• 1煙臺市煙臺山醫(yī)院創(chuàng)傷骨科(山東煙臺,264000);;
  • 2四川大學華西醫(yī)院生物治療國家重點實驗室·干細胞與組織工程研究室,3華西醫(yī)院病理科;

目的 了解WO-1在體外環(huán)境中對人成骨細胞增殖、分化的影響,為骨組織工程學研究提供更多的方法。方法 采用培養(yǎng)人胚成骨細胞,以生長曲線和3 H-TdR法分析WO-1與成骨細胞生物學效應的量效關系,在最佳作用濃度下,以接種細胞克隆形成率,流式細胞技術分析細胞周期,透射電鏡觀察細胞形態(tài)學,了解WO-1對細胞活性和細胞增殖的影響;以ALP活性檢測,3 H-Proline摻入實驗,放射免疫法測骨鈣素合成及I型膠原和骨鈣素mRNA的表達等,從蛋白質(zhì)和mRNA兩個水平觀察WO1對細胞功能的影響。結(jié)果 WO-1在高濃度時對人胚成骨細胞增殖有抑制作用,低濃度時對人胚成骨細胞增殖有促進作用,最佳作用濃度8 μg/ml,在0.25~8 μg/ml濃度范圍內(nèi)存在量效關系。在8 μg/ml WO-1作用下,實驗組人胚成骨細胞接種克隆形成率增加,克隆體積增大;群體倍增時間明顯縮短,電鏡下見細胞器較對照組發(fā)達;而ALP活性、Ⅰ型膠原合成、骨鈣素合成等,在蛋白質(zhì)及mRNA兩個水平均有增加,且與對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論 低濃度WO-1,可促進體外培養(yǎng)的人胚成骨細胞活性及增殖,加強細胞合成Ⅰ型膠原、骨鈣素等基質(zhì)的功能,可用作成骨細胞增殖及分化的促進劑。

引用本文: 陳旭,楊志明,解慧琪,李勝富. WO-1對成骨細胞的生物學效應研究. 中國修復重建外科雜志, 2005, 19(10): 822-825. doi: 復制