• 四川大學華西醫(yī)院 生物治療國家重點實驗室? 干細胞與組織工程研究室(成都,610041);

目的 研究NGF 對人真皮成纖維細胞增殖、細胞周期、膠原合成和遷移的影響,探討NGF 在創(chuàng)傷修復中的作用。 方法 采用酶消化法體外分離培養(yǎng)人真皮成纖維細胞,取第3 代細胞進行實驗。分別加入0、25、50、100、200、400 ng/mL NGF,培養(yǎng)48 h 采用MTT 法檢測細胞增殖;加入0、100 ng/mL NGF,培養(yǎng)48 h 采用流式細胞儀分析細胞有絲分裂周期,采用羥脯氨酸法檢測培養(yǎng)液膠原含量,實時熒光定量PCR 測定細胞Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達水平;建立體外細胞劃痕創(chuàng)傷模型,加入0、50、100、200 ng/mL NGF,培養(yǎng)24 h 觀察細胞遷移。 結果 MTT 法檢測結果顯示,各濃度組間細胞增殖的吸光度值比較差異均無統(tǒng)計學意義(P  gt; 0.05)。在0、100 ng/mL NGF 作用下,細胞周期顯示兩組的G0/ G1 期、S 期、G2/M 期細胞百分率差異均無統(tǒng)計學意義(P  gt; 0.05),羥脯氨酸法測得兩組細胞培養(yǎng)液膠原含量和實時熒光定量PCR 測定細胞Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達水平差異均無統(tǒng)計學意義(P  gt; 0.05)。細胞遷移實驗結果顯示,培養(yǎng)24 h 后0、50、100、200 ng/mL NGF 濃度組細胞遷移率分別為52.12% ± 6.50%、80.67% ± 8.51%、66.33% ± 3.58% 和61.19% ± 0.97%,50、100 ng/mL NGF 可顯著促進細胞遷移(P  lt; 0.05)。 結論 NGF 對人真皮成纖維細胞增殖、細胞周期及Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達無影響,不能促進膠原合成,但能促進人真皮成纖維細胞遷移。

引用本文: 甘樺麗,解慧琪,陳曉禾,羅靜聰. NGF 對人真皮成纖維細胞增殖、細胞周期、膠原合成及遷移影響的體外研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(11): 1350-1354. doi: 復制