目的建立穩(wěn)定的大鼠部分肝移植動(dòng)脈化模型,并觀察術(shù)后病理變化。方法采用改良二袖套法建立大鼠部分肝移植模型,并進(jìn)行供體的腹腔動(dòng)脈與受體的右腎動(dòng)脈端端吻合,采用肝穿刺活檢技術(shù)于術(shù)后1 d、2 d、4 d及7 d行肝活檢。結(jié)果動(dòng)物術(shù)后1周存活率為 85.4%。病理組織學(xué)檢查術(shù)后第2天可見(jiàn)細(xì)胞核有絲分裂象,第4天偶見(jiàn)細(xì)胞核有絲分裂象,第4、7天可見(jiàn)雙核細(xì)胞。結(jié)論通過(guò)技術(shù)改進(jìn),提高了模型建立的穩(wěn)定性。肝穿刺活檢技術(shù)是進(jìn)行大鼠肝移植術(shù)后相關(guān)問(wèn)題研究的簡(jiǎn)便、安全、可行的方法。肝動(dòng)脈的重建可能加速了移植肝的術(shù)后再生。
目的探討S腺苷蛋氨酸在肝硬變大鼠行部分肝葉切除后對(duì)肝細(xì)胞的再生及肝功能的影響。方法用40%四氯化碳誘導(dǎo)Wistar大 鼠肝硬變模型,而后將成模大鼠隨機(jī)分為肝硬變組(n=20)、治療1組〔S腺苷蛋氨酸10 mg/(kg·d),n=16〕及治療2組〔S腺 苷蛋氨酸20 mg/(kg·d),n=16〕,另設(shè)正常對(duì)照組(n=16)。4組大鼠均行30%左右肝葉切除。自手術(shù)當(dāng)天起,治療1、2組分別肌 注S腺苷蛋氨酸10 mg/(kg·d)和20 mg/(kg·d),對(duì)照組肌注生理鹽水5 ml/d,共15 d。4組大鼠分別于術(shù)后15 d和30 d處死一 半,取血檢測(cè)Alb、ALT、TB、TBA及TNFα,同時(shí)在光鏡及電鏡下觀察肝組織的病理改變及超微結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果肝硬變組術(shù)后15 d和 30 d的TB、TBA、ALT及TNFα水平明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01), Alb水平明顯低于正常對(duì)照組(P<0.01); 治療1、2組術(shù)后 15 d的上述4項(xiàng)指標(biāo)高于正常對(duì)照組(P<0.05),但明顯低于肝硬變組(P<0.01),Alb水平低于正常對(duì)照組(P<0.05),卻明顯高 于肝硬變組(P<0.01); 治療1、2組術(shù)后30 d上述各指標(biāo)均接近正常對(duì)照組水平。TNFα和TB、TBA、ALT呈顯著正相關(guān)(r值分別 為 0.99、0.97、0.93, P<0.01),與Alb呈顯著負(fù)相關(guān)(r值為-0.88,P<0.01)。治療組光鏡觀察見(jiàn)肝小葉結(jié)構(gòu)基本完整,有較 多的雙核肝細(xì)胞以及少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),電鏡觀察見(jiàn)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及糖原增生,線粒體豐富。結(jié)論S腺苷蛋氨酸能促進(jìn)肝葉切除術(shù)后 肝細(xì)胞的再生,可改善肝功能。
目的探討激素與肝再生的關(guān)系。方法收集和復(fù)習(xí)近年的有關(guān)文獻(xiàn)。結(jié)果激素與肝再生的關(guān)系十分密切,參與肝再生的過(guò)程,起促進(jìn)或抑制肝再生的作用。結(jié)論激素是調(diào)節(jié)肝再生的重要因素之一。
目的探討部分肝移植術(shù)后移植肝的再生問(wèn)題。方法建立大鼠部分肝移植模型,實(shí)驗(yàn)分為肝切除組(PLR組)、全肝移植組(OLT組)和部分肝移植組(POLT組)3組,分別于術(shù)后不同時(shí)間段取外周血檢測(cè)總膽紅素和谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平; 取肝組織行組織學(xué)檢查及流式細(xì)胞儀檢測(cè)移植肝的增殖活性。結(jié)果移植術(shù)后1 w,肝功能酶學(xué)指標(biāo)增高,后逐步降低; 組織學(xué)檢查術(shù)后可見(jiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn),特別在門(mén)靜脈周?chē)鷧R管區(qū),肝實(shí)質(zhì)可見(jiàn)點(diǎn)狀壞死。術(shù)后1個(gè)月可見(jiàn)膽管增殖; PLR組和POLT組還可見(jiàn)二倍體和多倍體的肝細(xì)胞,中央小靜脈、肝竇和葉間靜脈輕度擴(kuò)張。 PLR組和POLT組肝細(xì)胞均增生活躍,3組分別于術(shù)后1 d、2 d、4 d達(dá)到增殖高峰。結(jié)論部分移植肝和肝切除后肝臟具有同樣的增殖活性,但增殖高峰POLT組及OLT組均要晚于肝切除后的肝臟,但移植組增殖周期長(zhǎng)。這可能是由于手術(shù)操作及肝臟缺血再灌注損傷所致。而持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)可能與受體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的細(xì)胞因子和激素的調(diào)控相關(guān)。
目的 尋求促進(jìn)肝細(xì)胞再生的有效藥物。方法 采用形態(tài)計(jì)量技術(shù),3H-TdR活體摻入實(shí)驗(yàn)以及動(dòng)脈血酮體比率的變化來(lái)觀察重組生長(zhǎng)激素(hGH)對(duì)肝再生的作用。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組肝切除術(shù)后肝細(xì)胞核分裂指數(shù)、肝細(xì)胞核體積密度、新生肝細(xì)胞數(shù)目密度、動(dòng)脈血酮體比率及3H-TdR活體摻入實(shí)驗(yàn)結(jié)果均顯著高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論 hGH對(duì)大鼠肝部分切除術(shù)后殘肝有促進(jìn)其再生的作用。
目的 探討重組人生長(zhǎng)激素(rhGH)對(duì)肝硬變肝葉切除術(shù)后肝功能改善和肝臟再生的作用。方法 建立SD大鼠肝硬變模型,然后行30%~40%肝切除,手術(shù)當(dāng)天開(kāi)始,實(shí)驗(yàn)組應(yīng)用rhGH,對(duì)照組應(yīng)用等量生理鹽水代替,分別于術(shù)后第7、14及28天檢測(cè)其肝功能、動(dòng)脈血酮體比值(AKBR)、再生肝與體重的比值(RL/W),并行光鏡、電鏡及肝細(xì)胞DNA圖像分析。另外,將施行肝切除術(shù)的39例患者隨機(jī)分為臨床實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,分別于術(shù)前1天、術(shù)后第1、14及28天測(cè)定其肝功能、血糖(Glu)、胰島素(RI)、前白蛋白(PA)及AKBR,記錄兩組患者術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率、肝功能衰竭發(fā)生率、平均住院時(shí)間。結(jié)果 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較,AKBR值明顯增高(P<0.01); 術(shù)后第14及 28天時(shí)的總蛋白和PA水平及肝細(xì)胞有絲分裂率明顯升高(P<0.05); RL/W值也明顯增高(P<0.01),肝細(xì)胞DNA濃度明顯增高(P<0.05),雙核再生肝細(xì)胞及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也增多。臨床實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較,術(shù)后第7及14天患者血清總膽紅素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶明顯下降(P<0.05),血清白蛋白、PA、Glu、RI及AKBR明顯升高(P<0.05)。結(jié)論 肝硬變肝葉切除術(shù)后使用重組人生長(zhǎng)激素,能使肝功能改善并促進(jìn)肝再生。
為觀察促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素(pHGF)對(duì)肝硬變大鼠部分肝切除后肝再生的影響,應(yīng)用IBASⅡ全自動(dòng)圖像分析儀檢測(cè)肝硬變大鼠術(shù)后肝細(xì)胞DNA倍體率及肝臟組化染色后各組酶灰度值(OPTDM)的變化,并通過(guò)檢測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(SGPT)及吲哚青綠15分鐘滯留率(ICG15)以了解殘肝功能。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組(A組)3~4倍體肝細(xì)胞明顯減少,2倍體及多倍體肝細(xì)胞明顯增多;術(shù)后第1天各組酶灰度值無(wú)顯著差異,第2、5天琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)明顯增高,而堿性磷酸酶(AkP)和酸性磷酸酶(AcP)則明顯減少;A組術(shù)后第5天SGPT和ICG15明顯降低。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:pHGF不僅能促使肝硬變大鼠肝切除后殘肝的再生,而且能夠促進(jìn)再生肝細(xì)胞功能成熟及殘肝功能的恢復(fù)。
摘要: 由于羊水干細(xì)胞(AFSC)具有高度增殖能力、來(lái)源容易 、免疫原性弱、致瘤性低、符合倫理學(xué)等獨(dú)特優(yōu)勢(shì),并與其它干細(xì)胞一樣存在多向分化潛能,在細(xì)胞治療或組織工程研究中展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景,使其極有望成為心血管疾病再生醫(yī)學(xué)的理想種子細(xì)胞。羊水干細(xì)胞在心血管疾病中的研究尚處于起步階段,盡管許多研究結(jié)果令人振奮,但將其應(yīng)用于心血管疾病再生醫(yī)學(xué)中仍面臨許多挑戰(zhàn),在很多方面的研究亟需深入。我們總結(jié)了羊水干細(xì)胞的性質(zhì)、獲取羊水的時(shí)機(jī)對(duì)羊水干細(xì)胞的影響、分離純化及鑒定方法,重點(diǎn)綜述羊水干細(xì)胞向心血管細(xì)胞分化的潛能及在心臟組織工程中的應(yīng)用現(xiàn)狀和相關(guān)問(wèn)題。
目的 探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞( MSCs)移植聯(lián)合透壁心肌打孔復(fù)合緩釋支架對(duì)急性心肌梗死后血運(yùn)重建的作用,為臨床外科治療心肌梗死提供依據(jù)。 方法 建立豬急性心肌梗死模型后,將24只豬采用隨機(jī)數(shù)字表法分為4組,每組6只,對(duì)照組:?jiǎn)渭兘⑿募」K滥P?;MSCs組:心肌梗死后移植MSCs;透壁打孔再生血管術(shù)(TMDR)加支架組:心肌梗死后打孔加復(fù)合堿性生長(zhǎng)因子(bFGF)肝素化緩釋抗凝支架置入;MSCs聯(lián)合TMDR加支架組:心肌梗死后打孔加復(fù)合bFGF的肝素化緩釋抗凝支架置入聯(lián)合MSCs移植。實(shí)驗(yàn)后3個(gè)月檢測(cè)、分析4組的梗死區(qū)域心肌梗死面積和血管密度。 結(jié)果 術(shù)后3個(gè)月,病理組織學(xué)檢測(cè)顯示,MSCs組、TMDR加支架組和MSCs聯(lián)合TMDR加支架組梗死面積均較對(duì)照組明顯減少(27.9%±3.1% vs. 48.9%±2.7%,P=0.000;20.3%±1.7% vs. 48.9%±2.7%,P=0.000;12.5%±1.9% vs. 48.9%±2.7%,P=0.000),血管密度均有不同程度的增加(8.4±1.2個(gè)/高倍視野 vs.4.5±1.4個(gè)/高倍視野,P=0.001;11.5±2.6個(gè)/高倍視野 vs.4.5±1.4個(gè)/高倍視野,P=0001; 15.6±1.4個(gè)/高倍視野vs.4.5±1.4個(gè)/高倍視野,P=0.000); 其中MSCs聯(lián)合TMDR加支架組梗死面積的減少和血管密度增加的程度較MSCs組和TMDR加支架組更明顯(P=0.010,0.020 )。 結(jié)論 MSCs移植聯(lián)合TMDR加復(fù)合bFGF的肝素化緩釋抗凝支架置入能減少心肌梗死面積,增加心肌梗死區(qū)域血管密度,從而提高M(jìn)SCs移植在急性心肌梗死中的治療作用,為臨床外科治療心肌梗死提供了新的治療思路。