• 1第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院全軍骨科研究所(西安,710032);;
  • 2第四軍醫(yī)大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;

目的 構(gòu)建人骨形成蛋白 - 2 (BMP- 2 )和骨保護(hù)素 (OPG)的共表達(dá)真核載體 ,研究其在小鼠成肌細(xì)胞C2 C12中的表達(dá)?!》椒ā∫匀斯侨饬黾?xì)胞系 MG6 3的總 RNA為模板 ,RT- PCR法獲得人 OPG的編碼區(qū) c DNA,克隆入真核表達(dá)載體 p IRES2 - EGFP的多克隆位點(diǎn) ,再將人 BMP- 2的編碼區(qū) c DNA克隆入 p IRES2 - EGFP中的 Bst X 位點(diǎn) ,構(gòu)建 BMP- 2和 OPG的雙順反子真核表達(dá)載體 p IRES2 - BMP- 2 - OPG,在陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染 C2 C12細(xì)胞 ,Western blot法檢測 BMP- 2和 OPG的表達(dá)?!〗Y(jié)果  1獲得人 OPG編碼區(qū)全長 c DNA。 2構(gòu)建人 BMP- 2和 OPG的雙順反子真核表達(dá)載體 p IRES2 - BMP- 2 - OPG。 3經(jīng) Western blot檢測 ,p IRES2 - BMP- 2 - OPG轉(zhuǎn)染 C2 C12細(xì)胞后 ,細(xì)胞可穩(wěn)定表達(dá) BMP- 2和 OPG?!〗Y(jié)論 構(gòu)建了人 BMP- 2和 OPG的共表達(dá)真核載體 ,并可在C2C12細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá),為應(yīng)用BMP-2和OPG進(jìn)行骨質(zhì)疏松等疾病的治療研究奠定了基礎(chǔ)。

引用本文: 劉繼中,胡蘊(yùn)玉,紀(jì)宗玲,陳蘇民,朱幫福,陶惠人. 人骨形成蛋白-2和骨保護(hù)素在小鼠成肌細(xì)胞中的共表達(dá). 中國修復(fù)重建外科雜志, 2003, 17(1): 1-4. doi: 復(fù)制