目的 通過體外培養(yǎng)不同代次的犬膀胱平滑肌細胞，比較其生物學特征，探討多次傳代后的平滑肌細胞作為種子細胞的可行性，為構建組織工程膀胱和尿道篩選種子細胞提供方法和依據。 方法 取體重10 ～ 12 kg 的12 月齡雄性犬膀胱肌層，混合酶消化法獲取平滑肌細胞，并于含10% 小牛血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，觀察比較不同代次細胞的形態(tài)變化及生長、增殖過程，電鏡下觀察細胞超微結構，并通過免疫組織化學方法檢測特征性蛋白的表達。 結果 體外培養(yǎng)的平滑肌細胞單層生長至亞融合狀態(tài)后，倒置相差顯微鏡下細胞呈長梭形，并呈峰- 谷樣結構，可連續(xù)傳至12 代。生長曲線顯示第7 代以前的細胞具有相似的增殖特點，約每40 小時為1 次生長周期，透射電鏡下可見平滑肌細胞特有的密體結構，平滑肌肌動蛋白免疫組織化學染色為陽性；第7 代后細胞增殖逐漸遲滯，至第10 代細胞內肌絲及密體結構消失。 結論 犬膀胱平滑肌細胞可在體外連續(xù)培養(yǎng)，通過適當的純化方法可獲得大量高純度的平滑肌細胞。第7 代以前的平滑肌細胞均可作為種子細胞，用于構建組織工程膀胱和尿道。
引用本文： 智偉,楊志明,陳曉禾,李秀群,韓平,譚美云,唐耘熳,鄧力. 犬膀胱平滑肌細胞的體外連續(xù)培養(yǎng). 中國修復重建外科雜志, 2008, 22(12): 1476-1480. doi: 復制