目的 細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）因其良好的生物安全性和生物相容性，以及具有細(xì)胞識(shí)別及黏附位點(diǎn)等優(yōu)勢(shì)而廣泛用作組織工程支架材料。探討神經(jīng)來(lái)源天然ECM 的制備方法及用于神經(jīng)組織工程支架的可行性。 方法 收集新鮮犬坐骨神經(jīng)10 根，采用低滲凍融、機(jī)械粉碎、差速離心法制備神經(jīng)ECM。采用掃描電鏡觀察其形態(tài)特征；Ⅰ型膠原、層粘連蛋白、纖維連接蛋白免疫熒光染色觀察其組成成分，并用Hoechst33258 熒光染色檢測(cè)其去細(xì)胞程度；行天狼猩紅、番紅O、甲苯胺藍(lán)染色，對(duì)其成分進(jìn)行定性分析；采用生化定量檢測(cè)神經(jīng)ECM 中總膠原和葡萄糖胺聚糖（glycosaminoglycan，GAG）的含量；將大鼠背根神經(jīng)節(jié)和大鼠雪旺細(xì)胞分別與神經(jīng)ECM 膜共培養(yǎng)，采用免疫熒光染色觀察神經(jīng)組織以及細(xì)胞在ECM 膜上的生物相容性。 結(jié)果 掃描電鏡觀察示神經(jīng)ECM 為直徑30 ～ 130 nm 的二維納米微絲。免疫熒光染色示Ⅰ型膠原、層粘連蛋白、纖維連接蛋白染色均呈陽(yáng)性；Hoechst33258 熒光染色提示神經(jīng)ECM 去細(xì)胞完全。組織化學(xué)染色示天狼猩紅、番紅O、甲苯胺藍(lán)染色均呈陽(yáng)性。生化成分定量檢測(cè)神經(jīng)ECM 總膠原含量為（114.88 ± 13.33）μg/mg 干重，與正常神經(jīng)組織的（54.07 ± 5.06） μg/ mg 干重比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）；神經(jīng)ECM 的GAG 含量為（17.52 ± 2.34）μg/mg 干重，與正常神經(jīng)組織的（25.25 ± 1.56） μg/mg 干重比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。大鼠背根神經(jīng)節(jié)培養(yǎng)7 d 后，可見(jiàn)神經(jīng)絲蛋白200 免疫熒光染色呈陽(yáng)性；大鼠雪旺細(xì)胞培養(yǎng)2 d 后，可見(jiàn)S100 免疫熒光染色呈陽(yáng)性。 結(jié)論 神經(jīng)ECM 富含Ⅰ型膠原、層粘連蛋白、纖維連接蛋白等成分，具有良好的細(xì)胞相容性，可作為一種理想的神經(jīng)組織工程支架材料。
引用本文： 王玉,彭江,趙喆,黃靖香,趙斌,張莉,眭翔,許文靜,陳繼鳳,盧世璧. 神經(jīng)來(lái)源天然細(xì)胞外基質(zhì)的制備方法及生物相容性評(píng)價(jià). 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2010, 24(9): 1128-1132. doi: 復(fù)制