• 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)院眼科;

目的 比較體外不同培養(yǎng)條件對視網(wǎng)膜及腦神經(jīng)干細胞(NSCs)視紫紅質(zhì)的純化能力及不同誘導條件對NSCs的誘導分化能力。方法 取胚兔視網(wǎng)膜及大腦皮質(zhì)制備單細胞懸液,分別在5種不同培養(yǎng)基中進行體外培養(yǎng)并純化。選取無血清條件下傳3代的NSCs,分別在2種培養(yǎng)基中誘導8~10 d。采用免疫熒光法及流式細胞儀檢測所獲得細胞的神經(jīng)干細胞和視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮細胞抗原的表達。結果 免疫熒光法顯示無血清培養(yǎng)條件下2種組織來源的NSCs均部分表達巢蛋白。流式細胞術顯示2種誘導方式均部分細胞表達巢蛋白,較誘導前明顯降低,而視紫紅質(zhì)及Thy1.1的表達均較誘導前明顯增高。經(jīng)5%胎牛血清(FBS)誘導的細胞表達視紫紅質(zhì)較聯(lián)合應用全反式視黃酸(ATRA)時高,差異均有統(tǒng)計學意義( chi;2=30.59,6.76;P<0.01),但Thy1.1表達低于后者,差異也有統(tǒng)計學意義( chi;2=6.19,22.92;P=0.01)。結論 無血清培養(yǎng)基添加N2、EGF、bFGF、LIF 4種因子可以獲得最佳純化效果。2種誘導培養(yǎng)基都能夠誘導NSCs的分化,視網(wǎng)膜NSCs分化為視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮細胞的能力高于大腦皮質(zhì)NSCs。

引用本文: 吳嬋,董方田,陳連鳳,許卓再. 體外培養(yǎng)及誘導胚兔視網(wǎng)膜及腦神經(jīng)干細胞分化的研究. 中華眼底病雜志, 2009, 25(4): 265-269. doi: 復制

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