【摘 要】 目的 探討脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)三維多孔支架的制備方法以及將其應(yīng)用于關(guān)節(jié)軟骨組織工程的可行性。 方法 取天然人軟骨粉碎后，采用梯度離心法取100 nm ～ 5 μm 軟骨微絲，脫細(xì)胞處理后制備為質(zhì)量體積比為3%的懸液，采用冷凍凍干法制備脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)三維多孔支架。254 nm 紫外線和碳化二亞胺/ N- 羥基琥珀酰亞胺對(duì)支架進(jìn)行交聯(lián)。冷凍凍干后，對(duì)支架材料進(jìn)行組織學(xué)及掃描電鏡觀察，測(cè)定支架孔徑和孔隙率、吸水率，并采用MTT 法分析支架浸提液毒性。分離培養(yǎng)犬BMSCs，用TGF-β1 成軟骨誘導(dǎo)后種植至支架，倒置顯微鏡、電鏡觀察細(xì)胞在支架上的生長、分化情況。 結(jié)果 組織學(xué)觀察顯示，三維多孔支架中無軟骨細(xì)胞碎片殘留，甲苯胺藍(lán)染色、番紅O 染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色均呈陽性。掃描電鏡顯示支架內(nèi)孔洞相互連通，孔徑為（155 ± 34）μm，孔隙率為91.3% ± 2.0%，吸水率為451% ± 155%。MTT 法顯示不同濃度支架浸提液與對(duì)照DMEM 培養(yǎng)液吸光度值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），支架無細(xì)胞毒性。倒置顯微鏡觀察，細(xì)胞在支架上黏附良好；掃描電鏡下細(xì)胞在支架上均勻分布，細(xì)胞呈圓形或橢圓形，并有基質(zhì)分泌。 結(jié)論 制備的脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)三維多孔支架去細(xì)胞徹底，保留了軟骨ECM 主要成分，無毒，具備合適的孔徑和孔隙率，生物相容性良好，是軟骨組織工程良好的支架載體。
引用本文： 楊強(qiáng),彭江,盧世璧,孫明學(xué),黃靖香,張莉,許文靜,趙斌,眭祥,姚軍,袁玫. 新型脫細(xì)胞軟骨基質(zhì)三維多孔支架的制備. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(3): 359-363. doi: 復(fù)制