目的探討部分肝移植術(shù)后移植肝的再生問(wèn)題。方法建立大鼠部分肝移植模型，實(shí)驗(yàn)分為肝切除組（PLR組）、全肝移植組（OLT組）和部分肝移植組（POLT組）3組，分別于術(shù)后不同時(shí)間段取外周血檢測(cè)總膽紅素和谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平； 取肝組織行組織學(xué)檢查及流式細(xì)胞儀檢測(cè)移植肝的增殖活性。結(jié)果移植術(shù)后1 w，肝功能酶學(xué)指標(biāo)增高，后逐步降低； 組織學(xué)檢查術(shù)后可見(jiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn)，特別在門靜脈周圍匯管區(qū)，肝實(shí)質(zhì)可見(jiàn)點(diǎn)狀壞死。術(shù)后1個(gè)月可見(jiàn)膽管增殖； PLR組和POLT組還可見(jiàn)二倍體和多倍體的肝細(xì)胞，中央小靜脈、肝竇和葉間靜脈輕度擴(kuò)張。 PLR組和POLT組肝細(xì)胞均增生活躍，3組分別于術(shù)后1 d、2 d、4 d達(dá)到增殖高峰。結(jié)論部分移植肝和肝切除后肝臟具有同樣的增殖活性，但增殖高峰POLT組及OLT組均要晚于肝切除后的肝臟，但移植組增殖周期長(zhǎng)。這可能是由于手術(shù)操作及肝臟缺血再灌注損傷所致。而持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)可能與受體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的細(xì)胞因子和激素的調(diào)控相關(guān)。
目的建立穩(wěn)定的大鼠部分肝移植動(dòng)脈化模型，并觀察術(shù)后病理變化。方法采用改良二袖套法建立大鼠部分肝移植模型，并進(jìn)行供體的腹腔動(dòng)脈與受體的右腎動(dòng)脈端端吻合，采用肝穿刺活檢技術(shù)于術(shù)后1 d、2 d、4 d及7 d行肝活檢。結(jié)果動(dòng)物術(shù)后1周存活率為 85.4%。病理組織學(xué)檢查術(shù)后第2天可見(jiàn)細(xì)胞核有絲分裂象，第4天偶見(jiàn)細(xì)胞核有絲分裂象，第4、7天可見(jiàn)雙核細(xì)胞。結(jié)論通過(guò)技術(shù)改進(jìn)，提高了模型建立的穩(wěn)定性。肝穿刺活檢技術(shù)是進(jìn)行大鼠肝移植術(shù)后相關(guān)問(wèn)題研究的簡(jiǎn)便、安全、可行的方法。肝動(dòng)脈的重建可能加速了移植肝的術(shù)后再生。
【摘要】目的報(bào)道一種用雙功能螯合劑BAT與鼠單克隆抗體Fab’片段行點(diǎn)特異性交聯(lián)的新方法。方法通過(guò)位于Fab’鉸鏈區(qū)、遠(yuǎn)離抗原結(jié)合位點(diǎn)的活性巰基（-SH）直接與BAT相交聯(lián)。用簡(jiǎn)單的兩步法制備B43單抗的Fab’片段。首先單抗用胃蛋白酶處理, 產(chǎn)生穩(wěn)定的F(ab’)2 片段，然后 F(ab’)2經(jīng)半胱氨酸還原后產(chǎn)生Fab’片段，最后Fab’片段直接與BAT交聯(lián)。結(jié)果每個(gè)Fab’分子平均含1.8個(gè)-SH基團(tuán)， 74%的Fab’片段可與BAT生成交聯(lián)物，平均每個(gè)Fab’分子攜帶1.28個(gè)BAT。經(jīng)檢測(cè)，F(xiàn)(ab’)2、Fab’ 及 Fab’-BAT 均保持著良好的免疫活性。結(jié)論該交聯(lián)法簡(jiǎn)單、高效，為雙功能螯合劑BAT與鼠單抗Fab’片段的交聯(lián)提供了一個(gè)新途徑。
目的 總結(jié)Wilson’s病患者親體肝移植和全肝移植術(shù)后血清銅藍(lán)蛋白及尿銅水平的恢復(fù)情況。 方法 自2000年9月至2003年11月我院為26例Wilson’s病患者施行了肝移植術(shù)，均并發(fā)終末期肝硬變，其中3例發(fā)生急性肝功能衰竭。術(shù)前血清銅藍(lán)蛋白和尿銅水平分別為（124.8±22.8） mg/L和（1 524.8±328.6） μg/24h，其中行活體部分肝移植22例，全肝移植4例，親體肝移植供體術(shù)前血清銅藍(lán)蛋白水平為（230.4 ±29.6） mg/L，尿銅水平均＜50 μg/24h。 結(jié)果 所有患者手術(shù)順利，全肝移植患者術(shù)后1、3、6及12個(gè)月血清銅藍(lán)蛋白和尿銅水平分別為（320.2±36.8） mg/L、（380.4±45.6） mg/L、（360.5±37.6） mg/L、（356.2±27.6） mg/L和（240.4±22.8） μg/24h、（86.5±10.6） μg/24h、（54.2±6.8） μg/24h及（46.8±3.4） μg/24h； 親體肝移植患者術(shù)后1、3、6及12個(gè)月血清銅藍(lán)蛋白和尿銅水平分別為（216.8 ±20.4） mg/L、（248.5±32.6） mg/L、（285.4±44.3) mg/L、（260.2±36.6） mg/L和（380.8±37.6） μg/24h、（150.6±24.5） μg/24h、（75.5±9.6） μg/24h及（60.3±5.8） μg/24h。 結(jié)論 全肝移植和親體肝移植是治療Wilson’s病的有效方法，不僅解決肝功能不全的問(wèn)題，而且術(shù)后血清銅藍(lán)蛋白及尿銅水平均可恢復(fù)正常。
目的報(bào)告1例分期肝腎聯(lián)合移植，并探討分期肝腎聯(lián)合移植治療技術(shù)及其效果。方法對(duì)1例晚期乙型肝炎肝硬變伴腎功能衰竭患者實(shí)施原位肝移植術(shù)，所用免疫抑制方案為環(huán)孢霉素A與甲基強(qiáng)的松龍聯(lián)合用藥，于肝移植術(shù)后3個(gè)月行腎移植術(shù)。結(jié)果肝移植術(shù)后肝功能恢復(fù)良好，但腎功能持續(xù)惡化，經(jīng)血液透析治療無(wú)效而行腎移植術(shù)?；颊吒文I聯(lián)合移植術(shù)后9個(gè)月，一般情況良好，移植肝和移植腎功能均正常。結(jié)論對(duì)肝移植后各種原因?qū)е碌哪I功能衰竭，當(dāng)血液透析治療無(wú)效時(shí)可再行腎移植術(shù)。同時(shí)，免疫抑制劑用量并未增加。
目的總結(jié)活體肝移植圍手術(shù)期處理的經(jīng)驗(yàn)。方法對(duì)該院2001年1月至2002年12月完成的15例次（13例）活體肝移植圍手術(shù)期的處理情況進(jìn)行回顧性分析。 結(jié)果所有病例手術(shù)均獲成功。13例供體術(shù)后均順利康復(fù)，除1例在手術(shù)后1個(gè)月因拔除T管發(fā)生膽瘺外，其余均未出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥； 受體生存率為92.3%(12/13)，已健康生存2個(gè)月～2年； 移植物存活率為86.7%（13/15）。1例成人肝豆?fàn)詈俗冃曰颊哂谛g(shù)后72 d死于不可逆轉(zhuǎn)的嚴(yán)重排斥反應(yīng)。術(shù)后并發(fā)肝動(dòng)脈血栓形成2例，另1例再次行減體積肝移植，1例再次行全肝移植，均獲長(zhǎng)期生存； 發(fā)生嚴(yán)重排斥反應(yīng)1例，ARDS 2例，細(xì)菌和（或）病毒感染6例，大量胸腔積液7例，膽瘺1例。結(jié)論圍手術(shù)期處理是活體肝移植術(shù)的關(guān)鍵之一，完善的圍手術(shù)期處理是肝移植成功的必要條件。
目的探索利用磁性細(xì)胞分離(MACS)系統(tǒng)高效、快速地分離大鼠脾臟CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。方法采用免疫磁珠兩步法分離大鼠脾臟內(nèi)的CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞, 首先采用“雞尾酒”抗體和抗IgG磁珠陰性分選CD4+ T細(xì)胞，再用抗CD25PE抗體和抗PE磁珠陽(yáng)性分選獲得CD4+CD25+T 細(xì)胞。分離后的細(xì)胞經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)分離純度； 臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞存活率； 體外增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)CD4+CD25-T細(xì)胞的免疫抑制作用。結(jié)果陰性分選獲得的CD4+T細(xì)胞純度為（83.6±2.5）%（79%~87%）, 陽(yáng)性分選后獲得的CD4+CD25+T細(xì)胞純度為（90.2±1.8）%（86%~93%）, 細(xì)胞存活率為（92.8±3.4）%（92%~95%）, 體外增殖實(shí)驗(yàn)表明，CD4+CD25+T細(xì)胞能明顯抑制CD4+CD25-T 細(xì)胞的增殖（P＜0.01）。 結(jié)論采用MACS系統(tǒng)陰性加陽(yáng)性分選可以高效、快速地獲得理想純度和有免疫抑制功能的大鼠CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。