崔正軍 1# , 岑瑛 1 , 張潔 2
  • 1 四川大學華西醫(yī)院整形燒傷科(成都,610041),2腫瘤實驗室 #現(xiàn)在鄭州大學第一附屬醫(yī)院整形科;

目的 研究腺病毒介導的反義血管內皮細胞生長因子165(Adenovirus-mediated averse vascular endothelial growth factor165,Ad-aVEGF165) 基因轉染對惡性黑色素瘤體內外生長的影響。方法 選用感染復數(shù)為100的腺病毒介導的綠色熒光蛋白(Adenovirusmediated green fluorescent protein, Ad-GFP)和Ad-aVEGF165轉染人血管內皮細胞株304(endothelium cell of vessel304 ,ECV304)和人惡性黑色素細胞(A375)。ECV304細胞分為3組:A375母系組、 Ad-GFP組和Ad-aVEGF165組。A375細胞分為3組:1640組、Ad-GFP組和Ad-aVEGF165組。測定其生長曲線、細胞周期和VEGF基因的表達。于裸鼠皮下接種A375細胞,待成瘤后進行轉種和治療,根據(jù)瘤體內注射物的不同隨機分為PBS組、Ad-GFP組和Ad-aVEGF165 組,每組5只;治療結束后行大體觀察、HE染色觀察和微血管密度(micro-vascular density,MVD)檢測。結果 A375 母系組和Ad-GFP組上清液均能刺激ECV304細胞的生長,Ad-aVEGF165 組上清液能抑制ECV304細胞的生長。A375細胞中3組細胞均呈增殖趨勢,各時間點的增殖速度比較無統(tǒng)計學意義(P gt;0.05)。ECV304細胞Ad-aVEGF165組增殖指數(shù)降低(P lt;0.05),A375細胞3組細胞增殖指數(shù)比較無統(tǒng)計學意義(P gt;0.05)。A375細胞1640組、Ad-GFP組和Ad-aVEGF165 組平均灰度值分別為234.41±13.80、222.73±3.67和180.84±6.34。轉種后2周Ad-aVEGF165組裸鼠體內腫瘤體積比Ad-GFP組和PBS組明顯減小,并隨時間延長越來越明顯。HE染色Ad-aVEGF165組有凝固性壞死。PBS組、Ad-GFP組、Ad-aVEGF165組的MVD值分別為65±10、52±11和30±6個/視野。結論 在體外,Ad-VEGF165通過抑制A375細胞VEGF基因的表達,進而抑制ECV304細胞的生長。在體內,Ad-aVEGF165阻斷腫瘤血管的生成,進而抑制人惡性黑色素瘤的生長。

引用本文: 崔正軍,岑瑛,張潔. 反義血管內皮細胞生長因子165基因治療皮膚惡性黑色素瘤的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2006, 20(5): 499-503. doi: 復制