【摘 要】 目的 探討通過(guò)細(xì)胞因子及其組合體外誘導(dǎo)臍血CD34+ 細(xì)胞轉(zhuǎn)分化成肝樣細(xì)胞的效果。 方法 采用密度梯度離心法分離臍血單個(gè)核細(xì)胞（mononuclear cell，MNC），從MNC 中獲得富集CD34+ 細(xì)胞。選用人白血病抑制因子、制瘤素M、bFGF、aFGF、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、EGF 及干細(xì)胞生長(zhǎng)因子7 種細(xì)胞因子，濃度分別為10、10、10、10、20、20和50 ng/mL，設(shè)計(jì)了 49 種細(xì)胞因子組合，分別采用這些細(xì)胞因子組合體外培養(yǎng)臍血CD34+ 細(xì)胞，培養(yǎng)周期為28 d。以新
鮮臍血CD34+ 細(xì)胞作為對(duì)照。每7 天檢測(cè)誘導(dǎo)后細(xì)胞中細(xì)胞角蛋白19（cytokeratin19，CK-19）、CK-18、谷氨酰胺合成酶
（glutamine synthetase，GS）、人血清白蛋白（albumin，ALB）以及甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）的mRNA 轉(zhuǎn)錄情況，并應(yīng)用免疫熒光法、過(guò)碘酸- 雪夫（periodic acid-schiff，PAS）染色與吲哚菁綠（indocyanine green，ICG）染色法檢測(cè)細(xì)胞分泌ALB、合成糖原以及解毒能力，以此判斷是否存在臍血CD34+ 細(xì)胞體外向肝樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化。 結(jié)果 在經(jīng)細(xì)胞因子誘
導(dǎo)后的CD34+ 細(xì)胞中均可檢測(cè)到人肝細(xì)胞所能表達(dá)的CK-19 、CK-18 和GS 的mRNA 條帶，未能檢測(cè)出肝細(xì)胞特征性的
ALB 與AFP 的mRNA 條帶；而新鮮臍血CD34+ 細(xì)胞中以上5 種蛋白的mRNA 均未能檢出。免疫熒光染色觀(guān)察示誘導(dǎo)
前后的細(xì)胞中均未能檢測(cè)到ALB 的表達(dá)，且均不能有效吞噬ICG 染料。PAS 反應(yīng)檢測(cè)結(jié)果顯示，經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)后的細(xì)
胞紫紅色糖原沉積區(qū)域較新鮮臍血CD34+ 細(xì)胞增大，出現(xiàn)紫紅色區(qū)域的細(xì)胞增多。 結(jié)論 臍血CD34+ 細(xì)胞體外經(jīng)細(xì)胞
因子組合誘導(dǎo)后，雖有肝細(xì)胞相關(guān)蛋白mRNA 表達(dá)，但未能轉(zhuǎn)分化為肝樣細(xì)胞。

引用本文： 陳祎祺,蔡海波,譚文松. 臍血CD34+ 細(xì)胞體外誘導(dǎo)肝樣細(xì)胞的研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(6): 747-752. doi: 復(fù)制

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