)下將不同濃度的E2F decoy ODNs或錯義decoy ODNs轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的HRPE細胞中，甲基四唑鹽比色 (MTT) 法檢測其對HRPE細胞增生活性的影響，凝膠遷移率變動分析（EMSA）法檢測E2F decoy ODNs與轉(zhuǎn)錄因子E2F的競爭結(jié)合活性。 結(jié)果 0.2 μmol/L E2F decoy ODNs顯著抑制HRPE細胞的增生（P=0.002），并在低濃度時呈劑量依賴關(guān)系。錯義decoy則無此作用。EMSA檢測結(jié)果顯示，E2F decoy ODNs拮抗轉(zhuǎn)錄因子E 2F的結(jié)合活性。 結(jié)論 E2F decoy ODNs能序列特異性地抑制轉(zhuǎn)錄因子E2F 的結(jié)合活性，進而抑制HRPE細胞的增生活性。 （中華眼底病雜志，2004，20：182-185）
目的 研究視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)細胞中增生細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表達及其反義寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)對其表達和細胞增生的抑制作用，為增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy,PVR)治療探索基因治療新途徑。 方法 (1)體外培養(yǎng)兔眼RPE細胞，在不同時間采用鏈霉親合素-生物素化過氧化物酶復(fù)合物(streptoavidin-biotinenzyme complex,SABC)免疫組織化學(xué)法檢測PCNA的表達;(2)脂質(zhì)體介導(dǎo)下不同濃度的PCNA AS-ODN和正義寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,S-ODN)分別作用于體外培養(yǎng)的RPE細胞，采用免疫組織化學(xué)方法檢測PCNA的表達;(3)四唑鹽比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)檢測在不同濃度的PCNA AS-ODN和S-ODN作用下RPE細胞生長活性及其生長抑制率。 結(jié)果 (1)體外培養(yǎng)兔眼RPE細胞表達PCNA，表達高峰為培養(yǎng)后48 h ;(2)在0.28、1.12 μmol/L AS-ODN 作用下，PCNA的表達明顯受抑制;(3)0.28、1.12 μmol/L的PCNA AS-ODN 能明顯抑制RPE細胞增生活性，并呈劑量依賴性，其生長抑制率分別達53%、81%。 結(jié)論 一定濃度PCNA AS-ODN能序列特異性地抑制RPE細胞PCNA表達和增生活性，有望進一步用于PVR的治療實驗研究。 (中華眼底病雜志, 2002, 18: 231-233)
目的 探討轉(zhuǎn)錄因子E2F1在人視網(wǎng)膜色素上皮 (retinal pigment epithelium，RPE) 細胞中的表達及活化。 方法 培養(yǎng)的人RPE細胞經(jīng)同步化后分為兩組：無血清組和含20%新生牛血清的血清組。采用Western blot蛋白印跡法檢測兩組細胞中轉(zhuǎn)錄因子E2F1蛋白的表達。用凝膠遷移率變動分析法（EMSA）檢測其與DNA的結(jié)合活性。 結(jié)果 在RPE細胞核抽提物中檢測到相對分子質(zhì)量為60×103的E2F1蛋白，血清刺激使其表達增加(P＜0.001）。EMSA分析示在血清刺激下，E2F1核蛋白與DNA的結(jié)合活性增強。 結(jié)論 轉(zhuǎn)錄因子E2F1存在于人RPE細胞的細胞核中，血清刺激可誘導(dǎo)其表達增加，并增強其與DNA的結(jié)合活性，發(fā)揮其調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的作用。 (中華眼底病雜志, 2002, 18: 224-226)
目的 探討白細胞介素-12(interleukin-12，IL-12)、白細胞介素-2(interleukin-2，IL-2)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)在增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(prolifｅrative vitreoretinopathy,PVR)發(fā)病中的作用。 方法 PVR-18只眼于冷凍及玻璃體切割前經(jīng)睫狀體平坦部在顯微鏡直視下抽取玻璃體，單純黃斑裂孔性視網(wǎng)膜脫離7只眼于玻璃體內(nèi)注氣前抽取玻璃體，對照眼4只于睫狀體平坦部抽取玻璃體。玻璃體取出后－70 ℃凍存。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測其IL-12、IL-2及TNF，其結(jié)果用t檢驗、線性回歸進行比較。 結(jié)果 ①PVR眼玻璃體 中IL-12、IL-2、TNF的濃度(分別為73.5plusmn;64.4、456.3plusmn;347.0、460.7plusmn;437.6)與病變程度呈正相關(guān)性；②PVR組中IL-12、IL-2、TNF的濃度比單純黃斑裂孔性視網(wǎng)膜脫離組相應(yīng)值(分別為19.4plusmn;12.9、92.9plusmn;71.4、44.2plusmn;42.2)高(Plt;0.01)；③單純黃斑裂孔性視網(wǎng)膜脫離組中IL-12、IL-2、TNF的濃度比對照組相應(yīng)值（未檢測出IL-12、IL-2、TNF，各值為0）高。 結(jié)論 細胞因子IL-12、IL-2、TNF在PVR的發(fā)病中有一定的作用。 (中華眼底病雜志,1999,15:75-77)