目的 觀察富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)在體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)的增殖及成骨作用,探討PRP促進(jìn)骨修復(fù)的細(xì)胞和分子機(jī)制。方法 體外培養(yǎng)人MSCs,分為實(shí)驗(yàn)組(n=9)與對照組(n=9),實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行PRP干預(yù)(10 μl/ml培養(yǎng)液)。于不同時間點(diǎn)收集兩組細(xì)胞,以流式細(xì)胞儀檢測S期比例,MTT法檢測細(xì)胞增殖活性,堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)測定和四環(huán)素?zé)晒夥z測細(xì)胞成骨活性,逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測成骨啟動基因cbfa1的表達(dá)。結(jié)果 PRP作用于MSCs,可刺激細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞儀檢測PRP加入后24 h S期比例由對照組7.2±0.5至14.5±0.4具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),MTT法顯示PRP作用后細(xì)胞增殖加速,第4天達(dá)到平臺期。而ALP活性在作用后3、6和9 d達(dá)到7.79±1.98、9.51±2.31和14.03±3.02,與對照組2.06±0.77、2.84±0.82和2.58±0.84組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。礦化結(jié)節(jié)形成增多,逆轉(zhuǎn)錄PCR顯示cbfa1的表達(dá)在PRP加入2、4和8 h逐漸加強(qiáng)。結(jié)論 PRP對骨修復(fù)的促進(jìn)作用與其促進(jìn)MSCs增殖、加強(qiáng)成骨啟動基因的表達(dá)、增強(qiáng)成骨活性的作用有關(guān)。
引用本文: 張曄,曾炳芳,張長青,袁霆. 富血小板血漿對體外培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及成骨活性的作用. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2005, 19(2): 109-113. doi: 復(fù)制
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