• 1吉林大學第一醫(yī)院骨科(長春,130021),2中日聯誼醫(yī)院骨科;;
  • 3大慶市龍南醫(yī)院骨科;;
  • 4 吉林大學中日聯誼醫(yī)院中心研究室;

目的 構建人骨形成蛋白-2(hBMP-2)真核表達載體pcDNA3.1-hBMP-2,轉染人骨髓基質干細胞(MSCs),探討基因轉染對其增殖和血管內皮生長因子(VEGF)表達的影響。方法 利用重組DNA和基因克隆技術構建重組載體pcDNA3.1-hBMP-2;細胞培養(yǎng)和基因轉染技術體外轉染人MSCs;免疫細胞化學、原位雜交和蛋白印跡法檢測細胞BMP-2的表達;通過流式細胞儀和VEGF探針原位雜交分析其對細胞增殖和VEGF表達的影響。結果 轉染后細胞在mRNA水平和蛋白質水平均表達BMP-2;轉染后S期細胞比例增多,提示細胞DNA的合成增加;BMP-2基因轉染上調細胞VEGF的表達。結論 在脂質體介導下,pcDNA3.1-hBMP-2轉染MSCs獲得成功?;蜣D染后能促進細胞增殖并將通過使VEGF的表達增加促進血管再生,為進一步骨缺損的基因治療及構建組織工程骨奠定了實驗基礎。

引用本文: 李建軍,王文軍,景元海,卜麗莎,楊紹娟,張文嵐,徐莘香. 重組pcDNA3.1-hBMP-2轉染人骨髓基質干細胞和對其增殖及血管內皮生長因子表達的影響. 中國修復重建外科雜志, 2004, 18(2): 100-103. doi: 復制