【摘要】目的探討一氧化氮（NO）在大鼠梗阻性黃疸腎功能損害發(fā)生中的作用，以及褪黑素（melatonin,Mel)的保護作用。方法64只雄性SD大鼠隨機均分為4組： 正常對照組（CN組）、假手術組（SO組）、膽總管結扎組（BLD組）和褪黑素治療組（BDL+Mel組）。應用膽總管結扎法建立梗阻性黃疸模型，分別于手術后第4天和第8天兩個時間點檢測4組中血漿NO、TB、DB、ALT、AST、BUN、Cr水平以及腎組織中NO水平和iNOS活性； 光鏡下觀察腎組織病理形態(tài)改變。結果BDL組大鼠血漿NO、TB、DB、ALT、AST、BUN、Cr水平和腎組織NO水平及iNOS活性明顯升高（P＜0.01），褪黑素治療可使血漿NO、ALT、AST、BUN及Cr水平和腎組織中NO水平及iNOS活性顯著降低，與BDL組比較差異有顯著性意義（P＜0.01）。結論梗阻性黃疸時，腎組織iNOS活性增強，NO大量產生參與了腎功能損害的發(fā)生、發(fā)展； 褪黑素對大鼠梗阻性黃疸腎損害的保護作用至少部分是通過干擾NO通路實現(xiàn)的。
目的 研究血管內皮生長因子（VEGF）、誘導型一氧化氮合酶（iNOS）及內皮型一氧化氮合酶（eNOS）在人胃癌表達的相關性及與胃癌血管生成的關系，探討NO和VEGF的相互作用及NO在VEGF促腫瘤生長中的作用機理。 方法 應用免疫組化方法檢測34例胃癌組織中VEGF、iNOS和eNOS的表達及分布，用血管內皮細胞第Ⅷ相關抗原（FⅧRAg）行免疫特異性染色計數腫瘤微血管密度（MVD）。 結果 34例胃癌組織中，表達iNOS者占73.5%，表達eNOS者占82.4%，表達VEGF者占91.2%； VEGF與iNOS的表達具有相關性（Plt;0.005），VEGF與eNOS的表達則無相關性（Pgt;0.05）； 表達VEGF的胃癌其MVD明顯高于不表達VEGF的胃癌（Plt;0.025），表達iNOS的胃癌其MVD明顯高于不表達iNOS的胃癌（Plt;0.05），表達eNOS的胃癌MVD與不表達eNOS的胃癌差異無顯著性意義（Pgt;0.05）。 結論 胃癌組織中MVD隨著VEGF和iNOS表達的增加而增加，提示兩者對胃癌的血管生成起促進作用； VEGF與iNOS的表達具有相關性，提示iNOS在VEGF的生成和發(fā)揮作用過程中起重要作用。
目的 研究誘導型一氧化氮合酶（iNOS）和p53蛋白在肝細胞癌中的表達及其與腫瘤血管形成的關系。方法 采用免疫組化和圖像分析技術檢測59例肝細胞癌患者腫瘤組織中iNOS和p53蛋白的表達，CD34單克隆抗體免疫組化染色檢測腫瘤組織微血管密度（MVD）。結果 ①iNOS和p53蛋白在肝細胞癌組織中表達陽性率分別為81.4%（48/59）和64.4%（38/59），表達強度（IOD值）分別為5 635±1 287和3 352±873。②MVD為32.5±2.73，以腫瘤邊緣和癌旁組織微血管較密集。③iNOS的表達與p53蛋白表達呈顯著正相關（r=0.65, P＜0.05）； iNOS的表達與MVD呈顯著正相關（r=0.75, P＜0.05）； p53蛋白的表達與MVD呈顯著正相關（r=0.72, P＜0.05）。結論 肝細胞癌組織中存在iNOS和p53蛋白的高表達； iNOS和p53可促進肝癌血管形成。
目的 探討長期肺循環(huán)無搏動血流對肺微血管床結構和功能的影響，以明確在該血流灌注下是否存在肺血管重塑。 方法 建立犬右肺單側無搏動血流灌注的動物模型，6個月后采用鏈親和素生物素酶復合物法檢測兩側肺組織血管內皮細胞內皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxidesynthase， eNOS）和肺動脈微平滑肌細胞fas的表達，在光學顯微鏡下觀察兩側肺組織毛細血管床微小動脈結構的變化。 結果 無搏動血流灌注的右肺微小動脈eNOS表達積分值顯著低于左肺（10 846.7±177.8 vs. 13 136.1±189.6; t＝2.240, P=0.040）；右肺微動脈平滑肌細胞fas表達顯著高于左肺（14 254.1±217.1 vs. 11 976.7±195.7; t＝2.160, P=0.040）；肺微動脈圖象分析顯示，管壁厚度與血管外徑比值（13.64%±12.80% vs. 14.96%±13.10%）、管壁面積與血管總面積比值(46.40%±11.70% vs. 47.80%±12.20%)顯著小于左肺(Plt;0.05)。 結論 長期無搏動血流灌注會引起肺血管內皮細胞eNOS合成減少，一方面導致肺泡真毛細血管網的前括約肌毛細血管收縮，肺小血管阻力升高，直捷通路及動靜脈短路持續(xù)開放，引起低氧血癥及活動耐力下降；另一方面導致微動脈血管壁平滑肌細胞凋亡增加，動脈靜脈化。
目的探討兔頸動脈移植后移植血管段內皮型一氧化氮合酶信使核糖核酸(eNOSmRNA)表達的變化及其意義。方法建立大白兔頸動脈移植模型。將30只兔按隨機數字表法分為4組。A組(n=3)自體血管移植;B組(n=9)新鮮異體血管移植;C組(n=9)同種異體血管經青霉素和鏈霉素處理常溫保存后移植;D組(n=9)同種異體血管經青霉素和鏈霉素處理冷凍保存后移植。觀察比較移植后1～3周移植血管段組織形態(tài)學變化和eNOS mRNA的表達。結果光學顯微鏡下觀察A組結構正常,僅有炎性細胞浸潤;其余各組術后1周內膜開始增生,2周內膜明顯增厚,3周內膜、中膜增厚最明顯,同時伴有血栓形成。其中B組改變最嚴重,B組血管移植后eNOS mRNA表達明顯低于其他三組(Plt;0.05)。結論同種異體動脈血管移植后,血管eNOS基因表達明顯下調,可造成移植后血管內膜增生和血栓形成。
目的 通過觀察先天性心臟病合并肺動脈高壓患者肺組織內皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表達,了解其肺血管內皮細胞功能有否異常. 方法 32例先天性心臟病患者分為2組,組Ⅰ:合并肺動脈高壓患者(n=16);組Ⅱ:未合并肺動脈高壓患者(n=16).在心內直視術下,取少許右肺中葉組織,利用免疫組織化學和逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術,對eNOS進行半定量分析. 結果 組Ⅱ患者肺血管內皮細胞內eNOS免疫染色比組Ⅰ明顯增強(F=93.98,Plt;0.01);組Ⅱ患者肺血管內皮細胞內eNOSmRNA表達比組Ⅰ明顯增高(F=58.76,Plt;0.01). 結論 先天性心臟病合并肺動脈高壓患者的eNOS表達減少,造成內源性一氧化氮(NO)生成不足,為該類患者吸入NO治療肺動脈高壓提供了理論依據.
目的 研究一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)在心肌再灌注損傷中的作用,探討卡托普利(captopril)對缺血-再灌注鼠心肌保護的機制. 方法 采用Langendorff離體鼠心灌流模型,將18只SD大白鼠隨機分為3組(每組6只),對照組、缺血-再灌注組、卡托普利組.觀察心肌NOS同工酶活性、過氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、肌酸激酶含量和冠脈流出液NO的變化. 結果 缺血-再灌注組與對照組比較心肌誘導型NOS(iNOS)活性增高(P＜0.001),而心肌原生型NOS(cNOS)活性及總NOS活性顯著降低(Plt;0.001,0.05),冠脈流出液NO含量下降(Plt;0.01).卡托普利組再灌注30分鐘,心肌iNOS活性低于缺血-再灌注組(Plt;0.01),cNOS活性和總NOS活性高于缺血-再灌注組(Plt;0.01,0.05),再灌注期間冠脈流出液NO水平高于缺血-再灌注組(Plt; 0.01),心肌損傷較缺血-再灌注組減輕. 結論 心肌NOS同工酶活性及NO產生的失常是心肌再灌注損傷的重要機制之一,卡托普利可通過調節(jié)心肌NOS同工酶活性,維持正常的NO水平,起到心肌保護作用.
目的 研究一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)競爭性抑制劑L-硝基精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester， L-NAME)對失神經肌萎縮的延緩作用，為失神經肌萎縮的預防與治療提供新手段。方法 制備36只成年SD大鼠右下肢腓腸肌失神經支配模型，隨機分為L-NAME組（A組）和對照組（B組）。A組：腓腸肌注射L-NAME，于5個不同位點分別注射20 μl，總注射劑量為10 mg/kg；B組：注射同等體積的生理鹽水。于術后2、4和8 周測定肌濕重維持率、肌細胞橫切面積、肌肉蛋白含量、細胞凋亡數，并觀察超微結構的改變。結果 術后2、4周A組的肌濕重維持率、肌細胞橫切面積、肌肉蛋白含量均明顯高于B組，但細胞凋亡數低于B組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。超微結構顯示，術后2周，肌細胞線粒體、內質網及細胞核改變不明顯，兩組間無顯著性差異；術后4周，A 組退變的細胞核較B組少，核質染色均勻。術后8周兩組各參數間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結論 NOS抑制劑L-NAME能在短期內延緩失神經肌萎縮。
目的 研究雪旺細胞源神經營養(yǎng)因子（ＳＤＮＦ）對臂叢神經根性撕脫傷所致前角運動神經元死亡的保護作用。方法 選成年 ＳＤ大鼠，制成頸６、７神經根性撕脫傷動物模型，損傷處定期應用 ＳＤＮＦ，３周后觀察損傷側脊髓前角運動神經元的成活率和形態(tài)學變化，以及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）表達的情況。結果 對照組６８.６％ 的脊髓前角運動神經元死亡，成活神經元胞體明顯萎縮，同時表達 ＮＯＳ神經元增多；實驗組脊髓前角運動神經元的死亡率較對照組降低３５％ ，成活神經元胞體無萎縮，表達 ＮＯＳ神經元未見增多。結論 ＳＤＮＦ對臂叢神經根性撕脫傷所致運動神經元死亡有明顯的保護作用，一氧化氮在臂叢神經根性撕脫傷所致運動神經元死亡中起一定作用。
目的 觀察中國漢族人群中血管內皮原生型一氧化氮合酶(ecNOS)基因的多態(tài)性與糖尿病視網膜病變（DR）之間的相關性。方法 166例臨床確診為非胰島素依賴型糖尿病患者為病例組，選取無糖尿病、高血壓、腎病，年齡40歲以上，個體間無血緣關系的85例白內障、骨折患者和健康體檢者為正常對照組。病例組患者根據有無視網膜病變和熒光素眼底血管造影檢查結果分為無DR組、非增生期DR組（BDR組）和增生期DR組（PDR組）。病例組和正常對照組受檢者均為漢族。抽取外周靜脈血，提取DNA，采用聚合酶鏈反應（PCR）檢測ecNOS基因第四內含子中27個堿基對（bp）重復的多態(tài)性。結果 PCR產物測序結果經檢索GeneBank，擴增序列與GeneBank中ecNOS基因相應區(qū)域的序列相一致，顯示在漢族人群中同樣存在27個bp的重復序列，等位基因b重復5次，等位基因a重復4次。PCR檢測結果顯示，在正常對照組和無DR組、BDR組、PDR組中均存在2種等位基因和3種基因型。正常對照組中基因型bb、ab、aa分別為80.0％、16.5%、3.5％、無DR組分別為77.2％、13.9%、8.9％、BDR組分別為80.5％、17.1%、2.4％、PDR組分別為78.3％、13%、8.7％；正常對照組、無DR組、BDR組、PDR組兩兩比較，等位基因頻率（chi;2=1.841）和基因型頻率（chi;2=3.847）均無統(tǒng)計學意義（P＞0.5）。Logistic回歸分析結果也顯示DR與ecNOS基因重復多態(tài)性無關。結論 中國漢族人群ecNOS基因第四內含子存在27個bp重復的多態(tài)性，但可能與非胰島素依賴型糖尿病患者視網膜病變無關。