• 華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(上海,200237);

目的 研究CD34+ 細(xì)胞體外誘導(dǎo)的肝樣細(xì)胞在小鼠體內(nèi)修復(fù)受損肝組織的作用。 方法 采用密度梯度離心法分離臍血中的單個(gè)核細(xì)胞并獲得富集CD34+ 細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度為1 × 105 個(gè)/mL,使用含干細(xì)胞生長因子(stem cell factor,SCF)、肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)、EGF、抑瘤素M(oncostatin M,OSM)和bFGF的無血清培養(yǎng)基(5 種細(xì)胞因子濃度分別為50、20、20、10、10 ng/mL)體外誘導(dǎo)10 d。取6 周齡雌性ICR 小鼠48 只,以二乙酰氟氨和CCl4 注射制備肝損傷模型。將小鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組(n=24),實(shí)驗(yàn)組將誘導(dǎo)后細(xì)胞(1.6 × 105 個(gè) / 只,含CD34+ 細(xì)胞1 × 104 個(gè))通過尾靜脈注射入肝損傷小鼠體內(nèi),對照組注射等量無血清培養(yǎng)基,術(shù)后7、14、21、28 d 兩組分別處死6 只小鼠,行HE 染色、PCR 凝膠電泳、免疫組織化學(xué)染色及肝功能檢測。 結(jié)果 HE 染色顯示,對照組術(shù)后28 d時(shí)肝組織形態(tài)恢復(fù)正常,實(shí)驗(yàn)組術(shù)后14 d 時(shí)即已恢復(fù)正常。PCR 凝膠電泳和免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組術(shù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)在肝組織中均可檢測到表達(dá)人血清白蛋白的細(xì)胞,而對照組術(shù)后28 d 內(nèi)均未檢測到。肝功能檢測結(jié)果顯示,對照組術(shù)后14 d 時(shí)谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性恢復(fù)正常,實(shí)驗(yàn)組小鼠術(shù)后7 d 時(shí)即已恢復(fù)正常;但兩組谷草轉(zhuǎn)氨酶活性在28 d 內(nèi)均未恢復(fù)。 結(jié)論 CD34+ 細(xì)胞經(jīng)體外向肝細(xì)胞方向誘導(dǎo)分化后,能在肝損傷的小鼠體內(nèi)促進(jìn)受損肝組織形態(tài)和功能的恢復(fù),并能在小鼠受損肝臟中轉(zhuǎn)化為人源肝細(xì)胞。

引用本文: 鄢玲莉,蔡海波,陳袆祺,譚文松. CD34+ 細(xì)胞體外誘導(dǎo)的肝樣細(xì)胞在小鼠體內(nèi)修復(fù)受損肝組織的研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(10): 1235-1240. doi: 復(fù)制