• 遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院骨科(遼寧錦州,121000);

目的 研究BMSCs 移植對(duì)大鼠脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)、VEGF 基因表達(dá)和血管生成的影響,探討B(tài)MSCs 治療SCI 的機(jī)制。 方法 取5 只4 周齡Wistar 雄性大鼠骨髓,分離培養(yǎng)BMSCs,取第3 ~ 4 代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取Wistar 雌性成年大鼠87 只,體重220 ~ 250 g,隨機(jī)分為假手術(shù)組(A 組,21 只)、DMEM注射組(B 組,33 只)和BMSCs 移植組(C 組,33 只)。A 組僅咬除T8 ~ 10 棘突和椎板;B、C 組參照Nystrom 方法制備T8 ~ 10 SCI 模型,傷后30 min C 組注射BMSCs(共3.0 × 105 個(gè)),B 組注射等量DMEM。于術(shù)后3、7、14、28 d 采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)評(píng)分法評(píng)價(jià)大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能;術(shù)后3、7、14、28 d 應(yīng)用Ⅷ因子免疫組織化學(xué)染色行微血管計(jì)數(shù)觀測(cè)血管生成情況;術(shù)后1、3、5 d 應(yīng)用RT-PCR 法檢測(cè)損傷脊髓組織內(nèi)VEGF mRNA 的表達(dá)。 結(jié)果 術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)B、C 組大鼠后肢功能隨時(shí)間延長(zhǎng)均有不同程度恢復(fù),各時(shí)間點(diǎn)BBB 評(píng)分與A 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05)。術(shù)后28 d,C 組BBB 評(píng)分顯著高于B 組(P  lt; 0.05),其余時(shí)間點(diǎn)B、C 組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。術(shù)后3 d,B、C 組損傷周圍區(qū)脊髓灰質(zhì)腹側(cè)角內(nèi)微血管數(shù)目明顯少于A 組(P  lt; 0.05);術(shù)后7、14、28 d 與A 組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。C 組術(shù)后3、7 d 脊髓灰質(zhì)腹側(cè)角內(nèi)微血管數(shù)目與B 組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05);但術(shù)后14、28 d 顯著高于B 組(P  lt; 0.05)。各組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)損傷周圍區(qū)脊髓白質(zhì)內(nèi)的微血管數(shù)目比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  gt; 0.05)。RTPCR檢測(cè)示,A 組大鼠脊髓組織內(nèi)VEGF mRNA 表達(dá)水平較低。B、C 組與A 組相比,于術(shù)后1 d 開(kāi)始VEGF mRNA 表達(dá)增加,3 d 時(shí)表達(dá)達(dá)峰值,5 d 時(shí)表達(dá)下降但仍高 于A 組,各時(shí)間點(diǎn)與A 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P  lt; 0.05);C 組各時(shí)間點(diǎn)均高于B 組(P  lt; 0.05)。 結(jié)論 BMSCs 可能通過(guò)上調(diào)VEGF 基因表達(dá)和增加脊髓內(nèi)新生血管而促進(jìn)大鼠SCI 后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)。

引用本文: 于德水,呂剛,曹陽(yáng),栗剛,智曉東,范仲凱. BMSCs 移植對(duì)大鼠脊髓損傷后VEGF 基因和血管生成的影響. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(7): 837-841. doi: 復(fù)制