探討全反式維甲酸（all-trans-retinoic acid，ATRA）體外促神經干細胞（neural stem cells，NSCs）分化為神經元過程中Wnt-1 表達的變化，及Wnt-1 對NSCs 分化的作用。 方法 取孕12 ～ 16 d SD 大鼠，分離和培養(yǎng)鼠胚NSCs。取第3 代NSCs 調整密度為1 × 106 個/mL，分別用0.5、1.0、5.0、10.0 μmol/L 濃度的ATRA 干預，通過熒光雙標染色技術和流式細胞儀檢測各組細胞神經元分化率，確定1.0 μmol/L 濃度為ATRA 促NSCs 分化的最佳濃度。實驗組用1.0 μmol/L ATRA 誘導體外培養(yǎng)第3 代NSCs，培養(yǎng)3、5、7、9 d 后用免疫細胞化學染色、實時熒光定量PCR、Westernblot 檢測Wnt-1 表達的變化；對照組不加ATRA 培養(yǎng)。 結果 免疫細胞化學染色示對照組Wnt-1 蛋白表達極少；實驗組3 d 時表達最強，陽性細胞多；培養(yǎng)5 d 仍可見Wnt-1 陽性表達；3、5 d 時積分吸光度（IA）值與對照組比較，差異有統計學意義（P lt; 0.05）；7、9 d Wnt-1 陽性表達明顯減少，IA 值與對照組比較差異無統計學意義（P gt; 0.05）。實時熒光定量PCR 檢測示對照組Wnt-1 mRNA 相對表達量為0.021 7 ± 0.072 1；實驗組相對表達量隨時間增加逐漸降低，3、5 d 時分別為0.512 2 ± 0.280 0、 0.216 4 ± 0.887 0，與對照組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05） ；7、9 d 分別為0.038 5 ± 0.299 4、0.035 5 ± 0.309 5，與對照組比較差異無統計學意義（P gt; 0.05）。Western blot 印跡檢測可見特異染色條帶，對照組Wnt-1蛋白表達量為0.005 1 ± 0.558 3；實驗組表達量隨時間增加逐漸降低，3、5 d 時分別為0.451 7 ± 0.071 3、0.311 7 ± 0.080 5，與對照組比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05） ；7、9 d 分別為0.007 3 ± 0.052 7、0.004 7 ± 0.931 4，與對照組比較差異無統計學意義（P gt; 0.05）。 結論 在濃度為1.0 μmol/L 的ATRA 誘導下，Wnt-1 與NSCs 的分化早期成正調控，可能與激活包括經典的Wnt 信號途徑等信號有關，表明Wnt-1 與NSCs 向神經元的分化有關。
引用本文： 鐘德君,康敏,王清,張德勝,宋躍明. Wnt-1 在全反式維甲酸促鼠胚神經干細胞向神經元分化中的作用. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(6): 742-746. doi: 復制