目的 檢測(cè)聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)/ 柞蠶絲素蛋白(wild antheraea pernyi silk fibroin,WSF)電紡膜與肌腱細(xì)胞的細(xì)胞相容性,探討其作為肌腱組織工程支架材料的可行性。 方法 以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98% 的甲酸為溶劑,配制濃度均為11% 的WSF 溶液、PVA 溶液及PVA/WSF(質(zhì)量配比為9 ∶ 1)溶液,采用電紡絲技術(shù)制備WSF、PVA及PVA/WSF 電紡膜,掃描電鏡觀察電紡成絲情況。取5 只3 日齡SD 大鼠尾腱,體外分離培養(yǎng)肌腱細(xì)胞并傳至第3 代進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。取濃度為1 × 106 個(gè)/ mL 肌腱細(xì)胞分別與PVA 及PVA/WSF 電紡膜復(fù)合培養(yǎng),4、12 h 采用MTT 法測(cè)量細(xì)胞黏
附率。取濃度為4.5 × 103 個(gè)/mL 肌腱細(xì)胞,分別于PVA、1/2 PVA、1/4 PVA、PVA/WSF、1/2 PVA/WSF、1/4 PVA/WSF 電紡膜浸提液中培養(yǎng),MTT 法測(cè)定培養(yǎng)1、3、5、7 d 的吸光度(A)值,并進(jìn)行毒性等級(jí)評(píng)價(jià)。取PVA、PVA/WSF 電紡膜分別與細(xì)胞密度為1 × 106 個(gè)/ mL 的肌腱細(xì)胞懸液100 μL 復(fù)合培養(yǎng)制備細(xì)胞- 材料復(fù)合物,7 d 后行HE 染色觀察,1、3、5、7 d行掃描電鏡觀察。 結(jié)果 WSF 甲酸溶液無(wú)法電紡成絲,PVA 和PVA/WSF 甲醛溶液均可成功電紡成絲。肌腱細(xì)胞與PVA、PVA/WSF 電紡膜復(fù)合培養(yǎng)4 h 后,其細(xì)胞黏附率分別為26.9% ± 0.4%、87.0% ± 1.0%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=100.400,P=0.000);復(fù)合培養(yǎng)12 h 后,其細(xì)胞黏附率分別為35.2% ± 0.6%、110.0% ± 1.7%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=42.500,P=0.000)。體外浸提液毒性評(píng)價(jià)結(jié)果顯示,培養(yǎng)后1、3、5、7 d 各種電紡膜間細(xì)胞A 值比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);1/2 PVA和1/4 PVA 浸提液細(xì)胞毒性等級(jí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。細(xì)胞- 材料復(fù)合物的組織學(xué)及掃描電鏡觀察顯示肌腱細(xì)胞均可黏附于PVA、PVA/WSF 電紡膜表面,但PVA/WSF 電紡膜上細(xì)胞較多。 結(jié) 論 PVA/WSF 電紡膜支架材料具有良好的細(xì)胞相容性,有望成為肌腱組織工程的理想支架。
引用本文: 吳琳琳,李敏,趙晉,陳登龍,周志華. 聚乙烯醇/ 柞蠶絲素蛋白材料作為肌腱組織工程支架材料的初步研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(2): 181-186. doi: 復(fù)制
版權(quán)信息: ?四川大學(xué)華西醫(yī)院華西期刊社《中國(guó)修復(fù)重建外科雜志》版權(quán)所有,未經(jīng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、改編