目的 探討活體染料羧基熒光素乙酰乙酸琥珀酰亞胺酯（CFSE）標(biāo)記兔眼虹膜色素上皮（IPE）細(xì)胞的可行性。 方法 使用酶消化加機(jī)械分離的方法分離培養(yǎng)兔眼IPE細(xì)胞，將傳3～4代的IPE細(xì)胞用2.5、5、10、20、40 mu;mol/L濃度的CFSE分別作用1、5、10 min進(jìn)行染色，通過(guò)觀察染色后的細(xì)胞熒光強(qiáng)度和細(xì)胞貼壁率篩選出最理想的標(biāo)記條件。采用流式細(xì)胞術(shù)追蹤檢測(cè)標(biāo)記的IPE細(xì)胞的熒光強(qiáng)度變化。用免疫熒光抗體標(biāo)記法檢測(cè)此染色劑有無(wú)滲漏以及是否對(duì)周圍細(xì)胞著染。 結(jié)果 濃度為20 mu;mol/L的CFSE 37℃下水浴作用1 min為IPE細(xì)胞染色、觀測(cè)、研究的最適條件。流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡觀察結(jié)果顯示，CFSE對(duì)IPE細(xì)胞染色可持續(xù)4周以上，未發(fā)生染料滲漏或轉(zhuǎn)染其它細(xì)胞，且此濃度的CFSE不影響細(xì)胞的性狀。 結(jié)論 活體染料CFSE是一種染色率高，追蹤時(shí)間長(zhǎng)，應(yīng)用簡(jiǎn)便安全可靠的標(biāo)記兔IPE細(xì)胞的新方法。 (中華眼底病雜志, 2006, 22: 261-264)
引用本文： 彭紹民,張中宇,黎曉新,叢麗丹. 活體染料羧基熒光素乙酰乙酸對(duì)兔眼虹膜色素上皮細(xì)胞體外染色的研究. 中華眼底病雜志, 2006, 22(4): 261-264. doi: 復(fù)制