目的 利用抑制消減雜交（suppression subtractive hybridization，SSH）技術(shù)，比較瘢痕疙瘩與正常皮膚組織之間基因表達(dá)差異，篩選瘢痕疙瘩特有的差異表達(dá)基因片段，為揭示瘢痕疙瘩的病因提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法 提取瘢痕疙瘩與正常皮膚組織細(xì)胞mRNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。以瘢痕疙瘩cDNA為檢測(cè)子，正常皮膚組織細(xì)胞cDNA為驅(qū)動(dòng)子，選擇四堿基內(nèi)切酶RsaⅠ將cDNA酶切；連接特殊設(shè)計(jì)的接頭進(jìn)行消減雜交和PCR反應(yīng)，得到消減混合物，與T載體連接，轉(zhuǎn)化DH5α感受態(tài)細(xì)菌，建立差異消減文庫(kù)。Southern雜交篩選鑒定差異基因，進(jìn)行測(cè)序和同源分析。結(jié)果 經(jīng)SSH篩選、Southern雜交鑒定得到13個(gè)瘢痕疙瘩差異表達(dá)基因，其中已知功能的基因11個(gè)，如TA結(jié)合因子1、E4基因轉(zhuǎn)錄因子1、ephrin B2型受體基因、血小板生長(zhǎng)因子受體基因等；有與腫瘤發(fā)生有關(guān)的基因，如G抗原7基因等；未知功能基因2個(gè)。結(jié)論 篩選得到的瘢痕疙瘩差異表達(dá)基因，對(duì)了解瘢痕疙瘩發(fā)生發(fā)展的病因?qū)W基礎(chǔ)和指導(dǎo)臨床治療具有重要意義。
引用本文： 羅勇,高建華,趙菲,張寶. 利用抑制消減雜交篩選瘢痕疙瘩差異表達(dá)基因. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2006, 20(5): 495-498. doi: 復(fù)制