【摘 要】 目的 應(yīng)用軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)作為支架材料,按照組織工程的原理再生軟骨,為修復(fù)軟骨缺損探索新的途徑。 方法 取新西蘭大耳白兔1 只,體重2.4 kg,按改良Courtman 法對(duì)兔耳軟骨行脫細(xì)胞處理后用于實(shí)驗(yàn)。選用純種6 月齡新西蘭大耳白兔18 只,雌雄不限,體重2.4 ~ 2.6 kg。每只耳形成2 處1 cm × 1 cm 軟骨缺損,按修復(fù)方式不同隨機(jī)分為3 組,每組24 處缺損。A 組,軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)加軟骨膜;B 組,軟骨脫細(xì)胞基質(zhì);C 組軟骨膜,作為對(duì)照。術(shù)后每日觀察兔耳修復(fù)區(qū)的大體變化,并分別于4、12 周每組處死3 只動(dòng)物,于修復(fù)區(qū)切取標(biāo)本,行HE 染色、藏紅花紅- 奧爾新藍(lán)染色、Ⅱ型膠原基因探針原位雜交實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果 術(shù)后4 周內(nèi)A、B 組大體形態(tài)無(wú)明顯改變;術(shù)后12 周可見修復(fù)區(qū)輕度增厚,觸摸時(shí)質(zhì)地較正常軟骨稍硬。C 組術(shù)后2 周,2 只2 處修復(fù)區(qū)形成痂皮,術(shù)后5 周痂皮脫落形成穿孔。術(shù)后4 周,A、B 組HE 染色可見軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)周邊有輕度的炎性細(xì)胞浸潤(rùn),以淋巴細(xì)胞為主,未形成包囊,藏紅花紅- 奧爾新藍(lán)染色均陰性;C 組軟骨缺損處的軟骨膜塌陷,無(wú)細(xì)胞增殖現(xiàn)象;各組修復(fù)區(qū)均未見Ⅱ型膠原基因探針原位雜交顯色。術(shù)后12周,A 組HE 染色示部分軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)內(nèi)有新生細(xì)胞,細(xì)胞排列不規(guī)律,ECM 嗜堿性增強(qiáng),藏紅花紅- 奧爾新藍(lán)染色呈陽(yáng)性,Ⅱ型膠原基因原位雜交顯色示新生細(xì)胞內(nèi)均有大片棕黃色陽(yáng)性染色區(qū)域;B 組HE 染色示軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)無(wú)吸收現(xiàn)象,周邊無(wú)包囊,炎性細(xì)胞消失,藏紅花紅- 奧爾新藍(lán)染色呈陰性,未見Ⅱ型膠原基因原位雜交顯色;C 組HE 染色示近軟骨斷端處可見部分形成新生組織,藏紅花紅- 奧爾新藍(lán)染色呈陽(yáng)性,Ⅱ型膠原基因原位雜交顯色可見棕黃色陽(yáng)性染色細(xì)胞。 結(jié)論 脫細(xì)胞軟骨可誘導(dǎo)軟骨膜細(xì)胞向其中生長(zhǎng)而重建軟骨,軟骨膜和脫細(xì)胞軟骨復(fù)合移植是軟骨組織工程的另一種選擇。